UPLC法測定醋酸阿托西班注射液含量

陳鴻英 王燕玲

摘要：目的 建立測定醋酸阿托西班注射液含量的UPLC法并進行方法學驗證。方法 色譜條件：以0.05mol/L的磷酸鹽緩沖液pH2.3為流動相A，乙腈為流動相B，梯度洗脫；進樣量2μl，流速0.4ml/min，檢測波長215nm。結果：在0.75～2.25μg范圍內與主峰面積呈良好的線性關系（R2=0.9999）；空白溶劑對該法無干擾；重復性RSD為0.1%，中間精密度RSD為0.2%；溶液穩定性實驗RSD為0.3%；不同加標量的平均回收率為100.10%；耐用性實驗結果顯示各條件檢測結果RSD在1.0%以內；采用HPLC與UPLC對3批樣品的含量測定進行對比，兩法相對偏差均未超過0.5%。結論 UPLC法快速、簡便、準確、專屬性強，適用于醋酸阿托西班注射液含量測定。

關鍵詞 醋酸阿托西班注射液 UPLC 含量

【中圖分類號】186.3 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306（2019）02-135-02

Abstract： Objective Establish the UPLC method for assay of Atosiban Acetate Injection and carry out the methodology validation. Method Chromatographic Conditions： 0.05 mol/L phosphate buffer solution pH 2.3 was used as mobile phase A and acetonitrile was used as mobile phase B to carry out the gradient elution. Injection volume was 2 μl. Flow rate was 0.4 ml/min. Detection wavelength was 215 nm. Results： There was a good linear relationship with the area of the principal peak within the range of 0.75～2.25 μg （R2=0.9999）. The blank solvent had no interference with this method. The RSD of repeatability was 0.1%， the RSD of the intermediate precision was 0.2%， and RSD of the solution stability test was 0.3%. The average recovery rate of different spike quantities was 100.10%. The robustness results revealed that the RSD of the test results under different conditions was within 1.0%. HPLC and UPLC were adopted to compare the assay of 3 batches of sample， and the relative deviations of the two methods were both not more than 0.5%. Conclusions UPLC method was rapid， simple and convenient， accurate and had strong specificity， and it was suitable for assay of Atosiban Acetate Injection.

Key Words；Atosiban Acetate Injection ；UPLC； Content

引言

醋酸阿托西班是催產素拮抗劑，代表一種新的抗分娩藥【1】。醋酸阿托西班注射液能有效抑制宮縮，無明顯副作用，是治療先兆早產有效而安全的方法。【2】目前國內采用HPLC測定其含量和有關物質，其方法檢測時間長，化學試劑用量大，本文參照HPLC含量測定方法建立其含量UPLC測定法。

1 材料

【樣品與對照品】醋酸阿托西班注射液（20180602、20180603、20180701），工作對照品（S01820171101）海南中和藥業股份有限公司制。

【主要試劑及儀器】CQUITY UPLC H-Class型超高效液相色譜儀，ACQ TUV 紫外檢測器；waters C18 2.1 x 50 mm，1.7um色譜柱；磷酸二氫鉀（廣州化學試劑廠 AR）、磷酸（成都市科隆化學品有限公司2017060501、AR）、三乙胺（西隴化工股份有限公司110722、AR）、乙腈（上海星要可高純溶劑有限公司011471201、色譜純）

【色譜條件】以0.05mol/L的磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀6.8g，加水1000ml，用磷酸調pH至2.3，再加入120μl三乙胺，即得）為流動相A，乙腈為流動相B，線性梯度洗脫；流速為0.4ml/min；檢測波長為215nm。同時精密稱取醋酸阿托西班對照品和雜質A對照品適量，加流動相A溶解并制成每1ml分別含醋酸阿托西班和雜質A約0.5mg的混合溶液，作為系統適應性溶液；精密量取2μl注入液相色譜儀。阿托西班峰與雜質A峰的分離度應不少于2.0，理論塔板數按阿托西班峰計算應不低于5000。

2 方法與結果

【系統適用性實驗】稱取醋酸阿托西班對照品和雜質A對照品適量，加流動相A溶解并制成每1ml中分別含醋酸阿托西班和雜質A約0.5mg的混合溶液，作為系統適應性溶液。實驗結果顯示分離度為3.1，理論塔板數為16885。

【專屬性】配制空白溶劑、空白輔料溶液、對照品溶液與供試品溶液，進行輔料干擾分析。結果顯示，空白溶劑與空白輔料在該條件下無吸收峰，對本法無干擾，方法專屬性良好。

【重復性、中間精密度試驗】結果顯示重復性RSD值為0.1%，中間精密度RSD值為0.2%。

【線性實驗】制備含量為0.75mg/ml 的對照品溶液，分別精密量取0、1、1.5、2、2.5、3μl進樣，以主峰峰面積A為縱坐標，進樣體積（μl）為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為Y=1949417x-160684，相關系數為R2=0.999，表明，在進樣量為0.75～2.25μg范圍內與主峰面積呈良好的線性關系。

【準確度試驗】在空白輔料中加入對照品制成加標對照品約為0.6mg/ml、0.75mg/ml、0.9mg/ml的溶液各三份，計算回收率。回收率分別為99.92%、100.53%、99.86%，平均回收率為100.10%，表明方法準確度高。

【溶液穩定性試驗】取供試品溶液，于第0、2、4、8、12小時進樣，進樣5次，計算峰積RSD值。結果顯示RSD為0.3%，表明樣品溶解后在12小時內穩定性良好。

【耐用性試驗】結果顯示RSD均在1.0%以內，表明當色譜柱、流速、柱溫等條件發生微小變化時對含量測定結果無影響。

【UPLC法與HPLC法對比試驗】結果表明，相對偏差均未超過0.5%，該方法與HPLC法的測定結果一致性良好。

3 討論

UPLC分析方法是一種高效、快捷的檢測方法，比HPLC法在檢測時間上節省80%，檢出能力與HPLC法一致。方法驗證結果表明，該法是一種準確、可靠的測定方法。

參與文獻

[1]姚志勇，李新宇，支欽.醋酸阿托西班注射液的處方工藝開發[J]. 中國當代醫藥， 2014（28）.

[2]朱國棟.阿托西班及彌新平用于早產兒的治療.世界核心醫學期刊文摘婦產科學分冊，2006 ，（ 2）： 58.