2018年江蘇省種畜禽場主要?jiǎng)游镆卟《c(diǎn)監(jiān)測情況分析

王相子 徐小艷 開 妍 陳昌海 邱 冬

（江蘇省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036）

為更好地了解我省種畜禽場主要?jiǎng)游镆卟∶庖咝Ч莆瘴沂≈饕獎(jiǎng)游镆卟∶庖呖贵w變化情況，為科學(xué)防控動(dòng)物疫病提供技術(shù)支撐，我省結(jié)合實(shí)際情況，開展了2018年種畜禽場主要?jiǎng)游镆卟《c(diǎn)監(jiān)測工作。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

1.1.1 采樣范圍。在本省的11個(gè)縣、區(qū)選取了畜禽養(yǎng)殖密集區(qū)、水網(wǎng)地區(qū)、流通頻繁地區(qū)的18個(gè)種畜禽養(yǎng)殖場作為定點(diǎn)監(jiān)測點(diǎn)，其中種雞場9個(gè)，種鴨場1個(gè)，種豬場8個(gè)（表1）。

表1 定點(diǎn)監(jiān)測點(diǎn)分布情況表

1.1.2 監(jiān)測頻次和樣品數(shù)量。每季度（1月、4月、7月、10月）由定點(diǎn)場所在縣獸醫(yī)站負(fù)責(zé)采集一次樣品，并集中送至省疫控中心檢測。每場每次采集30份血清樣品。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材

單道、8道、12道移液器；96孔U型反應(yīng)板；全自動(dòng)移液器；100ml量筒；超純水儀；全自動(dòng)洗板機(jī)；酶標(biāo)儀；恒溫培養(yǎng)箱。

1.3 疫苗種類與免疫程序

1.3.1 疫苗種類。10個(gè)種禽場均免疫禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗，9個(gè)種雞場免疫了新城疫弱毒疫苗或滅活聯(lián)苗；8個(gè)種豬場中7個(gè)免疫了口蹄疫滅活疫苗，1個(gè)免疫了口蹄疫合成肽疫苗；8個(gè)種豬場均免疫豬瘟活疫苗和高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗。

1.3.2 免疫程序。各種畜禽場均按農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推薦免疫程序開展免疫，并要求在疫苗免疫21d后進(jìn)行采樣。

1.4 監(jiān)測方法及試劑

1.4.1 禽血清采用血凝及血凝抑制（HA/HI）方法檢測。高致病性禽流感以GB/T 18936-2003為檢驗(yàn)依據(jù)，將抗體效價(jià)≥24判定為合格，否則判為不合格[1]；雞新城疫以GB/T 16550-2008為檢驗(yàn)依據(jù)，將抗體效價(jià)≥25判定為合格，否則判為不合格[1]。H5亞型高致病性禽流感抗原和雞新城疫抗原均購自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.4.2 豬血清采用ELISA方法檢測。O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，購自農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所；高致病性豬藍(lán)耳病抗體檢測試劑盒，購自武漢科前生物股份有限公司；豬瘟抗體ELISA檢測試劑盒，購自北京愛德士元亨生物科技有限公司。

操作方法按試劑盒說明書進(jìn)行，抗體陽性判為合格，否則為不合格。

2 結(jié)果與分析

2.1 全省檢測結(jié)果

2018年全省分季度共開展4次定點(diǎn)監(jiān)測。全年共檢測樣品6248份，其中H5亞型高致病性禽流感檢測樣品1164份，平均免疫抗體合格率為99.74%；H7N9流感1163份，合格率97.08%；雞新城疫1045份，合格率100%；豬O型口蹄疫956份，合格率88.49%；高致病性豬藍(lán)耳病960份，合格率97.60%；豬瘟960份，合格率80.42%（表2、表3）。

表2 2018年全省種禽場定點(diǎn)監(jiān)測結(jié)果匯總表

表3 2018年全省種豬場定點(diǎn)監(jiān)測結(jié)果匯總表

從表2、表3數(shù)據(jù)看，我省定點(diǎn)監(jiān)測點(diǎn)主要?jiǎng)游镆卟≌w免疫抗體水平優(yōu)良，所監(jiān)測病種的平均免疫抗體合格率均高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求的70%標(biāo)準(zhǔn)[1]。

2.2 種禽場抗體情況

對10個(gè)種禽場的1164份禽血清樣品進(jìn)行了H5亞型高致病性禽流感免疫抗體檢測，合格1161份，合格率99.74%；共檢測H7N9流感樣品1163份，合格1129份，合格率97.08%。從表2看出，此兩種疫病平均免疫抗體合格率全年各季度均保持在90%以上的較高水平。但是以場點(diǎn)為單位來看，各場點(diǎn)的H5亞型禽流感抗體抗體水平較高（圖1），而H7N9流感的抗體水平雖然整體也保持在較高水平，但是M縣監(jiān)測點(diǎn)二季度的抗體合格率僅為46.67%（圖2）。經(jīng)查，可能與該場點(diǎn)禽群進(jìn)行禽流感二價(jià)苗二免后3天即進(jìn)行采樣監(jiān)測有關(guān)。

對9個(gè)種雞場的1045份雞血清樣品進(jìn)行了雞新城疫免疫抗體檢測，合格1045份，合格率100%。

圖1 H5亞型高致病性禽流感免疫抗體分析

圖2 H7N9流感免疫抗體分析

2.3 種豬場抗體情況

對8個(gè)種豬場的956份豬血清樣品進(jìn)行了O型口蹄疫免疫抗體檢測，合格846份，合格率88.49%。結(jié)合表3看，二季度的平均免疫抗體合格率最低，為81.25%。四個(gè)季度種豬場的平均免疫抗體合格率均高于80%，整體免疫抗體水平優(yōu)良。但是以場點(diǎn)為單位看，存在場點(diǎn)間的合格率差異較大，抗體水平不均衡情況。其中A區(qū)、E區(qū)、M縣的場點(diǎn)，均有部分季度免疫抗體合格率未達(dá)到70%，尤其是一、二、四季度中各場點(diǎn)的免疫抗體合格率離散度較高（圖3）。

對8個(gè)種豬場的960份豬血清樣品進(jìn)行了高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體檢測，合格937份，合格率97.60%。全年四個(gè)季度的平均免疫抗體水平均高于90%，整體處于優(yōu)良的免疫抗體水平。以場點(diǎn)為單位分析，所有場點(diǎn)各季度合格率均高于70%（圖4）。

對8個(gè)種豬場的960份豬血清樣品進(jìn)行了豬瘟免疫抗體檢測，合格772份，合格率80.42%。四個(gè)季度的平均免疫抗體合格率均高于70%，其中二季度的平均免疫抗體合格率最低，為71.67%。以場點(diǎn)為單位看，同樣存在場點(diǎn)間的合格率差異較大，抗體水平不均衡情況。其中A區(qū)、E區(qū)、J縣、K區(qū)、M縣的場點(diǎn)，均有部分季度免疫抗體合格率未達(dá)到70%。以一、二、四季度場點(diǎn)的免疫抗體合格率離散度較高，整體情況與豬O型口蹄疫免疫抗體情況相似（圖5）。

圖3 豬O型口蹄疫免疫抗體分析

圖4 高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體分析

圖5 豬瘟免疫抗體分析

3 討論

3.1 我省主要?jiǎng)游镆卟≌w免疫抗體水平較高

2018年四個(gè)季度的定點(diǎn)監(jiān)測中，我省種畜禽場主要?jiǎng)游镆卟〉钠骄庖呖贵w合格率處于較高的水平，說明近年來我省的主要?jiǎng)游镆卟》揽啬芰θ员３州^高水平，使用免疫程序合理，種畜禽場管理嚴(yán)格，為保障全省商品代畜禽養(yǎng)殖提供良好基礎(chǔ)。

3.2 種畜禽場的免疫程序應(yīng)根據(jù)抗體水平及時(shí)調(diào)整

從場點(diǎn)分析中能看出，部分場點(diǎn)的免疫抗體水平在四個(gè)季度的監(jiān)測中呈現(xiàn)出一、三季度較好，二、四季度較差的波動(dòng)態(tài)勢。通過追溯這部分場點(diǎn)的免疫記錄，發(fā)現(xiàn)該部分場點(diǎn)存在春秋季集中免疫，而平時(shí)不開展群體抗體水平調(diào)查，造成二、四季度免疫抗體合格率較低的情況。這樣易使群體形成免疫空檔，增加畜禽群出現(xiàn)疫病感染后爆發(fā)疫情的風(fēng)險(xiǎn)。種畜禽場應(yīng)根據(jù)需要建立群體免疫抗體水平監(jiān)控機(jī)制，定期檢測養(yǎng)殖場內(nèi)不同群體的抗體水平，根據(jù)檢測結(jié)果及時(shí)調(diào)整免疫程序，填補(bǔ)免疫空檔。

3.3 豬的O型口蹄疫和豬瘟防控不容忽視

盡管此兩種病的平均免疫抗體合格率均高于70%，但是場群間存在合格率差異較大的情況。經(jīng)調(diào)查，問題主要表現(xiàn)在：各養(yǎng)殖場的防控意識水平不一，免疫程序不符合場群實(shí)際情況；免疫接種劑量不足；豬群存在疫苗免疫空檔等方面。針對這兩種動(dòng)物疫病免疫抗體水平差異較大的情況，種豬場應(yīng)加強(qiáng)生物安全措施，根據(jù)場群實(shí)際情況調(diào)整豬群免疫程序及劑量，定期開展抗體監(jiān)測，提高動(dòng)物疫病防控能力。

3.4 群體感染免疫抑制病會(huì)影響疫苗免疫效果

除去疫苗免疫程序不合理、存在免疫空擋等問題，群體的野毒感染也會(huì)對疫苗免疫效果構(gòu)成威脅。通過對監(jiān)測豬群開展豬偽狂犬病gE抗體ELISA試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，部分豬瘟免疫抗體不合格的場群存在豬偽狂犬病gE抗體陽性較高的情況，原因可能是群體感染豬偽狂犬病，會(huì)抑制或干擾其他疫苗的免疫，使豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答下降[2]。

3.5 下一步應(yīng)同步開展病原學(xué)監(jiān)測

通過對這些場點(diǎn)長達(dá)一年的定點(diǎn)監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，即使是生產(chǎn)管理更規(guī)范、疫病防控意識更強(qiáng)的種畜禽場，仍然存在疫病防控問題。目前，血清學(xué)監(jiān)測幫助我們很好的掌握了全省種畜禽場免疫抗體水平，提示相關(guān)場點(diǎn)及時(shí)調(diào)整免疫程序、定期加強(qiáng)補(bǔ)免，但場點(diǎn)的疫病感染情況、全省的病原分布情況等還不能通過定點(diǎn)監(jiān)測進(jìn)行掌握。下一步，應(yīng)考慮在定點(diǎn)監(jiān)測中對種畜禽場同步開展病原學(xué)監(jiān)測，進(jìn)一步掌握全省的疫情動(dòng)態(tài)，為全省的疫病防控提供數(shù)據(jù)支撐。