頭孢克肟聚合物檢查方法建立

周家莉

摘要：本文建立了頭孢克肟聚合物檢查方法，采用TSK gel G2000SWxl凝膠色譜柱。本方法中，頭孢克肟濃度在0.02μg/ml～32.40μg/ml范圍內，與峰面積線性關系良好，線性方程為y=29153x-2740，r為0.9995，方法精密度、耐用性均良好。

關鍵詞：頭孢克肟 聚合物 方法學

【中圖分類號】-3 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306（2019）02-012-03

Development of an analysis method for cefixime polymer

Zhou Jiali

Tianjin Vocational College Of Bioengineering 300000

Abstract： This study developed an analysis method for determination of cefixime by using TSK gel G2000SWxl column. In a range of 0.02 ug/mL to 32.40 ug/mL， the concentration is linear to the peak area， with y=29153x-2740， and r=0.9995. The accuracy and robustness of this method are very good.

Key words： cefixime， polymer， analysis method

頭孢克肟（Cefixime）為口服用的第三代頭孢菌素類抗生素，適用于治療敏感菌所致的呼吸、泌尿和膽道等部位的感染。頭孢克肟對革蘭陰性桿菌產生的β-內酰胺酶高度穩定，對革蘭陰性桿菌抗菌作用強于第一代和第二代頭孢菌素，對革蘭陽性球菌抗菌作用不如第一代和第二代頭孢菌素。目前國家食品藥品監督管理局批準的頭孢克肟制劑有片劑、膠囊劑、分散片、干混懸劑和顆粒劑等多種劑型，均為處方藥。

2015版《中國藥典》未收載頭孢克肟及其制劑的聚合物檢查控制方法。《日本藥局方（JP）》中收載有頭孢卡品酯的聚合物控制，[1]采用以苯乙烯-二乙烯基苯共聚物為基礎的TSK gel G2000色譜柱，國內亦有文獻報道采用苯乙烯為填料的TSK gel G2000SWxl色譜柱，控制注射用頭孢地嗪鈉等品種中聚合物的含量。本文擬定參照文獻《高效液相色譜法測定注射用頭孢地嗪鈉有關物質Ⅱ（聚合物）及其方法學研究》[2]中聚合物測定方法測定頭孢克肟中的聚合物含量，并對該方法進行了詳細的方法學驗證。

1聚合物檢查方法與儀器設備

1.1方法：高效分子排阻色譜法（HPSEC，中國藥典2015年版四部通則0514）

1.2儀器設備：色譜柱：凝膠色譜柱（TSK G2000 SWXL ）

檢測器：紫外檢測器；

1.3色譜條件：

流速：1.0ml/min

流動相：0.005mol/L磷酸鹽緩沖液[0.005mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.005mol/L磷酸二氫鈉溶液（61：39），以磷酸調節pH值至7.0]-乙腈（93：4）

0.1mol/L磷酸鹽緩沖液：取無水磷酸氫二鈉1.9g，磷酸二氫鉀0.9g，加水溶解并稀釋至200ml，混勻。

供試品溶液：稱取本品約25mg，精密稱定，加0.1mol/L磷酸鹽緩沖液2ml使溶解，用水稀釋成0.5mg/ml的供試品溶液；

對照品溶液：稱取頭孢克肟對照品約25mg，精密稱定，加0.1mol/L磷酸鹽緩沖液2ml使溶解，用水稀釋成0.5mg/ml的對照品溶液。

1.4頭孢克肟對照品：中國食品藥品檢定研究院

頭孢克肟膠囊：市售品A、市售品B、市售品C

2聚合物檢查方法學驗證

2.1系統適用性試驗

精密量取上述供試品溶液、對照品溶液及空白溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，試驗結果如下。

結論：上述結果顯示，供試品色譜圖中，本品主成分與主成分峰前的聚合物之間分離度符合規定，空白溶劑不干擾主成分峰及聚合物峰的檢測；對照品色譜圖中各色譜參數符合要求，本方法系統適用性良好。

2.2耐用性試驗

取本品，照擬定聚合物檢查法，于不同柱溫、不同流速、不同流動相比例、不同流動相緩沖液pH值條件下進行測定，以考察方法的耐用性，試驗條件及檢測結果見下列表格。

結論：由上述結果可知，本品在擬定的色譜條件下，柱溫、流速、流動相比例略有波動或不同型號的高效液相色譜儀檢驗本品，聚合物檢出情況及各色譜參數均無明顯差異，方法對上述條件耐用性良好。

2.3儀器精密度試驗

按擬定配制方法配制對照品溶液，精密量取20μl，連續測定6次，試驗結果如下

結論：本方法檢查本品中的聚合物，對照品溶液連續測定6次，峰面積RSD均小于5.0%，保留時間RSD均小于2.0%，儀器精密度符合要求。

2.4靈敏度試驗

取頭孢克肟對照品適量，配制靈敏度試驗溶液，以信噪比約為3：1計算檢測限，信噪比約為10：1計算定量限。

結論：本方法用于檢測頭孢克肟中聚合物含量時，靈敏度符合規定。

2.5線性試驗及范圍

取頭孢克肟對照品適量，精密稱定，加0.1mol/L磷酸鹽緩沖液適量溶解，并用水定量稀釋制成定量限濃度至相當于供試品溶液濃度5.0%系列的樣品溶液，作為線性考察溶液。分別精密量取各溶液20μl，照聚合物檢查方法檢查，記錄色譜圖，結果如下。

結論：本方法用于本品聚合物檢查，頭孢克肟濃度在0.02μg/ml～32.40μg/ml范圍內，與峰面積線性關系良好，線性方程為y=29153x-2740，r為0.9995。

2.6溶液穩定性試驗

按擬定方法配制供試品溶液及對照品溶液，均于室溫條件下放置，分別于各考察時間點精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，檢測結果如下。

結論：上述結果表明，本方法檢查本品中聚合物時，各聚合物峰面積會隨著時間推移而發生變化，擬定供試品溶液配制方法為臨用前新制；對照品溶液室溫放置12小時內穩定，對照品溶液可于該時限內重復使用。

2.7樣品聚合物檢查

采用聚合物檢查方法，對本品中試規模三批樣品進行聚合物檢查，結果見下表。

結論：本方法用于市售品頭孢克肟聚合物檢查，方法靈敏、簡單。

3聚合物方法學驗證結果總結

4討論

4.1在方法學研究中，使用了同一牌號的不同批號色譜柱進行試驗，發現不同批號色譜柱初始使用的分離度、理論板數均有很大差異，有的批號分離度甚至不能符合要求，但是將不符合要求的色譜柱放置一段時間后再用，色譜系統性能明顯提升，可滿足分析需求。

線性和范圍 頭孢克肟濃度在0.02μg/ml～32.40μg/ml范圍內，與峰面積線性關系良好，線性方程為y=29153x-2740，r為0.9995

4.2本方法使用的色譜柱，使用后需按說明書方法進行沖洗后保存，否則柱效易下降；保存宜在陰涼處。

4.3本方法僅針對頭孢克肟聚合物進行研究，亦可用于頭孢克肟制劑聚合物的研究。

參考文獻

[1]JP XVII Official Monographs P612 Cefcapene Pivoxil Hydrochloride Hydrate

[2]周麗君，陳亮等. 高效液相色譜法測定注射用頭孢地嗪鈉有關物質Ⅱ（聚合物）及其方法學研究. 安徽醫藥 2011 May；15（5）