唐云姣 霍秀龍 劉宏梅 黃百花
(1.百色市動物疫病預防控制中心,廣西百色 533000;2.平果縣動物疫病預防控制中心,廣西平果 531400)
口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒引起的高度接觸性、急性、熱性傳染病,常發生在牛、羊、豬等偶蹄類動物[1]。主要傳播途徑為接觸傳染。臨床癥狀為:蹄部、口腔黏膜、乳房皮膚發生水皰和潰爛,嚴重時口腔有條狀黏液流出[2]。我國的口蹄疫僅見O、A、亞洲I型血清型,其中O型感染最為廣泛。百色市地處廣西的西北部,北與貴州省接壤,西與云南省毗鄰,南與越南交界,是滇、黔出海大通道,日常途經運往沿海發達地區的畜禽比較多,加上走私畜禽及其產品違法行為時有發生,動物疫病發生風險大,防控工作異常嚴峻。近年來,為貫徹落實《國家中長期動物疫病防治規劃(2012-2020年)》生豬O型口蹄疫防治目標,百色市建立健全市、縣、鄉、村四級動物防疫隊伍建設,完善強制免疫、監測預警、應急處置、區域化管理等工作機制,對內狠抓生豬O型口蹄疫免疫密度和免疫質量,對外嚴堵境外疫情轉入,有效地防止生豬O型口蹄疫疫情發生流行,確保生豬生產安全、產品質量安全和公共衛生安全。
1.1.1 疫苗。政府采購調撥豬口蹄疫O型滅活疫苗,毒株為 O/MYA98/BY/2010株,由中牧實業股份有限公司、中農威特生物科技股份有限公司等生產提供。
1.1.2 樣品來源。2016-2018年百色市隨機采集種畜場、規模養殖場、農村散養戶、屠宰場、交易市場生豬血清樣品16849份。病原監測用組織樣品采自本市規模豬場、農村散養戶、屠宰場和生豬交易市場共2666份。
1.1.3 檢測試劑。口蹄疫病毒O型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒及口蹄疫O型病毒抗原,中國農業科學院蘭州獸醫研究所生產;2016年使用北京世紀元亨動物防疫技術有限公司生產的RTPCR試劑盒,2017-2018年使用澳東生物科技有限公司的熒光RTPCR試劑盒。
(1)免疫抗體使用液相阻斷ELISA檢測方法進行檢測,檢測方法按試劑盒說明書進行,結果抗體效價大于或等于1:64判為口蹄疫陽性,即免疫抗體合格;小于1:64判為陰性,即免疫抗體不合格。病原核酸檢測操作方法按試劑盒說明書進行,2016年使用北京世紀元亨動物防疫技術有限公司生產,檢測方法按《口蹄疫診斷技術》GB/T 18935-2003,采用RT-PCR方法,結果:在陽性對照出現131bp,陰性對照無此擴增帶時試驗結果成立;被檢樣品出現131bp擴增片段時,判定為口蹄疫病毒陽性,否則判為陰性。2017年~2018年使用澳東生物科技有限公司的熒光RT-PCR試劑盒,檢測方法為《口蹄疫病毒實時熒光RT-PCR檢測方法》GB/T 27528-2011,結果:Ct值≤30且出現典型的S形擴增曲線的樣本為陽性;Ct值>35或無明顯的擴增曲線,為陰性;30<Ct值<35有明顯的擴增曲線為可疑。
(2)根據實驗室免疫抗體檢測結果,統計、分析抗體陽性率,利用excel 2007 單因素方差分析法對各數據進行差異性分析,當P<0.05時為差異顯著。
2016~2018年生豬O型口蹄疫抗體平均合格率均達到80%以上,達到農業部規定的70%以上要求;從樣品來源可以看出,種畜場生豬O型口蹄疫抗體平均合格率為90.4%顯著高于其他監測場點,交易市場免疫抗體平均合格率48.7%為最低,規模場、散養戶、屠宰場的抗體平均合格率分別為81.5%、85.7%、85.1%,相差不大。規模場抗體合格率連續3年均低于散養戶。如表1所示。
從年度統計來看,生豬O型口蹄疫監測群體抗體合格率均為80%以上;從樣品來源可以看出,種畜場生豬O型口蹄疫監測群體抗體合格率為100%顯著高于其他場或戶,交易市場群體免疫抗體合格率33.3%為最低。如表2所示。

表1 2016~2018年豬O型口蹄疫免疫抗體監測結果

表2 2016~2018年豬O型口蹄疫抗體監測群體合格率統計結果

表3 2016-2018年豬O型口蹄疫病原學檢測結果表
2016~2018年共采自于規模豬場、農村散養戶、屠宰場、交易市場生豬組織樣品2666份,病原核酸檢測結果全部呈陰性。如表3所示。
(1)建立健全基層動物防疫隊伍,是提升生豬口蹄疫強制免疫能力的基礎。百色市12個縣(市、區)均建立有動物疫病預防控制機構,在職在編人員有157人,135個鄉鎮均建立水產畜牧獸醫站,在職在編人員有445人,1849個行政村均配備村級動物防疫員1539人,構建了基層動物疫病強制免疫工作機構網絡,保障免疫工作順利開展。近幾年推行切合實際的科學免疫程序,選擇具有匹配性強的 O/MYA98/BY/2010疫苗毒株進行免疫,加強對農村散養戶豬O型口蹄疫的免疫力度,推行二次強化免疫,提高了生豬的抗體水平。2016~2018年全市開展生豬O型口蹄疫免疫分別為 319.46萬頭、339.12萬頭、323.58萬頭,免疫率分別為99.89%、98.54%、99.68%,生豬群體免疫維持在高密度狀態,建立了堅強的免疫屏障。
(2)完善獸醫實驗室體系建設,是提升生豬口蹄疫監測預警能力的前提條件。百色市級和轄12個縣(市、區)均建設有獸醫實驗室并全部通過自治區考核評審,百色市動物疫病預防控制中心獸醫實驗室還通過計量認證評審,所有實驗室均建立了完善的質量管理體系文件,實驗室管理工作規范。2016~2018年全市共開展生豬O型口蹄疫免疫抗體檢測16849份,免疫抗體合格率分別為83.6%、81.1%、89.3%,合格率均高于規定要求,其中種畜場生豬的免疫抗體合格率高于其他監測場點,主要原因是種畜場的免疫程序更加科學、合理,能夠開展二次及以上免疫。交易市場生豬免疫抗體合格率48.7%為最低,主要原因是百色市生豬交易市場主要販賣40-60d左右的仔豬,首免日齡大概在35d左右;項朝榮、王儒磊等人的實驗顯示,仔豬首免后抗體下降明顯,提示首次免疫時疫苗免疫效果受母源抗體干擾較大[3];韋顯凱、鄭敏等人的實驗也顯示,仔豬首免后1個月采血檢測,抗體合格率只有40~50%,產生的抗體滴度較低[4];黃寶學、蒙振畝、班雪花等人的實驗也顯示,仔豬二次免疫后10d的抗體合格率為90%以上,為了使豬群獲得較好的免疫抗體水平,應大力實施對豬群進行 2 次以上的免疫[5];因此,交易后的仔豬應及時進行二次免疫,縮短免疫空白期。同時對采自規模豬場、農村散養戶、屠宰場和生豬交易市場組織樣品共2666份進行病原核酸檢測全部呈陰性,表明百色市不存在免疫帶毒現象。從表1來看,交易市場生豬O型口蹄疫免疫抗體平均合格率為48.7%,低于規定要求,但從未檢測出病毒核酸陽性也沒發生過疫情,這也表明百色市生豬O型口蹄疫感染流行風險比較低。
(3)狠抓基層動物防疫物資規范化管理,完善冷鏈體系建設,為保證生豬口蹄疫疫苗質量提供保障。百色市建設有足夠容量的疫苗保存冷庫,并配有專用冷藏運輸車,12個縣(市、區)都配備了動物疫苗運輸溫度監控儀,6個縣(區)分別建設和配置了動物疫苗貯存冷庫和溫度遠程監控警報系統,其他6個縣(市)也配備了足量的冰柜用于貯存動物疫苗;135個鄉鎮全部配備了總容量不少于550升的冰箱和冰柜;1539個村級動物防疫員全部配備了動物疫苗保溫箱,有70%配備了疫苗儲存冰箱。建立了一條包括市、縣、鄉、村四級的動物疫苗冷鏈系統,實現了疫苗運輸貯存溫度的全程監控,確保了疫苗質量。
(4)建立動物防疫合作社,是推進生豬口蹄疫防治社會化服務能力的重要抓手。截至2018年底,百色市轄12個縣(市、區)135個鄉鎮(街道辦事處)正式注冊成立動物防疫合作社136個,全市鄉鎮及街道辦事處建立合作社實現了全覆蓋。建立動物防疫合作社,優化了動物防疫一線人員隊伍,并對全體合作社人員開展全方位技術培訓,為提高動物防疫工作質量打下堅實基礎。