孫夢珂 丘富安
一起豬藍耳病的診治及防控措施
孫夢珂①丘富安②
(①福建農林大學福建省獸醫中藥與動物保健重點實驗室 福建 福州 350002 ②福州中科基因技術有限公司 福建 福州)
為了確診一起疑似藍耳病病例,本研究采用Elisa法和熒光定量PCR法進行血清學和分子生物學診斷,結果顯示:流產母豬的S/P平均值顯著超過正常母豬的S/P平均值,且熒光定量PCR結果顯示藍耳病病毒核酸為陽性,綜合結果判斷該病例為豬繁殖與呼吸綜合征。
豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)俗稱“藍耳病”,是一種由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)感染引起,以母豬流產、死胎、木乃伊胎、返情或者不發情等繁殖障礙以及小豬呼吸綜問題為臨床癥狀的傳染病。隨著1987年美國首先報道后[1],荷蘭、加拿大、德國、也先后報道了該病。在1996年,中國首次分離到PRRS病毒,從而證實了本病在我國的存在。PRRSV 是單股RNA病毒,這一性質決定了其具有較強的變異性,且病毒之間很容易發生基因重組[2]。目前我國分離到主要來源于歐洲株和北美洲株,兩者在RNA序列上有百分之五十至七十的同源性。藍耳病毒存在水平傳播和垂直傳播兩種形式,其可通過口鼻分泌物、糞尿中排毒,即使是康復豬也能在臨床癥狀恢復中的2~3個月持續排毒,此外,飼養人員成為病毒傳播的重要途徑。種豬如母豬可通過胚胎,公豬可通過精液進行垂直傳播。除了種豬,仔豬、育肥豬和成年豬均可發病,研究報道,仔豬可達100%的發病率、50%以上的死亡率,母豬可達30%以上的流產率。藍耳病毒在細胞的凋亡后進入血液與淋巴循環,導致毒血癥。由于巨噬細胞被破壞不能有效的識別抗原導致機體免疫抑制,易感染細菌性疾病。目前,診斷藍耳病的常用的方法有臨床診斷、Elisa法、分子生物學方法以及病毒分離。
福建省某自繁自養場,生產母豬400頭左右,在2018年11月份若干母豬出現不食,測體溫發現病豬體溫升高至41℃以上,耳朵發紺,眼結膜發紅充血、眼瞼出現水腫,之后幾天陸續出現出現母豬流產和產死胎,咳嗽、氣喘等呼吸道癥狀。根據臨床癥狀豬場懷疑豬繁殖與呼吸綜合征。該場未免疫藍耳疫苗。
2.1 Elisa法檢測藍耳病抗體 采用愛德士豬藍耳病抗體試劑盒檢測發病豬血清,具體步驟按愛德士說明書操作。
2.2 藍耳病毒熒光定量PCR檢測 使用洛陽愛森病毒DNA/RNA提取試劑盒按照使用說明書提取組織中的藍耳病毒RNA,然后使用廣州達安基因藍耳病毒核酸檢測試劑盒檢測藍耳病毒核酸,具體步驟按試劑盒使用說明書操作。
3.1 Elisa法檢測藍耳病抗體 從S/P值的分布結果(表1)表明,流產母豬的S/P值分布主要集中在S/P≥3區間。從圖1可知,流產母豬的陽性率為90%,正常母豬的陽性率為50%,說明流產母豬的感染率比正常母豬的多。流產母豬的藍耳流產母豬的S/P的平均值為2.76,超過2.5(IDEXX藍耳抗體野毒感染經驗閾值)。且流產母豬S/P平均值顯著大于正常母豬豬群的S/P平均值,因為豬群未免疫藍耳病疫苗,可能流產母豬豬群存在藍耳病毒血癥,綜上所述,猜測流產與藍耳病存在相關性。

表1 母豬的S/P值分布 (頭)

圖1 母豬的藍耳抗體檢測結果
3.2 藍耳病毒熒光定量PCR檢測 藍耳病毒熒光定量PCR結果顯示,流產小豬的組織和流產母豬的血清均檢測出藍耳病毒核酸,結合臨床癥狀以及Elisa結果,推測這例母豬流產的病例為藍耳病導致的。

表2 熒光定量PCR檢測結果

圖2 藍耳病毒熒光定量PCR檢測結果
關于藍耳病的防控,許多豬場還處于一個被動階段,發病后才趕緊進行治療和防控。藍耳病需主動防控,如做好疫苗免疫、疫病凈化和生物安全等,尋求有效的適合本場的防控措施,能降低藍耳病發生所帶來的損失。(1)堅持自繁自養的原則,若必須引種,從無本病地區引入豬群,在引進種豬前,要進行全面的血清學檢查,檢測合格方可進入隔離區馴化,3~4周后,需要再次進行血清學檢查,若檢查結果仍合格,則可將其混入豬群。進群后也要堅持定期對豬群中藍耳病毒的感染狀況進行監測,以了解該病在豬場的活動狀況。(2)日常管理至關重要,養殖者要保持舍內通風、保溫、消毒等各方面,特別是消毒,制定良好的消毒計劃,并對消毒效果進行評估,確保消毒到位。對于發病豬舍要嚴密封鎖,對發病豬舍周圍要采取一定的措施,避免疾病擴散,對流產的胎衣、死胎及死豬都做好無害處理,隔離病豬。
目前,在藍耳病暴發后是否免疫PRRS弱毒疫苗仍存在著爭議,有關研究仍然需要進一步加強,使用疫苗須根據場內情況制定方案。藍耳疫苗在接種3~4星期之后才產生保護性抗體,這期間就是藍耳病免疫抗體的空白期,倘若有野毒的活動在群體里,容易導致免疫的失敗,因此這期間進行精心地飼養管理是必要的。此外,感染豬的非特異免疫力低下,要想對豬進行更為有效的防治,可使用中藥微生態制劑進行預防保健,提高機體的非特異性免疫力,降低疾病的發生幾率。
[1] 劉光清, 蔡雪暉, 仇華吉等. 豬繁殖與呼吸綜合征的研究進展[J]. 中國預防獸醫學報, 2001, 23(1): 72-76.
[2] 仇華吉, 童光志, 周彥君等. 豬生殖-呼吸道綜合征病毒(PRRSV)CH-la株糖蛋白基因的遺傳變異分[J]. 病毒學報, 2000, 16(4): 357-360.
[3] 張青嫻, 王克領, 張立憲等. 高致病性藍耳病的研究進展[J]. 中國畜牧獸醫, 2008, 35(9): 105-107.
[4] 豬藍耳病活疫苗免疫效果試驗觀察[J]. 豬業科學, 2011, 28(4): 96-101.
(2019–05–08)
S858.28
B
1007-1733(2019)08-0037-02