氣質聯(lián)用法測定茶葉中噠螨靈殘留量

郭丹 郭平葉 祁冰 劉利霞 李梅

摘要：應用氣相色譜-質譜 GC-MS對茶葉中噠螨靈殘留物進行檢測，并對試樣的前處理過程進行了改進。試樣經乙腈提取，用無水MgSO4、C18、PSA、GBC填料按照一定比例混合后凈化，用氣相色譜-質譜儀進行檢測。結果表明：噠螨靈在0.01～0.50μg/mL濃度范圍內呈線性關系，相關系數(shù)R^2 = 0.99996;在高、中、低3個添加濃度水平下，平均回收率為97.8%～100.5%，相對偏差為0.8%～3.1%;檢出限為0.0050mg/kg。本方法快速、簡便、經濟且具有較高的靈敏度，是一種很好的茶葉農殘檢測方法。

關鍵詞：茶葉;噠螨靈;氣相色譜-質譜儀

隨著人們生活水平的日益提高，食品安全也成為了人們關注的焦點問題，目前，茶葉中噠螨靈殘留量測定已列為我國植物性食品檢驗的重要內容之一。噠螨靈為廣譜、觸殺性殺螨劑，可用于防治多種食植物性害螨。對螨的整個生長期即卵、幼螨、若螨和成螨都有很好的防治效果，對移動期的成螨同樣有明顯的速殺作用。

對于噠螨靈殘留量的危害性，世界各國也引起了相當高的重視。我國規(guī)定茶葉中噠螨靈最大殘留限量為5.0mg/kg，歐盟規(guī)定茶葉中噠螨靈最大殘留量為0.02mg/kg，且重點監(jiān)測，要求較為嚴格，這使得噠螨靈農藥殘留成為影響我們茶葉出口的綠色壁壘。為了達到茶葉中噠螨靈殘留的檢測要求，采用快速、準確的噠螨靈殘留量檢測方法勢在必行，同時對其他食品中噠螨靈的檢測具有一定的參考意義。

材料與方法

材料與試劑。噠螨靈標準品（純度99.0%）? Dr公司;環(huán)氧七氯標準品（純度99.0%）Dr公司;乙腈（色譜純）Fisher公司;無水硫酸鎂（分析純）西隴公司;C18、PSA、GBC（安譜公司）;丙酮（色譜純）Fisher公司儀器與設備。氣相色譜-質譜儀（型號7890B+5977B）美國安捷倫公司;渦旋振蕩器 德國IKA公司;超聲儀：AS30600;離心機：京立牌LD4-8;氮吹儀：安譜24位氮吹儀標準工作液的配制。1.0 mg/mL噠螨靈標準貯備液：精密稱取噠螨靈對照品10mg于10mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀釋定容至刻度，搖勻。-20℃以下保存，有效期6個月。

100 μg/mL噠螨靈標準中間液：精密量取1mg/mL噠螨靈標準貯備液1.0mL，于10mL量瓶中，用丙酮溶解稀釋定容至刻度。2-4℃以下保存，有效期3個月。

1.0 μg/mL噠螨靈標準使用液：精密量取100 μg/mL噠螨靈標準中間液100μL，于10mL量瓶中，用丙酮溶解稀釋定容至刻度。2-4℃以下保存，有效期1個月。

色譜條件。色譜柱：HP-5MS（30.0m*250μm*0.25μm）;離子源：EI;采集模式：SIM;流速：1.0mL/min;離子源溫度：230℃;四極桿溫度：150℃;傳輸線溫度：280℃;溶劑延遲：5min;程序升溫：60℃（0min），20℃/min升至250℃（1min），10℃/min升至280℃（1min），15℃/min升至300℃（2min）;進樣量：1μL;電壓：1195。

樣品前處理。稱取5g試樣于50mL離心管中，加入乙腈15 mL，渦旋混勻，超聲5min，4000r/min離心5min，取上清液，于另一離心管中，再用15 mL乙腈重復提取殘渣一次，合并兩次上清液.上清液氮吹至近干。準確稱取無水MgSO4? 120mg、C18 40mg、PSA 40mg、GBC 20mg于吹至近干的離心管中，精確加入1.0 mL丙酮溶液，40μL環(huán)氧七氯A內標溶液，渦旋混勻，4000r/min離心5min，上清液過0.45μm濾膜，供氣相色譜-質譜儀測定。

結果與分析

提取方法的改進。國標方法GB/T 23204-2008中，旋轉蒸發(fā)儀提取樣品過程耗時過多，一次只能提取一個樣品，在用溶劑溶解雞心瓶中樣品時，存在溶解不完全的可能，嚴重影響了試驗的重復性和回收率。本方法改用氮吹儀吹干的方法，此方法不用進行樣品的轉移，而且能夠保證樣品完全溶解，重復性和回收率良好，也大大提高了試驗的工作效率。

凈化方法的改進。國標方法中凈化步驟選擇過TPT固相萃取柱，多次進行小柱的活化，淋洗，洗脫，不僅操作過程繁瑣，而且會有目標物殘留在TPT小柱上，造成回收率偏低等現(xiàn)象。本方法中凈化步驟改用無水MgSO4、C18、PSA、GBC四種混合物對氮吹后復溶的樣品進行凈化，操作簡便，還可以去除茶葉中的雜質和茶油，凈化效果明顯，同時保證目標物損失較小，試驗的回收率較好。對無水MgSO4、C18、PSA、GBC四種物質添加量進行考察，實驗發(fā)現(xiàn)當添加無水MgSO4? 120mg、C18 40mg、PSA 40mg、GBC 20mg時滿足凈化效果且回收率較好。

色譜條件的優(yōu)化。國標中程序升溫時間較長，優(yōu)化色譜條件可以大大節(jié)省做樣時間和節(jié)省載氣。

方法學驗證。（1）方法的線性范圍、檢出限。精密量取1.0μg/mL噠螨靈標準使用液適量，用丙酮溶液進行稀釋，配制成濃度為0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50μg/mL的系列標準溶液，以峰面積-質量濃度作圖，得到標準曲線回歸方程為Y = 85.189858 * X+ 0.270364，相關系數(shù)R^2 = 0.99996764。試驗測得的檢出限為0.0050mg/kg。（2）方法的回收率和精密度。用空白的茶葉基質進行添加回收率和精密度實驗結果見表1。

樣品空白和回收率色譜圖見圖1、圖2。

由圖表可見，樣品的回收率和精密度良好，分析物在出峰時間附近無干擾峰，該法的提取方法、凈化方法、色譜條件都能夠滿足實驗需求，方法可行有效。

結論

以上結果表明，在加標0.0050～0.0250mg/kg的范圍內，回收率在80%～110%之間，相對標準偏差≤10%。該方法簡便、快速、準確，可滿足茶葉中噠螨靈含量檢測。

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