益氣化痰方輔助治療對晚期非小細胞肺癌患者化療敏感性的影響及作用機制

王冰 姜華

摘要 目的：探討益氣化痰方輔助治療對晚期非小細胞肺癌（NSCLC）患者化療敏感性的影響及作用機制。方法：選取2012年8月至2017年9月本溪市中心醫院收治的晚期NSCLC患者80例作為研究對象，按照隨機數表法分為對照組和觀察組，每組40例。對照組接受常規化療，觀察組接受益氣化痰方輔助常規化療。比較2組患者治療前后腫瘤絕對體積、腫瘤標志物及血管新生標志物水平、病灶活檢組織中耐藥基因表達的差異。結果：治療前，2組腫瘤絕對體積、腫瘤標志物及血管新生標志物水平、病灶活檢組織中耐藥基因表達差異無統計學意義（P>0.05）。治療2療程后，觀察組患者肺部原發病灶腫瘤絕對體積小于對照組;血清中腫瘤標志物鱗狀細胞癌相關抗原（SCC-Ag）、細胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖類抗原125（CA125）的水平低于對照組;血清中血管新生標志物基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）、血管內皮生長因子（VEGF）、血小板反應蛋白-1（TSP-1）、內皮素-1（ET-1）的水平低于對照組，TSP-1的水平高于對照組;病灶組織中耐藥基因MRP、MDR1、LRP mRNA的表達低于對照組（P<0.05）。結論：晚期NSCLC患者在化療同時加入益氣化痰方輔助治療，可進一步提升患者的化療敏感性，具體與該藥物抑制耐藥基因表達直接相關。

關鍵詞 晚期非小細胞肺癌;益氣化痰方;化療敏感性;耐藥基因;腫瘤絕對體積;腫瘤標志物;血管新生標志物;順鉑

Abstract Objective：To study the effects of Yiqi Huatan Decoction adjuvant therapy on chemosensitivity in advanced non-small cell lung cancer（NSCLC）patients and its mechanism.Methods：A total of 80 cases of advanced NSCLC patients in Benxi City Center Hospital during August 2012 to September 2017 were divided into a control group（n=40）underwent conventional chemotherapy and an observation group（n=40）underwent Yiqi Huatan Decoction adjuvant therapy combined with conventional chemotherapy according to the random number table.The difference of tumor absolute volume，contents of tumor markers and neovascularization markers，and the expression of resistance genes in the biopsy tissues of the 2 groups were compared before and after treatment.Results：Before treatment，there were no significant difference between the 2 groups in total volume of tumor，contents of tumor markers and neovascularization markers，expression of resistance genes in the biopsy tissue between the 2 groups（P>0.05）.2 courses after treatment，the absolute volume of primary lung tumor in the observation group was less than that in control group; serum contents of tumor markers such as SCC-Ag，CYFRA21-1 and CA125 were lower than those in the control group; serum contents of neovascularization markers such as MMP-2，VEGF and ET-1 in the observation group were lower than those in the control group，and TSP-1 was higher than that in the control group; the expression of resistance genes such as MRP，MDR1，LRP mRNA in the observation group were lower than those in the control group（P<0.05）.Conclusion：Yiqi Huatan Decoction adjuvant therapy for advanced NSCLC patients bases on chemotherapy，can further enhance the sensitivity of chemotherapy，which is directly related to the drug resistance gene expression.

Key Words Advanced non-small cell lung cancer; Yiqi Huatan Decoction; Chemosensitivity; Drug-resistant gene; Absolute volume of tumors; Tumor markers; Angiogenesis markers; Cisplatin

中圖分類號：R289.5;R734.2文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.06.040

非小細胞肺癌（Non-small Cell Lung Cancer，NSCLC）發病率占總肺癌的80%～85%，近年來發病率不斷攀升且有年輕化趨勢。由于早期臨床表現不典型，許多患者臨床確診時已是晚期，保守藥物治療是其延長生存時間的唯一方法[1-2]。目前靜脈化療藥物的使用是晚期NSCLC患者最普遍的治療方法，在獲取療效的同時也對正常組織細胞帶來損傷，部分患者隨化療療程延長甚至出現耐藥性，這部分患者的治療預后往往不佳[3-4]。減輕化療耐藥性或者增加患者對化療藥物的敏感性是晚期癌癥患者治療結局優化的可靠方式。目前國內研究顯示不少中成藥具有這一作用，故尋找能最大程度增加機體化療敏感性的中藥方劑成為當下臨床研究的重點。益氣化痰方是呼吸系統感染性疾患的主要治療方劑之一，有學者認為其可能對晚期NSCLC患者的病情有優化作用，但具體相關研究開展不多。我們回顧性分析晚期NSCLC單純應用靜脈化療，以及在靜脈化療基礎上加入益氣化痰方輔助治療的療效，并進一步分析治療結局出現的可能機制，以期明確該中藥方劑在晚期NSCLC患者中應用的可行性及有效性。

1 資料與方法

1.1 病例資料 選取2012年8月至2017年9月本溪市中心醫院收治的晚期NSCLC患者80例作為研究對象，按照隨機數表法分為對照組（常規化療）和觀察組（益氣化痰方輔助常規化療），每組40例。對照組中男22例、女18例，年齡43～75歲，平均年齡（62.18±13.47）歲，病程3～24個月，平均病程（0.68±0.11）年;觀察組中男21例、女19例，年齡41～76歲，平均年齡（62.09±14.15）歲，病程3～24個月，平均病程（0.66±0.13）年。2組一般資料比較，差異有統計學意義（P>0.05），具有可比性。醫院倫理委員會審核、批準本研究計劃（倫理審批號：283928193）。

1.2 診斷標準 參照第12版《實用內科學》及《內科學》中肺癌的診斷標準。肺癌的臨床分期采用美國聯合癌癥分類委員會（AJCC）和國際抗癌聯盟（UICC）2002年制定的肺癌TNM分期標準，對肺癌進行臨床分期。

1.3 納入標準 1）確診NSCLC病理診斷;2）腫瘤分期為晚期;3）預計生存時間≥3個月;4）患者或家屬簽署知情同意書。

1.4 排除標準 1）合并其他原發惡性腫瘤性疾病;2）入院前6個月內無化療史;3）治療期間出現嚴重藥物過敏并致治療中斷;4）自主中途退出治療;5）合并嚴重自身免疫性疾病。

1.5 治療方法 對照組患者接受標準DP化療方案：多西他賽（深圳萬樂藥業有限公司，國藥準字H20052067），75 mg/m2，靜脈滴注，d1;順鉑（齊魯制藥有限公司，國藥準字H37021358）25 mg/m2，靜脈滴注，d1～d3。21 d為1個療程，連續治療2個療程。

觀察組患者在標準化療基礎上加入益氣化痰方輔助治療。具體如下：黨參、薏苡仁、五爪龍、枳實各30 g，天冬、白術各20 g，茯苓、浙貝母、生半夏、山楂各15 g，守宮6 g，所用中藥由本院中藥房提供，指定專人配置。加水800 mL煎至150 mL，分2次飯后溫水服用，30 d為1個療程，持續治療2個療程。在化療開始第1天開始服用益氣化痰方。

1.6 觀察指標 治療前、治療2個療程后，2組患者均接受肺部三維CT重建，使用Image J圖像處理軟件并選擇感興趣區域、測量并計算肺原發病灶腫瘤絕對體積。在上述相同時間點留取2組患者的外周血標本，分離血清并測定其中腫瘤標志物及血管新生標志物的水平，腫瘤標志物包括鱗狀細胞癌相關抗原（SCC-Ag）、細胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖類抗原125（CA125），血管新生標志物包括基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）、血管內皮生長因子（VEGF）、血小板反應蛋白-1（TSP-1）、內皮素-1（ET-1）。CT機為飛利浦16層Brilliance CT，酶聯免疫試劑盒購自上海西唐生物科技公司。

治療前、治療2個療程后，均采用歐太纖維支氣管內鏡OIF-BT66進行肺內病灶活檢，采用熒光定量PCR法檢測活檢組織中耐藥基因MRP、MDR1、LRP mRNA的表達。設置對照組病灶治療前上述目標基因表達量為標準值100，計算各組不同時間點的相對表達。熒光定量PCR法中的試劑均購自美國Sigma公司，反轉錄試劑盒、熒光定量PCR試劑盒購自賽默飛世爾科技公司。

1.7 統計學方法 采用SPSS 20.0統計軟件處理數據。計量資料以均數±標準差（±s）表示，用t檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組患者腫瘤絕對體積比較 治療前，2組患者肺部原發病灶腫瘤絕對體積的差異無統計學意義（P>0.05）。治療2個療程后，2組患者肺部原發病灶腫瘤絕對體積均小于治療前;且觀察組患者肺部原發病灶腫瘤絕對體積小于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 2組患者腫瘤標志物比較 治療前，2組患者血清中腫瘤標志物SCC-Ag、CYFRA21-1、HE4、CA125水平的差異無統計學意義（P>0.05）。治療2個療程后，2組患者血清中SCC-Ag、CYFRA21-1、CA125的水平均低于治療前，且觀察組血清中SCC-Ag、CYFRA21-1、CA125的水平低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.3 2組患者血管新生標志物比較 治療前，2組患者血清中血管新生標志物MMP-2、VEGF、TSP-1、ET-1水平的差異無統計學意義（P>0.05）。治療2療程后，2組患者血清中MMP-2、VEGF、ET-1的水平低于治療前，TSP-1的水平高于治療前;且觀察組血清中MMP-2、VEGF、ET-1的水平低于對照組，TSP-1的水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。

2.4 2組患者耐藥基因表達比較 治療前，2組病灶標本中耐藥基因MRP、MDR1、LRP mRNA表達的差異無統計學意義（P>0.05）。治療2個療程后，對照組病灶組織中MRP、MDR1、LRP mRNA的表達與治療前差異無統計學意義（P>0.05），觀察組病灶組織中MRP、MDR1、LRP mRNA的表達低于治療前，差異有統計學意義（P<0.05）;且觀察組病灶組織中MRP、MDR1、LRP mRNA的表達低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表4。

3 討論

中醫對NSCLC病機的認識包括內外兩部分，其中以正虛之內因為主，惡毒內侵與痰濁、瘀血等相雜終成癌變。肺內正常細胞突變為腫瘤細胞，是一個“淤聚熱毒、不斷生發”的質變過程。呂文姣等[5]的研究指出，中藥方劑益氣化痰方可減輕NSCLC患者化療相關性疲勞、增加患者對化療相關不良反應的耐受性。故有學者推測該方劑具有增加晚期NSCLC患者化療敏感性的作用，但這一相關內容目前臨床研究不多。

益氣化痰方中主要作用藥物包括黨參、五爪龍、枳實、茯苓、白術、山楂等，由溫膽湯化載，其中溫膽湯化具有理氣和胃、化痰降濁之功效;黨參補脾益氣;五爪龍健脾化痰、行氣除濕;白術、枳實調脾胃而消胸痞;白術、茯苓利濕除痰;山楂消食痰而通血脈[6]。我們將益氣化痰方加入治療后，觀察組患者的腫瘤絕對體積降低，明顯小于對照組患者的治療后體積，直觀顯示了益氣化痰方聯合靜脈化療在腫瘤殺滅作用方面帶來的提升。上述結果的出現可能與化療導致機體虛弱、脾胃功能失調，而益氣化痰方諸藥共奏益氣除痰、解毒散結等功效，有助于減輕化療所致患者免疫功能抑制以及多種正常細胞功能損傷，實現減毒增敏作用。

除腫瘤體積這一宏觀指標之外，血清中存在較多與癌癥患者腫瘤負荷密切相關的指標，其水平變化可客觀反映機體對治療方案的敏感性。觀察組患者化療后血清中腫瘤標志物SCC-Ag、CYFRA21-1、CA125及血管新生標志物MMP-2、VEGF、TSP-1、ET-1的水平均較低。SCC-Ag、CYFRA21-1、CA125已在不同研究中被證實與NSCLC的診斷及病情評估密切相關，其水平一般與腫瘤分期正相關[7-9]。腫瘤細胞的惡性程度演變有賴于腫瘤內部血管形成并提供氧氣、養分，故在惡性腫瘤組織中存在MMP-2、VEGF等促血管內皮細胞增殖、遷移因子的過表達[10-11];ET-1近年也被發現參與惡性腫瘤的血管生成，其可能在缺氧條件下代償性增加，并進一步誘導內皮細胞釋放MMP-2、VEGF等強效促血管生成因子[12];

TSP-1是具有血管新生抑制作用的因子，可抑制血管內皮生長并誘導其凋亡[13-14]。上述結果的出現從血清學角度說明益氣化痰方輔助治療可進一步降低晚期NSCLC患者的腫瘤負荷，與觀察組患者腫瘤體積縮小這一結果吻合，再次證實了益氣化痰方在增加機體化療敏感性方面的作用。

益氣化痰方的上述減毒增敏作用實現機制尚未完全明確，推測與其改變機體耐藥基因表達相關。本研究觀察組患者治療后病灶活檢標本經熒光定量PCR檢測后發現，其中耐藥基因MRP、MDR1、LRP mRNA的表達均較低。MRP、MDR1、LRP是目前發現的與肺癌耐藥密切相關的基因，其中MRP、MDR1過表達可使細胞毒藥物進入細胞內后很快被泵出、進而出現耐藥現象[15-16];LRP過表達可直接影響細胞的胞內轉運、分布，導致靶點藥物的有效濃度下降[17]。上述結果證實益氣化痰方輔助治療可有效抑制晚期NSCLC組織的耐藥基因表達，這也是其增加機體化療敏感性的主要機制。

綜上所述，晚期NSCLC患者在常規靜脈化療基礎上加入中藥益氣化痰方進行輔助治療，可進一步導致腫瘤體積縮小以及血清學腫瘤負荷相關指標水平下降，其具體機制與該藥物減少腫瘤耐藥基因表達直接相關。但本研究所選病例數相對較少，具體結果可能存在一定偏倚。

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（2018-09-16收稿 責任編輯：楊覺雄）