張宏蓮 孫輯凱 李宏鈴 劉玉露
摘要:目的:通過建立仿野生環境進行齊齊哈爾地區赤芍及蒼術藥材的人工生產以指導實踐,對栽培赤芍的質量考察,以評價栽培品的質量。方法:通過野外采挖兩種藥材的根,在室外仿野生條件下進行栽培,采用高效液相法定量測定。結果:赤芍栽培品植株性狀與野生品一致,所含芍藥苷5%;蒼術栽培品植株性狀與野生品一致,所含蒼術素為0.68%。隨栽培年限的增長,含量呈遞增趨勢。結論:在仿野生條件下獲得的赤芍及蒼術栽培品所含指標成分含量均高于法定標準仿,本實驗結果可說明在齊齊哈爾地區仿野生栽培赤芍及蒼術具有可行性。
關鍵詞:齊齊哈爾地區 赤芍及蒼術藥材 栽培赤芍及蒼術
引言:赤芍是一種多年生草本植物,分布于俄羅斯、中國等地作為傳統常用中藥之一。2015年版《中國藥典》規定赤芍來源于毛莨科植物芍藥(Paeonla lactifloraPall)或川赤芍(Paeonla veitchii Lynch)的干燥根,以內蒙古多倫縣出產“多倫赤芍”為道地藥材,目前,野生芍藥的野生資源在逐漸減少。
蒼術是一種應用十分廣泛的傳統中藥,北蒼術(Atractylodeschinensis(Dc)Koidz)是其來源之一,主要產自內蒙古自治區東北部、山西省以及東北三省,隨著市場需求的增多,野生蒼術資源逐漸匱乏。仿野生種植是解決市場窘境的有效途徑,但是,仿野生品的質量有待于借助實驗手段予以評價。
黑龍江省齊齊哈爾市毗鄰內蒙古,氣候及環境與內蒙古相近,具備赤芍人工種植及栽培的仿野生環境。本研究在仿野生環境條件下,對赤芍及蒼術進行人工生產,研究適用于齊齊哈爾區域的仿野生栽培技術,并通過必要的成分分析進行質量評價,以期農業生產、增產、可持續發展提供技術支撐。
一、仿野生試驗室(田)概括
室外仿野生環境為齊齊哈爾醫學院藥用植物園,土壤為沙壤土。
二、材料與方法
(一)實驗材料
儀器:Waters E2695高效液相色譜儀、MDF-492超低溫冰箱、高速多功能粉碎機、PALL水純化系統、ML203T/02十萬級電子天平。
試劑和藥材:,甲醇(色譜級)、磷酸二氫鉀、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸,均為分析純。
實驗樣品:栽培品經鑒定為赤芍及蒼術;分別標記為CS、CZ。
對照品:芍藥苷及蒼術素(中國食品藥品檢定研究院)。
(二)栽培品的移栽及采收
赤芍:于4-5月間,畦面順向開淺溝,溝深5-7cm,將室內出芽的野生赤芍根芽移栽至室外仿野生試驗田中,按株距30cm栽種,芽朝上,用少量土固定芽頭,再用腐熟餅肥或有機肥料施入溝內,覆土后稍壓即可。于移栽后第三年的秋季采收栽培品,晾干后保存在-80°C條件下。
蒼術:于秋季9月移栽至林蔭地,剔除殘次的幼苗,畦中間高兩邊低,一端預留出移栽槽,寬約15-20cm,深度根據種苗根長,頂芽向上擺在移栽槽中,株距約15-20cm,覆土約5cm,行距保持35-40cm。
(三)色譜條件
赤芍栽培品的檢測條件:AgilentZORBAX Eclipse xDB-c18色譜柱(250×9.4mm,5um);以甲醇-0 05mol-L-1磷酸二氫鉀溶液(50:50)為流動相,流速1.0mL·min-1,檢測波長230nm,進樣量:10ul。待檢樣品的制備:以甲醇為溶劑,制成0.50 mg-ml-1的芍藥苷對照液,備用:分別精密稱取赤芍栽培品粉末約0.5g,兩份,精密加甲醇25ml,浸泡4h后超聲音處理,放冷,補齊失重,搖勻,經0.45pm微孔濾膜,取續濾液備用。
蒼術栽培品的檢測條件:Diamonsilc18色譜柱(4.6mm×250mm,5u1);流動相甲醇:水=(79:21)等度洗脫:流量1.0ml/mln;檢測波長340nm;進樣量20um。待檢樣品的制備:以甲醇為溶劑,制得20mg-ml-1的蒼術素對照液;取蒼術栽培品,用粉碎機粉碎,過三號篩,精密稱取0.2g,置具塞錐形瓶中,精密量取甲醇50ml加入錐形瓶,用封口膜密封后,稱定重量,超聲處理(功率250w,頻率40KHz)lh,取出錐形瓶冷卻至室溫后,稱定重量,用甲醇補足缺失的重量,搖勻后,經0.45um過濾膜后,取續濾液備用。
(四)數據處理
選用SPSS 20.0處理實驗數據,實驗結果均以X±SD表示。
三、實驗結果
(一)室外栽培品的性狀
三年生的赤芍栽培品植株高度約70cm,葉互生,葉片近革質,有柄,長約6cm,小葉為長圓形、橢圓形,先端漸尖基部楔形,綠色,無毛;花,頂生,大形,花梗長,無毛,生葉狀苞片,萼片3-5,倒卵形,綠色;花瓣粉紅色,倒卵形,雄蕊多數,花藥黃色,根紡錘狀或圓柱狀肥大,紅褐色,折斷面粉白色。
蒼術栽培品莖直立,單生或少數莖成簇生,基部葉花期脫落:中下部莖葉幾無柄,倒卵形,中部以上或僅上部莖葉不分裂,倒長卵形,全部葉硬紙質,兩面綠色,無毛,邊緣或裂片邊緣有針刺狀緣毛或者重刺齒。頭狀花序單生莖枝頂端,總苞鐘狀,苞葉針剌狀羽狀全裂或深裂。小花白色,瘦果,被稠密的順向貼伏的白色長直毛,冠毛剛毛褐色或污白色。
(二)指標成分的含量測定
經過HPLC測定,基線平穩,三年生赤芍栽培品含有芍藥苷為6.5%,符合法定藥品要求。
經過HPLC測定,基線平穩,三年生蒼術栽培品含有蒼術素為0.68%,符合法定藥品要求。
結論:本研究在室外的仿野生環境條件下,栽培赤芍、蒼術,通過測定栽培品中的指標成分,符合法定標準,表明齊齊哈爾地區栽培赤芍、蒼術具有一定的可行性,期待擴大規模,進一步規范仿野生栽培技術,以指導本區域農民種植,實現保質增產和創收。