在瑞氏染色中用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液的實際應用

劉興林 劉敏

摘要：在血液常規檢驗中，瑞氏染色的應用非常廣泛，而其中所需要的磷酸鹽緩沖液在基層配制是比較困難的，而用新鮮的蒸餾水可以代替。這樣就可以解決基層開展血液常規檢驗的困難。同時也可以節約成本。

關鍵詞：瑞氏染色;蒸餾水;磷酸鹽緩沖液

一.實驗目的：

在基層應用瑞氏染色時，由于配制磷酸鹽緩沖液所要用的化學試劑的用量不大，而購買成本較大，加上配制時需要分析天平，而基層實驗室基本沒有這些設備，所以，不能配制磷酸鹽緩沖液，而蒸餾水可以用簡單的設備就可以獲取，所以通過用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液對血片做染色，也可以獲得較理想的實驗效果。

二.實驗設計：

1.所需設備和器材：水浴箱，顯微鏡，采血針，推玻片，載玻片。

2.試劑：瑞氏染液，蒸餾水。

3.方法：在室溫（18℃--35℃）條件下。對每批新進的瑞氏染液進行預染。

3.1推制三張血片（需厚薄適于，頭體尾分明，長度合適），并編號：1﹑2﹑3.待血膜完全干透后，用蠟筆固定血膜兩端，滴加適量的瑞氏染液（并開始計時），使染液能覆蓋整個血膜為宜，保留染液濕潤，染色一分鐘，用口徑大致相同的滴管滴加蒸餾水，1號片滴加等量的蒸餾水，2號片滴加兩倍的蒸餾水，3號片滴加三倍的蒸餾水，每片進行混勻。

3.2染色三分鐘時，用顯微鏡（10×）對染色進行觀察，在顯微鏡下，可以觀察到細胞的著色的過程，當血片上的有核細胞的細胞質，細胞核都基本染好后記錄時間。

3.3用流水沖洗掉血膜上的染液，注意不要把血膜沖掉。

3.4染好的血片，待干后，用油鏡（100×）對染色情況進行觀察分析，通過對三張血片的染色情況分析，選擇細胞著色好，細胞質和細胞核染色效果好的血片，作為這批瑞氏染液在染色時染液和蒸餾水用量的比例關系的參考依據。

三.結果分析：

在整個實驗過程中，用水浴箱控制實驗的溫度，保證實驗過程在比較恒定的溫度下進行，以保證實驗的可靠性。通過用蒸餾水代替磷酸鹽緩沖液進行瑞氏染色，不但可以達到染色的良好效果，節約實驗成本，同時可以為基層檢驗工作人員開展血液常規檢驗做出一定的貢獻。

參考文獻：

[1]劉成玉，臨床檢驗基礎實驗指導（人衛版），2003;5（2）：29.

[2]安艷，趙平，臨床檢驗（人衛版），2013;5（2）：160-166.

作者簡介：

劉興林（1965.1-），男，漢族，貴州貴陽市人，高級實驗師，主要從事臨床檢驗和血液學檢驗教學工作。