HS-SPME-GC-MS分析荊芥及其炮制品的揮發性成分△

龔敏，盧金清，韓怡

湖北中醫藥大學/湖北省藥用植物研發中心，湖北 武漢 430065

荊芥為全草類中藥，別名香荊薺、假蘇等，且最早以“假蘇”載于《神農本草經》[1]，被列為中品。荊芥性微溫，味辛，歸肺、肝經，有解表散風、透疹消瘡之功效[2]。臨床常用于感冒、頭痛、麻疹、風疹、瘡瘍等。荊芥除藥廠用作原料外，近年來還廣泛應用于飼料、香料等加工行業，荊芥揮發油出口各國的數量逐漸增加，社會需求量不斷增大[3]。自宋代以來記載荊芥的炮制方法已達十余種，現代臨床上荊芥多以其生品、炒制品和炭品入藥。臨床研究表明，荊芥炒制后具有祛風理血的作用，可用于婦人產后血暈。然而荊芥炒制品未被2015年版《中華人民共和國藥典》收載，因此有必要研究荊芥及其炮制品的物質基礎。國內外并無文獻報道荊芥及其炮制品炒荊芥的揮發性成分物質基礎，所以本實驗首次采用HS-SPME-GC-MS對荊芥及其炮制品炒荊芥的揮發性成分進行提取和分析比較，探尋炒制對荊芥揮發性成分的組成和含量的影響，為荊芥的臨床應用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

手動固相微萃取裝置(德國IKA公司)；65 μm PDMS/DVB萃取纖維頭(Supelco公司)；頂空瓶(15 mL)；Agilent 6890-5973型GC-MS聯用儀(Hewlett-Packard公司)；電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司，JY1002，d=0.01 g)。

1.2 藥材

荊芥藥材購于湖北強康中藥飲片有限公司(批號：170801)，經湖北中醫藥大學生藥教研室楊紅兵教授鑒定為唇形科植物荊芥SchizonepetatenuifoliaBriq.的干燥地上部分。

2 方法

2.1 炒荊芥的制備

參照2015版《中華人民共和國藥典》四部0213炮制通則中的炮制方法：取荊芥生品適量，置炒制容器內，用文火加熱，并不斷翻動，使藥物表面呈微黃色或顏色加深，取出，放涼，陰干打粉，即得。

2.2 頂空固相微萃取條件

綜合考察確定頂空固相微萃取的最佳條件為：荊芥打粗粉，取0.6 g，置頂空瓶中，插入萃取纖維頭(65 μm PDMS/DVB)，在150 ℃下平衡10 min后，再壓縮手柄伸出萃取頭萃取15 min，取出，立即插入氣相色譜儀進樣口(溫度230 ℃)解析3 min，不分流進樣。炒荊芥的制備見2.1。

2.3 氣相色譜-質譜條件

色譜柱：HP-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；載氣：高純度He；流速：0.8 mL·min-1；進樣口溫度：230 ℃；程序升溫：50 ℃以20 ℃·min-1升溫至100 ℃，再以8 ℃·min-1升溫至210 ℃。

質譜條件：離子源EI源；離子源溫度230 ℃，電離電壓70 eV；四級桿溫度150 ℃；掃描質量范圍m/z35～550。

3 結果

通過氣質聯用儀分析，數據庫檢索確定各個組分。從荊芥生品中分離出30種成分，并鑒定出27種成分，占揮發性成分總量的96.35%；從炒荊芥中分離出32種成分，并鑒定出26種成分，占揮發性成分總量的89.22%。具體結果見圖1～2及表1。

圖1 HS-SPME-GC-MS分析荊芥生品揮發性成分總離子流圖

圖2 HS-SPME-GC-MS分析炒荊芥揮發性成分總離子流圖

4 討論

荊芥炒制后，結果表明，其揮發性成分的組成、含量較生品均發生了改變。荊芥生品中揮發性成分含量最高的為薄荷酮，占揮發性成分的48.57%，其次為噠嗪(5.46%)、檸檬烯(4.16%)、大根香葉烯(1.69%)等。炒荊芥中揮發性成分含量最高的為胡薄荷酮，占揮發性成分的36.24%，其次主要為異薄荷酮(26.57%)、噠嗪(6.92%)、薄荷醇(4.28%)、大根香葉烯(2.33%)等。與荊芥生品相比，炒荊芥中新增了14種成分，醇酯類成分組成個數增多，減少了15種成分，烯酮類成分組成個數減少。荊芥炮制前后的共有揮發性成分有12種，主要表現為酯類含量明顯減少，醇類含量基本不變，烯類含量保持不變或明顯增多。

表1 荊芥及其炮制品揮發性成分

續表1

注：—代表不出現該成分。

荊芥中所含的揮發性成分較為豐富，其中部分特有成分具有廣泛的藥理活性。如薄荷酮有抗病毒、抗炎、抑菌、利膽、促滲作用[4-6]，還有局部麻醉作用和止痛作用[7]；檸檬烯具有抑菌、抑制興奮、抗腫瘤、祛痰、止咳、平喘和溶解膽結石等功效[8-9]；月桂烯具有抗腫瘤、抗氧化、鎮痛和祛痰止咳作用[10-13]；薄荷烯酮具有麻醉、抗炎和鎮痛作用[14]；水楊酸甲酯具有驅蟲作用[15]，且可促進局部的血液循環，起消腫、消炎、止癢和鎮痛作用[16]。然而炒荊芥中并未檢測到這些活性成分。故從揮發性成分的角度考慮，荊芥生品優于炒荊芥，這也符合荊芥在臨床上多以生品入藥的用藥習慣。活性物質的改變必然引起臨床療效和應用的變化，荊芥生品重在解表散風，炒制品重在祛風理血。本研究對荊芥生品及其炒制品的揮發性成分進行分析比較，為臨床合理用藥提供了一定參考。