參蛤益肺膠囊調節COPD大鼠穩定期IgGIgM的實驗研究

廖冬梅 鐘紅衛 古遠云

摘要：目的 探討參蛤益肺膠囊調節COPD大鼠穩定期IgG、IgM的實驗研究。方法 將50只SD大鼠隨機分組，空白組10只、余下40只造模。造模成功后，隨機分為模型組、參蛤益肺膠囊常規劑量組（常規劑量組）、參蛤益肺膠囊高劑量組（高劑量組）、茶堿組各10只，給藥后分別于第12周、18周采集大鼠血清并行ELISA測定。結果 實驗12、18周結束后，模型組血清中IgG、IgM的表達水平較空白組降低（P<0.05），其余組IgG、IgM的表達水平均有所上升（P<0.05），而高劑量組IgG、IgM的表達水平上升最為顯著。結論 參蛤益肺膠囊可提升COPD穩定期大鼠血清中IgG、IgM的表達水平，而參蛤益肺膠囊高劑量組療效越佳，從而提高機體免疫，延緩COPD病程的進展。

關鍵詞：參蛤益肺膠囊;COPD;大鼠;IgG;IgM

中圖分類號：R285 ? 文獻標志碼：A ? 文章編號：1007-2349（2019）07-0065-02

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary diseases，COPD）為一種可防治的疾病，主要表現為持續性呼吸道癥狀及氣流受限[1]。全球發病率高，約為4%-10%。WHO預計到2030年，COPD將成為繼全球缺血性心臟病及猝死之后的的第三大死亡原因[2]。至今，針對COPD的發病機制研究較多，而免疫機制備受關注。其中，IgG、IgM為主要研究對象。本實驗旨在觀察參蛤益肺膠囊對穩定期COPD大鼠血清中IgG、IgM表達水平的影響，進一步討論免疫機制。

1 材料

1.1 實驗動物 清潔級SD大鼠50只，雌雄各25只，雌鼠體重為（230±10）g，雄鼠體重為（290±10）g。

1.2 實驗藥物及試劑 西南醫科大學附屬中醫醫院生產的參蛤益肺膠囊（0.33 g/粒），廣州邁特興華制藥廠生產的茶堿緩釋片（0.1 g/片），IgG、IgM ELISA試劑盒。

2 方法

2.1 造模及分組 從50只清潔級SD大鼠中，分別挑選出5只雌鼠和雄鼠作為空白組，造模組為剩下的40只大鼠。根據實驗研究經驗，COPD穩定期大鼠模型的建立采用煙熏聯合肺炎克雷伯氏桿菌感染的方法。造模成功后以雌雄各半為原則分為4組：模型組8只、常規劑量組10只、高劑量組10只、茶堿組10只。

2.2 觀察造模組大鼠

2.2.1 大鼠的一般情況 各造模組精神萎靡，皮毛枯燥，張口喘息，頻繁咳嗽，行動遲鈍，進食少，大便干，小便調。

2.2.2 大鼠肺與氣道組織的病理學改變 造模組各級支氣管纖毛變性、稍紊亂，部分脫落，鱗狀上皮化生，杯狀細胞數目明顯增多，腺體肥大，支氣管管壁明顯增厚，可見中性粒、淋巴細胞等炎性細胞浸潤，肺泡壁變薄，肺泡腔明顯擴大，大部分肺泡破裂后形成肺大泡，血管水腫、滲出、管壁明顯增厚。

2.3 給藥 第7周的第1 d開始給藥，空白組、模型組以同等容積的蒸餾水灌胃，各治療組則以相應的藥物灌胃.常規劑量組：0.42 g/kg/d，高劑量組：0.62 g/kg/d，茶堿組：0.02 g/kg/d。

2.4 采集血清 分別在第12、18周結束后的第1 d取材，取材前所有大鼠禁食12 h（除水），麻醉后采集腹主動脈血，將其靜置于4℃冰箱4 h，取出后以3000 r/min的轉速離心10 min，將其血清于-80℃冰箱內保存待測。

3 統計學方法

統計描述采用軟件SPSS17.0，其中用均數及標準差表示定量資料，選用獨立樣本t檢驗來行組間比較（2組）;或者單因素方差分析（3組及以上）。

4 結果

4.1 12周、18周各組大鼠血清中IgG、IgM的比較 見表1。

由表1可知，12周IgG、IgM分別為：F=286.335，P=0.001，F=282.791，P=0.001，差異均具有統計學意義。因此，結果示模型組vs 常規劑量組、模型組vs 高劑量組、模型組vs 茶堿組、高劑量組vs 常規劑量組、高劑量組vs 茶堿組均有統計學意義（P<0.05）;常規劑量組vs 茶堿組無統計學意義（P>0.05）。18周IgG、IgM分別為：F=931.454，P=0.001，F=350.691，P=0.001，差異均具有統計學意義。因此，結果示模型組vs 常規劑量組、模型組vs 高劑量組、模型組vs 茶堿組、高劑量組vs 常規劑量組、高劑量組vs 茶堿組均有統計學意義（P<0.05）;常規劑量組vs 茶堿組無統計學意義（P>0.05）。

5 討論

既往研究顯示，在多次急性加重后，COPD患者的肺功能逐漸降低。因此加強穩定期治療，是控制COPD病情進行性發展的關鍵[3]。多數研究表明免疫與COPD的發生、發展及轉歸密切相關[4]。免疫力低下時，免疫功能頻繁發生紊亂，易反復感染，炎癥不斷刺激氣道壁增厚、管壁破裂，肺泡腔擴大，形成氣道重塑、肺大泡等，加速COPD病程的進展[5]。因而，COPD穩定期的免疫治療顯得格外重要。潘玲等[6]認為所有COPD患者存在免疫功能下降及紊亂，主要表現為血清中IgG明顯下降。盧麗君等[7]認為COPD患者存在免疫低下、免疫功能失調，在增強免疫的中醫中藥治療后，免疫指標IgG和IgM明顯改善，免疫功能明顯提高，表明免疫功能與COPD密切相關。

COPD屬中醫“肺脹”范疇，《靈樞·脹論》曰：“肺脹者，虛滿而喘咳。”[8]《靈樞·經脈》：“肺手太陰之脈……是動則病肺脹滿膨膨而咳喘。”[9]臨床上主要表現為咳嗽、咯痰、喘氣、水腫、發紺、心悸等癥狀，其病位主要在肺脾腎，性屬本虛標實，穩定期病機為肺脾腎虛、痰瘀互結，以虛為主。參蛤益肺膠囊由紅參、蛤蚧、三七、川芎等藥物組成，共奏補肺益腎，化瘀祛痰，納氣平喘，標本兼治之功。國內外報道中，對上述藥物的現代藥理研究較多。黃寶亮等[10]實驗研究表明紅參非皂苷類物質-精氨酸雙糖苷能對抗小鼠疲勞，同時影響其免疫功能。楊帆等[11]運用蛤肽作用于小鼠，實驗研究表明蛤蚧肽能提升小鼠的免疫力，以NK細胞的增加為主。譚亮等[12]認為三七皂苷R1對心腦系統、神經系統、肝臟、肺動脈高壓、腸道等均有保護作用，同時可抗腫瘤及提升免疫力。周時[13]認為川芎嗪對心、腦、肺、腎等血管均有擴張作用，可緩解肺動脈高壓;同時川芎嗪能提高免疫力，通過促進淋巴細胞的表達等。可見，以上藥物均有提高免疫力作用。

本實驗COPD穩定期大鼠模型的建立采用煙熏聯合肺炎克雷伯氏桿菌感染的方法，更符合COPD穩定期病機。從實驗結果上看，實驗12、18周結束后，模型組血清中IgG、IgM的表達水平較空白組降低（P<0.05），其余組IgG、IgM的表達水平均有所上升（P<0.05）。說明參蛤益肺膠囊可提升COPD穩定期大鼠血清中IgG、IgM的表達水平，從而提高機體免疫，延緩COPD病程的進展。

參考文獻：

[1]陳亞紅，2019 gOLD慢性阻塞性肺疾病診斷、治療及預防全球策略解讀[J].中國醫學前沿雜志，2019，11（1）.

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[7]盧麗君，杜曉紅，黃炎芳.溫補肺腎法對慢性阻塞性肺疾病穩定期患者肺功能及免疫功能的影響[J].實用臨床醫藥雜志，2017，21（11）：38-41.

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[10]黃寶亮，劉博宇，王佳奇，等.紅參非皂苷類物質精氨酸雙糖苷對小鼠疲勞及免疫功能的影響[J].中國藥學雜志，2016，（15）：27-29.

[11]楊帆，席偉，謝裕安，等.蛤蚧肽對小鼠免疫功能的調節作用[J].廣西醫科大學學報，2011，28（3）：342-344.

[12]譚亮，湯秋凱，王守章，等.三七皂苷R1藥理作用的研究進展[J].中國藥理學通報，2018，34（5）：604-607.

[13]周時.中藥川芎中有效成分的藥理作用研究[J].內蒙古中醫藥，2015，（5）：157-157，170.

（收稿日期：2019-04-11）