無償獻血者HIV初篩檢測策略及確證結果對比

施克飛

江蘇省常州市中心血站溧陽分站，江蘇溧陽 213300

人類免疫缺陷病毒（HIV）是造成獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）的主要病原體，具有傳染性，已經受到全世界的關注[1]。我國目前的艾滋病疫情呈現總體低流行、地區高流行的狀態，多由高危人群擴散至低危人群，感染人群多樣化。HIV的主要傳播途徑是血液傳播，我國衛計委對血液制品潛在HIV風險也非常重視[2]。根據《獻血者健康檢查要求》和《血站質量管理規范》中的要求，溧陽分站對血液樣本開展了嚴格的ELISA檢測，對于復查結果仍為1種或2種檢測試劑均為有反應性，則將標本送常州CDC進行確診。該文對2012年1月—2015年12月的篩查結果進行回顧性分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取江蘇常州市中心血站溧陽分站32 811例標本作為該次研究對象。該研究所選病例經過倫理委員會批準，患者或家屬知情同意。

1.2 儀器和試劑

使用酶聯免疫吸附法對所有標本篩查，使用人類免疫缺陷病毒抗原抗體診斷試劑盒（上海科華、北京萬泰、英科新創），檢測HIV-1型、HIV-2型抗體以及HIV的p24抗原。酶免檢測所使用儀器為E-STAR全自動酶免儀。如果檢測結果有反應性，則按照《全國艾滋病檢測技術規范》的要求，用2種試劑進行復試，若檢測結果為1種或2種檢測試劑均為有反應性，則將標本送常州CDC進行確診。

1.3 統計方法

使用Pass Spring System穿越安全輸血標準化軟件、Liswell實驗室系統，建立Excel數據庫，使用統計學軟件SPSS 23.0統計學軟件進行分析處理。

2 結果

2012年1—12月送檢標本8 851例，抗-HIV陽性數7例、送檢CDC標本數3例、確診2例，確診率為66.67%；2013年1—12月送檢標本8 293例，抗-HIV陽性數8例、送檢CDC標本數6例、確診3例，確診率為50.00%；2014年1—12月送檢標本8 229例，抗-HIV陽性數5例、送檢CDC標本1例，確診率為20.00%；2015年1—12月送檢標本7 438例，抗-HIV陽性數4例、送檢CDC標本4例、確診1例，確診率為25.00%，見表1。

表1 溧陽分站2012年1月—2015年12月數據統計

3 討論

近年來我國AIDS患者和HIV感染者數量增加，有部分地區已經呈現HIV快速增長的趨勢。目前國內主要采用ELISA法篩查HIV病毒[3]。衛計委《獻血者健康檢查要求》中明確規定，不同級別采血機構都需要采購不同廠家生產的試劑檢測。使用ELISA篩查獻血標準，可以提高的血液安全，過去的ELISA技術法有缺陷，靈敏度比較低，加上受病毒的亞型、變異、靜默感染和窗口期長等因素，這些都會影響血液安全。HIV窗口期樣本的漏檢對血液安全有很大的影響[4-5]。現階段本血站使用的第4代ELISA試劑敏感性、特異性有顯著提高，篩查效果更好。當機體感染后HIV后的1～2周，血液中就會出現p24抗原，通過檢測HIV1/2抗體和p24抗原，能夠將檢測的窗口期從過去的45 d縮短至16 d。核酸檢測主要是針對病毒核酸，ELISA檢測的是病毒產生的抗體和抗原。ELISA檢測有很高的特異性，但是仍然受很多影響，①樣本問題，由于血液樣品溶血和患者自身抗體的交叉反應會干擾檢測結果；②操作問題，底物和洗液的配置；③試劑問題，不同的實際檢測能力也不同的[6]。核酸檢測結果比較準確，但是也無法做到完全可靠，核酸檢測窗口期、病毒含量低、病毒核酸變異等問題，都會出現假陽性。《血站技術操作規程》中對于血液檢測有明確的要求，在進行核酸檢測后，使用血清檢測和核酸兩種方法各檢測1次[7]。若使用ELISA法檢測陽性的標本不能再進行核酸檢測，可直接判斷該項目檢測不合格。該站在進行血液標本篩查時，策略是2次ELISA法1次核酸檢測。結合該次研究結果，2012年1—12月送檢標本8 851例，確診率為66.67%；2013年1—12月送檢標本8 293例，確診率為50.00%；2014年1—12月送檢標本8 229例，確診率為20.00%；2015年1—12月送檢標本7 438例，確診率為2.005%。可見本血站近三年，通過ELISA法篩查檢測合并核酸檢測，篩查的HIV陽性患者的準確率可靠，這與周玉芹[8]的研究中，2012年1—12月送檢標本，確診率為65.0%，2013年1—12月送檢標本確診率為51.0%；2014年1—12月送檢標本確診率為22.0%；2015年1—12月送檢標本確診率為26.3%的結果一致。

隨著近些年來臨床用血的需求量增加，血液的采集次數也不斷提高，也增加了安全供血中的風險控制難度，防范經過血液傳播疾病的任務也更加艱巨。我國近幾年來出現因窗口期經輸血感染的HIV的越來越多，部分高危患者借用獻血進行體檢的行也經常發生，這種行為不僅增加了血液風險，也增加了血液質量監管的難度，成為了受到社會關注的問題。該血站的工作人員在妥善處理血液后，告知獻血者可能出現的影響，同時聯系江蘇省血液中心核實獻血者的情況[9]。

ELISA是血站常用的篩查方法，對于檢測HBV、HCV、HIV1+2等有很好的特異性[10]。國外推薦檢測的方式是先使用1種ELISA試劑先進行血液篩查，出現反應性標本在使用相同的試劑或者是更多的試劑復查，如果復查為陽性，保證實驗準確性。近些年來有學者建議，如果初次檢驗S/CO值非常高，不要重復檢驗，可直接開展確證檢測[11]。ELISA多次檢測為陽性的樣本，可使用免疫熒光法和蛋白免疫印跡法進一步確診，仍是診斷HIV-1感染的重要參考標準。不過不同采供血單位為了保證血液安全，盡可能降低輸血傳播疾病的風險，在初篩血液樣本時，都會采用雙試劑檢測，從而提高檢出率，降低風險，但是試劑耗費量較大[12]。該站使用的試劑盒為上海科華、北京萬泰、英科新創，篩查呈反應性的樣本再次使用原試劑和另外1種不同廠家的試劑再次檢查，這樣不僅可以節約人力、物力，還可以避免不必要的資源浪費。

綜上所述，ELISA法可進行無償獻血HIV的初檢，對于HIV抗體不確定的標本可結合核酸結果進行結果匯總。盡可能減少HIV窗口期感染樣本的影響。血站工作人員應做好獻血者前健康咨詢，盡可能將HIV感染者隔離在獻血前，規范統一各地區血站初篩結果和規則，提高血液安全性。