3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲的室內(nèi)毒力測(cè)定

韓 慧，毛瑞卿，趙志國(guó)，張利軍，高玲玲，郭艷瓊

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，山西太谷030801）

梨小食心蟲（Grapholita molesta Busck），簡(jiǎn)稱梨小，屬鱗翅目卷蛾科小食心蟲屬，是一種嚴(yán)重為害桃、梨等果樹的世界性蛀果類害蟲，在我國(guó)廣泛分布。近年來，由于農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，果園栽培模式和管理措施的變化等因素，梨小食心蟲在我國(guó)各地大發(fā)生[1]，尤其是在桃李混栽區(qū)域發(fā)生危害情況最為嚴(yán)重。梨小食心蟲是一種鉆蛀類害蟲，整個(gè)幼蟲期均在果實(shí)或幼嫩新梢中度過，幼蟲期難防治，因此，卵期和成蟲期是防治的關(guān)鍵時(shí)期[2]。蔡明飛等[2]通過3 種高效殺卵藥劑對(duì)梨小食心蟲卵的室內(nèi)觸殺試驗(yàn)表明，3 種藥劑對(duì)卵的防治效果很低，甚至無效。

目前，生產(chǎn)上防治梨小食心蟲的措施主要是化學(xué)防治、物理防治和生物防治，物理防治主要是果實(shí)套袋和誘殺，生物防治是利用天敵昆蟲防治和近些年來興起的“仿生治蟲”，由于物理防治和生物防治成本高，見效慢，易受氣候條件影響，目前生產(chǎn)上多使用化學(xué)防治。由于長(zhǎng)期不合理使用化學(xué)農(nóng)藥，導(dǎo)致梨小食心蟲已經(jīng)產(chǎn)生了抗藥性[3]。

本試驗(yàn)選用目前生產(chǎn)中防治梨小食心蟲常用的3 種殺蟲劑，對(duì)梨小食心蟲卵和成蟲進(jìn)行毒力測(cè)定，為后續(xù)梨小食心蟲的研究提供試驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院生物安全與生物防治實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，供試蟲源為室內(nèi)人工飼養(yǎng)的梨小食心蟲種群。采用人工飼料在智能人工氣候箱（寧波海曙賽福實(shí)驗(yàn)儀器廠）飼養(yǎng)[4]，飼養(yǎng)條件為溫度26 ℃、光周期L∶D＝15∶9、相對(duì)濕度60%～80%、光照強(qiáng)度4 800 lx[5]。供試蟲卵為初產(chǎn)24 h 以內(nèi)的卵，供試成蟲為羽化48 h 以內(nèi)的成蟲。

1.2 藥劑

有機(jī)磷殺蟲劑馬拉硫磷（Malathion）99.5%原藥，美國(guó)SIGMA 公司；鄰甲酰氨基苯甲酰胺類殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺（Chlorantraniliprole）99.5%原藥，美國(guó)SIGMA 公司；擬除蟲菊酯類殺蟲劑溴氰菊酯（Deltamethrin）99.5%原藥，美國(guó)SIGMA 公司；將上述原藥分別以丙酮溶解，配制成母液（10 mg/mL），現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 藥劑對(duì)梨小食心蟲卵的毒力測(cè)定 采用浸漬法處理梨小食心蟲蟲卵[6]，將配制好的母液稀釋成系列質(zhì)量濃度，馬拉硫磷質(zhì)量濃度為5，10，50，100，200 μg/mL，氯蟲苯甲酰胺質(zhì)量濃度為1，10，50，100，500，600，800 μg/mL，溴氰菊酯質(zhì)量濃度為1，5，10，50，100 μg/mL，以丙酮處理為對(duì)照，每個(gè)處理20 粒卵，重復(fù)3 次，將待處理的卵放入藥劑中浸泡5～10 s 后，確保卵都接觸到藥劑，用吸水紙吸取卵紙表面多余的藥劑，放入干凈已經(jīng)滅菌的培養(yǎng)皿中，并放入濕潤(rùn)的脫脂棉球，卵紙不能碰到棉球或沾上水，將培養(yǎng)皿放入正常飼養(yǎng)環(huán)境下，72 h 后觀察結(jié)果。卵粒變黑視為死亡，卵粒顏色透明或發(fā)白并且有小孔，視為孵化。

1.3.2 藥劑對(duì)梨小食心蟲成蟲的毒力測(cè)定 采用藥膜法處理成蟲[7]，將母液配制成系列質(zhì)量濃度，馬拉硫磷質(zhì)量濃度為1，5，10，50，100，500 μg/mL，氯蟲苯甲酰胺質(zhì)量濃度為1，5，10，20，50，80，100，150，200 μg/mL，溴氰菊酯質(zhì)量濃度為1，5，10，50，100 μg/mL，以丙酮處理為對(duì)照，每個(gè)處理7 頭成蟲，重復(fù)3 次。將配制好的藥液轉(zhuǎn)移到直徑8 cm 的指形管中，倒入藥液后，傾斜試管緩慢滾動(dòng)，使藥液在試管內(nèi)壁上形成一層均勻的藥膜，藥膜面積占試管面積的4/5，待試管內(nèi)藥液變干，將待處理成蟲放入試管中，加入帶有蜂蜜水的棉花補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，避免成蟲饑餓死亡，將試管口用棉花塞好，放入培養(yǎng)箱中，24 h后觀察成蟲的死亡情況，參照《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺蟲劑第8 部分：濾紙藥膜法》（NY/T 1154.8—2007），用鑷子或毛筆輕觸靶標(biāo)的身體，以蟲體不動(dòng)為死亡標(biāo)準(zhǔn)。

死亡率＝（處理前樣品總數(shù)-處理后樣品總數(shù)）/處理前樣品總數(shù)×100% （1）

校正死亡率＝（處理死亡率-對(duì)照死亡率）/（1-對(duì)照死亡率）×100% （2）

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），采用Tukey 多重比較法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，采用Probit 回歸計(jì)算致死中濃度（LC50）、毒力回歸方程。

2 結(jié)果與分析

2.1 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲卵的室內(nèi)觸殺效果

比較3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲卵的測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，馬拉硫磷和氯蟲苯甲酰胺對(duì)于卵的致死效果差，溴氰菊酯對(duì)于卵的致死效果高。在同質(zhì)量濃度（100 μg/mL）下，溴氰菊酯處理的死亡率達(dá)到85%，而馬拉硫磷處理的死亡率僅為45%，氯蟲苯甲酰胺處理的死亡率只有6.67%（表1）。

表1 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲卵的室內(nèi)觸殺效果 %

2.2 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲卵的毒力測(cè)定

由表2 可知，3 種不同類型殺蟲劑溴氰菊酯對(duì)梨小食心蟲卵的毒力最高，致死中濃度為16.81 μg/mL，是毒力最低的氯蟲苯甲酰胺的33.4 倍；其次是馬拉硫磷，LC50值為218.17 μg/mL，毒力是氯蟲苯甲酰胺的2.57 倍。

表2 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲卵的毒力測(cè)定

2.3 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲成蟲的室內(nèi)觸殺效果

由表3 可知，馬拉硫磷對(duì)于成蟲的防治效果最好，溴氰菊酯次之，氯蟲苯甲酰胺的防治效果最差。在同質(zhì)量濃度（50 μg/mL）下，馬拉硫磷處理的死亡率為100%，溴氰菊酯處理的死亡率達(dá)到了85.71%，氯蟲苯甲酰胺處理的死亡率僅為9.52%。

表3 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲成蟲的室內(nèi)觸殺效果 %

2.4 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲成蟲的毒力測(cè)定

表4 3 種不同類型殺蟲劑對(duì)梨小食心蟲成蟲的毒力測(cè)定

從表4 可以看出，3 種不同類型殺蟲劑中馬拉硫磷對(duì)成蟲的毒力最高，LC50為3.08 μg/mL，是毒力最低的氯蟲苯甲酰胺的42.46 倍；其次是溴氰菊酯，致死中濃度為23.52 μg/mL，毒力是氯蟲苯甲酰胺的5.56 倍。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，3 種不同類型殺蟲劑處理梨小食心蟲的卵，馬拉硫磷的致死中濃度為218.17 μg/mL，氯蟲苯甲酰胺的致死中濃度為561.51 μg/mL，溴氰菊酯的致死中濃度為16.81 μg/mL；溴氰菊酯對(duì)梨小食心蟲卵的室內(nèi)觸殺效果較好，100 μg/mL的溴氰菊酯死亡率達(dá)到85%，其次是馬拉硫磷，氯蟲苯甲酰胺的觸殺效果最差。梨小食心蟲的卵主要是通過孵化后幼蟲鉆到果實(shí)內(nèi)部危害，造成果實(shí)容易早期脫落，后期果實(shí)內(nèi)部充滿糞便，不堪食用[8]。梨小食心蟲還可鉆蛀新梢，造成新梢死亡，影響果樹生長(zhǎng)[9]。所以，防治梨小食心蟲的關(guān)鍵時(shí)期是卵期、老熟幼蟲期、成蟲期。卵主要產(chǎn)在樹梢頂端葉片背面或者果實(shí)的萼洼處和果柄處，老熟幼蟲越冬及化蛹主要在樹干處，其他各代老熟幼蟲主要在樹干的向陽(yáng)面且不易淋雨的地方，土壤化蛹極少[10]。已經(jīng)有試驗(yàn)證明，現(xiàn)有藥劑對(duì)梨小食心蟲卵的防治效果較差[2]，主要由于梨小食心蟲的卵殼具有保護(hù)功能，所以，殺蟲劑難以接觸到卵的內(nèi)部。擬除蟲菊酯類殺蟲劑目前應(yīng)用于梨小食心蟲防治中較多，其作用于昆蟲的神經(jīng)軸突。已經(jīng)有試驗(yàn)證明，高效氯氰菊酯對(duì)卵具有高效觸殺作用[11]。有機(jī)磷類殺蟲劑是作用于昆蟲的乙酰膽堿酯酶或乙酰膽堿受體，破壞正常的神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)[12]，對(duì)蟲、螨有較高的防治效果。馬拉硫磷進(jìn)入到蟲體后會(huì)被氧化成馬拉氧磷，從而更能發(fā)揮毒殺作用。氯蟲苯甲酰胺屬于雙酰胺類殺蟲劑，是新型的化學(xué)藥劑，作用機(jī)制與其他藥劑不同，作用機(jī)制是激活昆蟲魚尼丁（肌肉）受體，過度釋放細(xì)胞內(nèi)鈣離子，使昆蟲癱瘓[13]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，馬拉硫磷和氯蟲苯甲酰胺對(duì)于卵的防效低的原因，可能是由于其不能完全穿透卵殼，無法直接作用于梨小食心蟲。

對(duì)于梨小食心蟲成蟲，馬拉硫磷的致死中濃度為3.08 μg/mL，氯蟲苯甲酰胺的致死中濃度為130.78 μg/mL，溴氰菊酯的致死中濃度為23.52 μg/mL，說明馬拉硫磷對(duì)于成蟲的防治效果最好，溴氰菊酯次之，氯蟲苯甲酰胺的防治效果最差。梨小食心蟲的成蟲期是其快速繁殖期，也是目前生產(chǎn)上防治的關(guān)鍵時(shí)期[14]。葉片是產(chǎn)卵的主要場(chǎng)所，除蘋果和海棠等果樹外，在梨樹、桃樹、杏樹的葉背面產(chǎn)卵[15]。成蟲期的梨小食心蟲尋求配偶，此時(shí)使用化學(xué)農(nóng)藥防治，會(huì)有很好的防治效果。有機(jī)磷殺蟲劑對(duì)鱗翅目昆蟲的毒性很強(qiáng)，生產(chǎn)中很早就開始使用有機(jī)磷殺蟲劑防治梨小食心蟲[16]。蔡明飛等[2]研究表明，毒死蜱能夠有效防治梨小食心蟲成蟲。本試驗(yàn)中使用馬拉硫磷對(duì)梨小食心蟲成蟲的毒力也很高。溴氰菊酯是擬除蟲菊酯類殺蟲劑，是使用天然菊素人工合成農(nóng)藥，因效果好，殘留低，被大力推廣，但在本試驗(yàn)中對(duì)梨小食心蟲的防治效果較差，可能是由于溴氰菊酯主要以觸殺和胃毒為主，害蟲有一定的趨避與拒食作用，導(dǎo)致其藥效降低[17]。氯蟲苯甲酰胺是2001 年新上市的新型高效廣譜殺蟲劑，對(duì)人畜低毒，持效期長(zhǎng)[18]。在本試驗(yàn)中對(duì)梨小食心蟲的防治效果較差，可能是氯蟲苯甲酰胺主要以胃毒方式發(fā)揮作用[19]，本試驗(yàn)中梨小食心蟲可能沒有取食氯蟲苯甲酰胺，導(dǎo)致效果較差。此試驗(yàn)為后續(xù)試驗(yàn)提供了參考依據(jù)，同時(shí)也為生產(chǎn)中使用殺蟲劑防治梨小食心蟲提供了科學(xué)依據(jù)。因此，使用化學(xué)藥劑防治梨小食心蟲，卵期可以采用溴氰菊酯防治，成蟲期可以采用馬拉硫磷進(jìn)行防治。