臨床生化檢驗并不是你想的那么簡單

龐春勇

生化檢驗屬于臨床檢驗醫(yī)學(xué)十分重要的一項工作，檢驗結(jié)果與疾病診斷、治療方法均息息相關(guān)，因此，控制生化檢驗質(zhì)量至關(guān)重要。人們比較熟悉的生化檢驗包括肝功能檢驗、腎功能檢驗、血脂檢驗、血糖檢驗、電解質(zhì)檢驗等，涉及的常見指標(biāo)如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總蛋白、白蛋白、總膽紅素、尿素氮、甘油三酯、總膽固醇、血糖等。其實，臨床生化檢驗并非人們思想觀念所認知的那么簡單，唯有確保各個檢驗環(huán)節(jié)正確無誤，才可得到準(zhǔn)確結(jié)果，達到臨床檢驗意義，以下簡單從檢驗各環(huán)節(jié)入手探討保證檢驗質(zhì)量的措施。

1 實驗樣本的分離與檢測操作

實驗樣本的及時分離與檢測是保證獲取正確結(jié)果的基礎(chǔ)與前提。例如，部分生化檢驗需要通過測定NADH向NAD轉(zhuǎn)化率獲取結(jié)果，均會受到血液存放時間的干擾，其原因主要由于血液隨著保存時間的增長，紅細胞會利用血清內(nèi)糖分完成無氧酵解，形成丙酮酸，而丙酮酸會促進NADH向NAD轉(zhuǎn)化，造成結(jié)果的錯誤升高。另外，糖酵解期間，血液內(nèi)葡萄糖會發(fā)生5%-7%的下降，所以，在進行此類生化檢驗時，應(yīng)同臨床做好充分溝通，保證樣本的及時送檢，盡量縮小對結(jié)果的影響。

2 抗凝劑的運用

當(dāng)前，臨床比較常用的抗凝藥劑主要包括肝素、EDTA-2K、枸鹽酸納等，一些抗凝藥劑對某項生化指標(biāo)檢驗結(jié)果有一定影響，因此需要合理選擇抗凝劑。例如：在進行總膽汁酸、巖藻糖糖甘酸指標(biāo)檢驗時，就不可選用肝素作為抗凝劑，這是由于肝素會導(dǎo)致試劑渾濁，從而影響吸光度，造成結(jié)果錯誤偏高。因而，操作人員需要熟練掌握試劑的說明及注意事項，提高樣本采集質(zhì)量。

3 儀器用水

儀器用水質(zhì)量與生化檢驗結(jié)果密切聯(lián)系，在檢測離子項目時，如鈣離子、鎂離子、銅離子、鐵離子等，應(yīng)保證儀器用水符合相關(guān)要求。目前，盡管多數(shù)醫(yī)院生化檢驗設(shè)備均自帶制水系統(tǒng)，然而該系統(tǒng)僅可以制取離子水，制取完成的水在一段時間后水質(zhì)會出現(xiàn)改變，因此需要密切關(guān)注產(chǎn)水電阻，數(shù)值超標(biāo)及時更換水機濾芯，不然很容易出現(xiàn)因水中富含離子而造成電導(dǎo)較高問題。而利用該水沖洗設(shè)備會對檢驗結(jié)果造成影響。再例如，在檢驗血氨等指標(biāo)時，一旦水質(zhì)較差，設(shè)備內(nèi)氨成分較高，會造成結(jié)果的偏差。

4 試劑的使用

（1）參數(shù)的正確設(shè)置

生化分析儀可根據(jù)用戶的需求進行人工設(shè)定，例如樣本劑量、試劑劑量、光波波長、延遲時間、分析時間等具體信息。舉例來說，在使用肌酐苦味酸測定方式時，堿性環(huán)境下延遲時間設(shè)定為50s，則苦味酸能夠與乙酰乙酸等試劑發(fā)生快速反應(yīng)，從而產(chǎn)生紅色的產(chǎn)物。而如果將延遲時間更改為120s后，堿性環(huán)境下的苦味酸則還能對自身的反應(yīng)產(chǎn)生干擾，因此進行肌酐苦味酸檢驗時延遲時間必須控制在50s至60s之間，可有效降低后續(xù)慢性反應(yīng)對早期快速反應(yīng)產(chǎn)物的干擾，可保證肌酐測量值的準(zhǔn)確性。同時需要注意的是，各檢驗試劑的說明書中標(biāo)注的設(shè)置參數(shù)均是經(jīng)過無數(shù)次實驗后獲得的合理指標(biāo)，但在實際應(yīng)用時需結(jié)合實驗室設(shè)備運行狀態(tài)、樣本情況等綜合考量，可在指標(biāo)波動允許范圍內(nèi)適當(dāng)調(diào)整參數(shù)。

（2）校準(zhǔn)液的正確使用

目前由廠家直接配套的校準(zhǔn)液只能針對單一分析方式使用，即便同一分析項目運用不同分析方式所使用的校準(zhǔn)液也需要更換，不能出現(xiàn)混用的情況。舉個例子，使用膽紅素釩酸鹽法檢驗過程中如使用重氮法的校準(zhǔn)液，對分析結(jié)果會造成明顯影響，導(dǎo)致結(jié)果準(zhǔn)確度下降。有時也會出現(xiàn)同一分析方式，但校準(zhǔn)液生產(chǎn)廠家不同，分析結(jié)果也會出現(xiàn)差異。因此在實際工作時，應(yīng)從經(jīng)驗中總結(jié)出適合自己所在實驗室的校準(zhǔn)液，要求各影響因素均降到最低。

（3）開瓶的穩(wěn)定性

在考量檢驗用試劑本身穩(wěn)定性時的重要指標(biāo)之一即為開瓶穩(wěn)定性，在實際檢驗當(dāng)中，大多數(shù)試劑在開瓶置于分析儀內(nèi)后均需要定時定標(biāo)，例如ALP、TP等呈堿性的分析試劑，其在開瓶后會自主吸收空氣當(dāng)中的CO2，以使試劑本身趨于中性，如長時間未進行定標(biāo)校準(zhǔn)，則使用該試劑進行的分析結(jié)果就會出現(xiàn)誤差。很多實驗室均為圖省事，開瓶后長時間不進行定標(biāo)，使得分析結(jié)果誤差率大幅提升。因此，在分析設(shè)備內(nèi)存放的試劑量應(yīng)以日常1d至2d用量為宜，如放置時間過長需及時校準(zhǔn)或更換。

（4）不同批號試劑的混用

在不同批號試劑均剩余不多時，將其混合在一起使用是試劑工作中常出現(xiàn)的情況，也是降低實驗室運營成本的方法之一。但由于不同批號試劑在生產(chǎn)時間上存在一定的差異，試劑內(nèi)的酶活性就會明顯不同，如想要混合使用就必須在混合后進行定標(biāo)或校準(zhǔn)，以降低檢驗結(jié)果的誤差。加之試劑開瓶后難以避免地會被粉塵、細菌等污染，尤其是細菌對實際影響較大，雖然少部分試劑生產(chǎn)時會加入防腐劑以保持穩(wěn)定，但防腐劑的含量和作用均有限，而絕大多數(shù)的試劑并沒有加入防腐劑。因此，不建議對不同批號試劑進行混合使用，如不得不混合則必須重新定標(biāo)后才能使用。

總之，想要保證臨床生化檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確，就需要由樣本的分離與檢驗、抗凝劑的使用、儀器用水的控制、試劑的正確使用等多方面入手予以質(zhì)量控制，唯有如此，才可消除實驗誤差，保證實驗精度，為臨床疾病的診治提供參考。