甜瓜霜霉病苗期抗病性鑒定方法建立及種質資源評價

張學軍，郭麗霞，張 健，楊 永，李寐華，伊鴻平

(1.新疆農業科學院哈密瓜研究中心,烏魯木齊 830091; 2.衢州新農都院士工作站,浙江衢州 324022)

0 引 言

【研究意義】甜瓜霜霉病是由鞭毛菌亞門 ，古巴霜霉菌[Pseudoperonospora cubensis(Berk.et&Curt.)Rostov.]引起的真菌性病害[1]，威脅著80多個國家的黃瓜生產和50多個國家的甜瓜生產，并且有不斷增多的趨勢[2]。甜瓜霜霉病主要為害葉片，發病初期在葉片上形成水浸狀小斑點，病斑擴大后，受葉脈限制呈黃褐色角斑，并伴有灰黑色霉層產生，最后葉片成片發黃甚至焦枯，俗稱"跑馬干"[3]。嚴重影響光合作用，對甜瓜的產量、果實含糖量和商品率都造成了直接的影響，流行年份可減產30%～50%，嚴重70%～80%，甚至絕產[4]。培育品質優良的抗病品種，利用品種抗病性能有效降低該病害帶來的產量損失，而篩選抗甜瓜霜霉病的種質資源是選育抗病品種的前提和基礎。【前人研究進展】甜瓜霜霉病抗性鑒定時期分苗期和成株期，Cohen(1984)等[5]對甜瓜霜霉病抗性鑒定時期進行了研究，結果表明，苗期和成株期鑒定的病情指數呈正相關。相比苗期抗病性鑒定，成株期鑒定時間長，成本高，所以為了方便研究，通常是人為創造適宜的條件，在苗期進行霜霉病抗病性鑒定。針對甜瓜抗霜霉病苗期抗病性鑒定研究，國內外已經有報道，Cohen(1977)等[6]認為甜瓜霜霉病主要受環境條件影響，在不同接種濃度、不同環境條件下，病情指數可能會出現較大的偏差。Perchepied(2005)等[7]利用抗病品系PI124112和感病品系Védrantais的雜交后代、Edisto 47、Ouzbèque 2、PI414723和MR-1為材料，分別在6種環境下評估對霜霉病病原菌的反應，結果顯示，在不同的環境下，相同的材料對霜霉病的抗性不同。張學軍(2016)等[8]也表明甜瓜霜霉病的發病受周圍環境影響很大，研究人員地域不同，環境條件不一致的條件下，必然導致結果上存在差異。【本研究切入點】針對缺乏統一標準的甜瓜霜霉病抗病鑒定體系，由于不同的人采用抗病鑒定方法和標準因個人而定，抗性鑒定結果缺乏可比性，影響抗病機理的研究和抗病材料的應用。【擬解決的關鍵問題】采用不同接種方法，不同接種苗齡，不同接種濃度三因素三水平正交試驗設計，建立甜瓜霜霉病苗期抗性鑒定方法，并對208份新疆哈密瓜資源和國內外引進甜瓜資源進行霜霉病抗病性評價。篩選抗甜瓜霜霉病的種質資源，為抗病機理研究、種質資源創新及抗病新品種選育奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材 料

供試材料：新疆地方品種卡拉克賽(高感)和皇后(高感)，抗病資源PI414723(高抗)和MR-1(高抗)，65份國外引進甜瓜資源和137份新疆哈密瓜資源(由新疆農業科學院哈密瓜研究中心提供)，6份引進自交系T111-T116(引自中國農業科學院鄭州果樹研究所)。

甜瓜霜霉病菌[Pseudoperonospora cubensis(Berk.etCurt.)Rostov.]采自海南三亞地區設施栽培的甜瓜，單孢子分離后擴繁備用。"不怕雨"購自上海永通化工有限公司。

1.2 方 法

1.2.1 材料準備

供試甜瓜種子置于恒溫烘箱中，調制溫度48～68℃，干熱梯度消毒4 d，再將消毒后的干種子用0.1%升汞處理10 min，大量清水沖洗干凈后，擺放在墊有滅菌的兩層濾紙培養皿內，在28～30℃恒溫生長箱內催芽，出芽后播于塑料營養缽內，育苗基質為椰糠和黃砂(6∶1)營養土，放入海南三亞溫室大棚內正常管理備用。

從海南三亞田間采集早期自然發病的甜瓜葉片，鏡檢鑒定確定為甜瓜霜霉病。用毛刷刷取葉背面的分生孢子，單孢子分離，點接法[9]接種于'卡拉克賽'的子葉上，之后放入光照培養箱進行黑暗交替擴繁培養。

1.2.2 霜霉病接種鑒定體系的建立

1.2.2.1 接種

采用點接法、刷葉法和噴霧法。點接法：在第2片真葉展開時，采用真葉點滴法接種，主要是參考子葉點滴法，將5×103個孢子/mL的分生孢子懸浮液用移液器進行接種，接種量0.04 mL，以上3種方法共設3次重復，每次重復接種50株幼苗。接種后架小拱棚黑暗保濕48 h，控制溫度夜間20℃白天25℃，相對濕度90%以上。刷葉法[10]：甜瓜幼苗2葉1心期用滅菌后的毛筆將濃度為5×103個孢子/mL的分生孢子懸浮液(加入0.5‰的"不怕雨")均勻刷到葉片上。之后正常管理。噴霧法[11]：于甜瓜幼苗2葉1心期用L型手持噴霧瓶將濃度為5×103個孢子/mL的分生孢子懸浮液(加入0.5‰的"不怕雨")均勻噴灑到甜瓜葉片上，以孢子懸浮液布滿葉片滴宜。接種后7～10 d調查發病情況。

1.2.2.2 接種時期

分別在甜瓜幼苗1葉1心、2葉1心、3葉1心期用L型手持噴霧瓶將濃度為5×103個孢子/mL的分生孢子懸浮液(加入0.5‰的"不怕雨")均勻噴于植株葉片正反面上，直到流水為止，設3次重復，每次重復接種40株幼苗。接種后加黑色遮陰網保持黑暗，控制溫度在夜間20℃，白天25℃，相對濕度95%以上，之后正常管理，接種7～10 d后調查發病情況。

1.2.2.3 接種濃度

從田間采集早期自然發病的甜瓜葉片，用毛刷刷取葉背面的甜瓜霜霉病分生孢子，點接法接種于'卡拉克賽'的子葉上，之后放入光照培養箱進行黑暗交替培養，7 d后用毛刷刷取葉背面黑色霉層于盛有無菌水的燒杯中，加入0.5‰的"不怕雨"(上海永通化工有限公司)攪拌均勻制成菌懸液，用血球計數板計數，調至最終孢子濃度為5×102個孢子/mL、5×103個孢子/mL和5×104個孢子/mL。后將不同濃度的孢子懸浮液用L型手持噴霧瓶均勻噴于植株葉片正反面上，直到流水為止，設3次重復，每次重復接種50株幼苗。接種后加黑色遮陰網保持黑暗，控制溫度在夜間20℃，白天25℃，相對濕度95%以上，之后正常管理，接種7～10 d調查發病情況。

1.2.2.4 病情分級標準

噴霧法和刷葉法病情分級標準參照Criswell(2008)、Epinat C(1994a，1994b)和呂淑珍(1990)的抗性分級標準并適當修改[12-15]。0級無癥狀；1級病斑面積占整級病斑面積占整個葉片面積的1/4以下；2級病斑面積占整個葉片面積的1/4～1/2；3級病斑面積占整個葉片面積的1/2～2/3；4級病斑面積占整個葉片面積的2/3～3/4；5級病斑面積占整個葉片面積的3/4以上。

點接法調查病情分級標準如下： 0級無癥狀；1級接種點出現輕微病斑，其直徑小于0.5 cm；2級病斑直徑0.5～1.5 cm；3級接種點黃化面積占子葉面積的1/2以下，或壞死斑面積占葉面積1/3以下；4級壞死斑面積占葉面積1/3～2/3；5級壞死斑面積占葉面積2/3以上。

1.3 甜瓜資源抗性評價指標

按照下列公式計算病情指數。

種質資源對霜霉病的抗性根據病情指數分6級，分別為：免疫(IM)：DI=0；高抗(HR):DI≤ 20；抗病(R):2080。

2 結果與分析

2.1 接種方法對霜霉病發病率的影響

研究表明，接種方法對霜霉病的發病率影響顯著。點接法的品均發病率最高為97.3%，噴霧法的平均發病率為96.0%，刷葉法的平均發病率為85.2%，經生物學統計分析，點接法和噴霧法的發病率差異不顯著，這兩種接種后的發病率與刷葉法接種后發病率差異顯著，由于噴霧法操作方便，比點接法省時省力，因此,甜瓜苗期霜霉病接種最佳方法是噴霧法。表1

表1 不同接種方法下霜霉病發病率變化
Table 1 Effects of different inoculation methods on the incidence of downy mildew

接種方法Inoculation method接種株數Inoculation number發病株數Disease number平均發病率(%)Average incidence rate差異顯著性Significance of difference噴霧法Spraying inoculation method50475048504996.0aA點接法Spot inoculation method50505048504897.3aA刷葉法Brush inoculation method50425044504285.3bB

注：a表示P≤0.05，A表示在P≤0.01

2.2 接種時期對霜霉病發病率的影響

研究表明，甜瓜幼苗1葉1心時期接種霜霉病病原菌后發病率最低，為88.7%，當幼苗長到2葉1心和3葉1心時，接種霜霉病病原菌后發病率分別為95.3%和94.7%，SAS軟件分析2葉1心時期和3葉1心時期接種后發病率差異不顯著，但這2個時期與1葉1心時期接種的發病率差異達到顯著水平，且這2個時期發病較快，接種后5 d就逐漸開始發病，但由于2葉1心時期接種到調查病情比3葉1心時期時間短，利于后續試驗安排，甜瓜霜霉病最佳接種時期為2葉1心時期。表2

表2 不同接種時期霜霉病發病率變化
Table 2 Effects of different inoculation periods on the incidence of downy mildew

接種時期Inoculation period接種株數Inoculation number發病株數Disease number平均發病率(%)Average incidence rate差異顯著性Significance of difference1葉1心One leaf stage50435044504688.7bB2葉1心Two leaf stage50475048504895.3aA3葉1心Three leaf stage50465048504894.7aA

注：a表示P≤0.05，A表示在P≤0.01

2.3 接種濃度對霜霉病發病率的影響

研究表明，霜霉病病原菌孢子懸浮液濃度不同時，接種后霜霉病發病率有顯著不同。接種濃度為5×102個孢子/mL時，發病率最低，為76.7%； 隨著濃度的增加，發病率明顯增加，接種濃度為5×103個孢子/mL時，發病率最為96.7%；當接種濃度為 5×104個孢子/mL時，發病率97.3%。 經SAS軟件差異顯著性分析，接種濃度為5×103個孢子/mL和5×104個孢子/mL時發病率差異不顯著，與接種濃度為5×102個孢子/mL的發病率達到極顯著差異水平，因此，在接種濃度為5×103個孢子/mL時，即可達到抗病鑒定發病的要求。表3

表3 不同接種濃度下霜霉病發病率變化
Table 3 Effects of different inoculation concentrations on the incidence of downy mildew

接種濃度Inoculation concentration接種株數Inoculation number發病株數Disease number平均發病率(%)Average incidence rate差異顯著性Significance of difference5×10250385038504076.7bB5×10350505048504796.7aA5×10450495049504897.3aA

注：a表示P≤0.05，A表示在P≤0.01

2.4 對霜霉病的抗病鑒定

208份甜瓜種質資源對霜霉病苗期結果鑒定表明，有18份材料表現出有對霜霉病的抗性，占供試材料的8.65%；其中，發現5份免疫材料，分別是MR-1、PI438628、PI442177、PI438685和PI390452；7份表現高抗的材料是PI414723、PI124112、8-167、8-169、PI164637、PI164723和T115，抗病材料有6份，分別是T112、T114、T116、8-119、8-148和21夏甜瓜。其余91.35%的材料均表現為感病。在抗病材料中，除了MR-1、T112、T114、T115、T116和8-101外全部是國外PI系，新疆甜瓜資源除了8-101、8-119和8-148外全部表現為高感，引自中國農科院鄭州果樹所的6個材料中，有3個表現為抗病。總之,甜瓜資源對霜霉病表現抗病的比較少，且大都是PI系列，直接應用難度比較大，需要長時間的轉育。表4

表4 甜瓜資源抗病鑒定結果
Table 4 Identification of disease resistance of melon resources

編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性Resis-tance編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性 Resis-tance1卡拉其里甘 Kalaqiligan伽師縣Jiashi County96.0 HS105卡拉麥蓋Kalamaigai于田縣Yutian County96.0 HS2紅肉熱瓜旦 Hongroureguadan喀什市Kashi County97.3 HS106塔吾孜可洪Tawuzikehong伊犁市Yili County98.0 HS3其里甘Qiligan尉犁縣Yuli County98.7 HS107庫達可口其 Kudakekouqi庫爾勒市Kuerle County98.0 HS4吐魯番瓜旦子Turpanguadanzi吐魯番Turpan County88.7 HS108木吉可口其 Mujikekouqi皮山縣Pishan County97.3 HS5恰爾其里甘Qiaerqiligan吐魯番Turpan County90.0 HS109克孜可口其 Kezikekouqi吐魯番Turpan County91.3 HS6奎克其里甘Kuikeqiligan疏附縣 Shufu County91.3 HS110青麻皮 Qingmapi鄯善縣Shanshan County90.7 HS7黃旦子 Huangdanzi前蘇聯 USSA66.7 MS111冬可口其 Donkekouqi和田縣Hetian County93.3 HS8塔石可洪Tashikehong吐魯番Turpan County92.7 HS112卡拉克賽 Kalakesai伽師縣Jiashi County93.3 HS9納西甘Naxigan和田市Hetian County89.3 HS113哈密加格達(紅肉) Hamijiageda哈密市Hami County96.7 HS10努拉伊(綠肉)Nulayi green皮山縣Pishan County94.0 HS114哈密加格達(綠肉) Hamijiageda哈密市Hami County98.0 HS11努拉伊(紅肉)Nulayi red皮山縣Pishan County94.0 HS115來末穆 Laimomu鄯善縣Shanshan County99.3 HS12離瓜Ligua伽師縣Jiashi County96.7 HS116秋黃皮白肉可口奇Qiuhuangpibairoukekouqi吐魯番 Turpan County96.7 HS13巴登Badeng鄯善縣 ShanshanCounty86.7 HS117于田冬瓜Yutiandonggua于田縣Yutian County97.3 HS14白巴登Baibadeng鄯善縣 ShanshanCounty97.3 HS118塔城冬甜瓜Tachengdongtiangua塔城市Tacheng County98.0 HS15哈曼齊Hamanqi疏附縣 Shufu County100.0 HS119奎克維爾 Kuikeweier新和縣Xinhe County96.0 HS16奎克蘇依曼 Kuikesuyiman且末縣Qiemo County98.0 HS120阿拉格爾 Alageer岳普湖縣Yuepuhu County98.0 HS17阿克蘇伊曼 Akesuyiman岳普湖Yuepuhu County98.0 HS121青皮白肉冬瓜Qinpibairoudonggua吐魯番 Turpan County92.7 HS18波斯皮牙孜Bosipiyazi麥蓋提縣 Maigaiti County96.7 HS122細紋紅肉 Xiwenhongrou阿克蘇市Akesu County91.3 HS19謝克蘇Xiekesu吐魯番Turpan County96.0 HS123奎孜力克集孜Kuizilikejizi伽師縣Jiashi County95.3 HS20喀什波斯皮牙孜Kashibosipiyazi麥蓋提縣 Maigaiti County96.7 HS124賽熱克克西力克可洪Sairekekexilikekehong伊寧市Yining County93.3 HS21艾孜Aizi疏附縣Shufu County95.3 HS125賽紅 Saihong伽師縣Jiashi County92.0 HS22伯克札德Bokezade鄯善縣 ShanshanCounty94.7 HS126密極甘紅肉 Mijiganhongrou吐魯番Turpan County96.7 HS23巴吾喜克-1Bawuxike-1吐魯番Turpan County94.0 HS127黑眉毛密極甘Heimeimaomijig吐魯番Turpan County96.7 HS24巴吾喜克-2Bawuxike-2吐魯番Turpan County96.7 HS128黃花皮白肉密極甘Huanghuapibairoumijigan吐魯番Turpan County94.7 HS25來末子都肉克 Laimozdurouke疏附縣 Shufu County94.7 HS129恰爾可口奇Qierkekouqi且末縣Qiemo County98.7 HS26卡賽其里甘 Kasaiqiligan吐魯番Turpan County94.0 HS130皮極甘 Pijigan和田市Hetian County93.3 HS

續表 4 甜瓜資源抗病鑒定結果
Table 4 Identification of disease resistance of melon resources

編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性Resis-tance編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性 Resis-tance27阿克可洪Akekehong尉犁Yuli County94.7 HS131烏熱可洪 Wurekehong麥蓋提縣Maigaiti County92.0 HS28白皮可口奇-1 Baipikekouqi-1鄯善縣 ShanshanCounty92.7 HS132吾乃爾 Wunaier南疆地區Nanjiangdiqu96.7 HS29白皮可口奇-2 Baipikekouqi-2伽師縣Jiashi County93.3 HS133恰爾密極甘Qiaermijigan吐魯番市Turpan98.0 HS30勝金白瓜Shengjinbaigua鄯善縣 ShanshanCounty99.3 HS134皇后 Huanghou鄯善縣Shanshan County97.3 HS31白皮脆Baipicui烏魯木齊Urumqi County98.7 HS135芙蓉 Furong鄯善縣Shanshan County32.0 R32連木沁白瓜 Lianmuqinbaigua鄯善縣 ShanshanCounty94.7 HS136郁金 Yujin鄯善縣Shanshan County50.7 S33阿克蘇甜瓜 Akesutiangua阿克蘇市Akesu County94.0 HS137含笑 Hanxiao鄯善縣Shanshan County102.7 HS34洋海白瓜 Yanghaibaigua鄯善縣 ShanshanCounty96.7 HS138黃密脆 Huangmicui烏魯木齊Urumqi County98.0 HS35八一香梨Bayixiangli庫爾勒市Kuerle County94.0 HS139庫達可口其 Kudakekouqi庫爾勒市Kuerle County99.3 HS36綠棒子(紅肉)Lvbangzi吐魯番Turpan County93.3 HS140T111鄭州Zhengzhou54.0 S37花皮金棒子Huapijinbangzi吐魯番Turpan County92.0 HS141T112鄭州Zhengzhou31.3 R38金棒子Jinbangzi吐魯番Turpan County91.3 HS142T113鄭州Zhengzhou52.7 S39阿合甫提 Ahefuti麥蓋提縣 Maigaiti County95.3 HS143T114鄭州Zhengzhou28.7 R40奎克脫拉Kuiketuola伽師縣Jiashi County98.0 HS144T115鄭州Zhengzhou17.3 HR41賽熱克脫拉(綠肉) Sareketuola green且末縣Qiemo County94.0 HS145T116鄭州Zhengzhou28.0 R42賽熱克脫拉(白肉) Sareketuola red且末縣Qiemo County96.7 HS146MR-1USA0.0IM43卡拉可口奇 Kalakekouqi和田市Hetian County97.3 HS147PI414723USA6.7HR44青皮可口奇 Qingpikekouqi阿克蘇市Akesu County96.0 HS148PI124112India28.7 R45粗皮可口奇 Cupikekouqi阿克蘇市Akesu County94.0 HS149PI 164815India56.7 S46孢孜可口奇 Baozikekouqi麥蓋提縣 Maigaiti County96.7 HS150PI 164820India68.7 MS47麻皮瓜(1)Mapigua 1疏附縣Shufu County93.3 HS151PI 164821India70.7 MS48麻皮瓜(2)Mapigua 2麥蓋提縣Maigaiti County95.3 HS152PI 164825India56.0 S49麻皮瓜(3)Mapigua 3和田市Hetian County94.0 HS153PI 164826India58.0 S50酥心黃Suxinhuang鄯善縣ShanshanCounty96.0 HS154PI 164852India88.0 HS51鐵皮Tiepi疏勒縣Shule County58.0 S155PI 164208India55.3 S52黃皮脆Huangpicui莎車縣Shache County96.7 HS156PI 164855India95.3 HS

續表 4 甜瓜資源抗病鑒定結果
Table 4 Identification of disease resistance of melon resources

編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性Resis-tance編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性 Resis-tance53一包糖Yibaotang鄯善縣ShanshanCounty94.0 HS157PI 164856India68.7 MS54伊里拉Yilila皮山縣Pishan County94.7 HS158PI 164974Turkey57.3 S55賽熱克麥蓋 Sairekemaigai南疆地區Nanjiangdiqu98.7 HS159PI 164975Turkey56.7 S56炮彈瓜Paodangua哈密市Hami County95.3 HS160PI 164976Turkey98.7 HS57香梨黃Xianglihuang吐魯番Turpan County100.0 HS161PI 165508India100.0 HS58網紋香Wangwenxiang五家渠Wujiaqu County78.7 MS162PI 165513India100.0 HS59黃金龍Huangjinlong吐魯番Turpan County76.0 MS163PI 165514India98.0 HS60瑪木提卡孜Mamutikazi麥蓋提縣Maigaiti County37.3 R164PI 165515India97.3 HS61伯克脫拉Boketuola且末縣Qiemo County96.7 HS165PI 165516India58.7 S62阿克可口奇Akekekouqi 南疆地區Nanjiangdiqu94.0 HS166PI 165525India67.3 MS63花皮可口奇Huapikekouqi鄯善縣ShanshanCounty96.7 HS167PI 166125India56.0 S64賽熱克可口奇Sairekekekouqi和田市Hetian County97.3 HS168PI 166190India96.0 HS65且末加格達 Qiemojiageda且末縣Qiemo County95.3 HS169PI 401694Spain17.3 HR66阿克吐木休克Aketumuxiuke麥蓋提縣Maigaiti County92.0 HS170PI 165025Turkey54.0 S67阿克瓦他拉克Akewatalake麥蓋提縣Maigaiti County90.7 HS171PI 165022Turkey95.3 HS68賽熱克吐木休克Saireketumuxiuke麥蓋提縣Maigaiti County94.7 HS172PI 164637India15.3 HR69科日夏帕阿克其Kerixiapakeqi麥蓋提縣Maigaiti County100.0 HS173PI 164990Turkey94.7 HS70柳拉爾Liulaer麥蓋提縣Maigaiti County94.0 HS174PI 165450Mexico55.3 S71卡拉可洪 Kalakehong庫爾勒市Kuerle County96.0 HS175PI 165452Mexico93.3 HS72蘇克阿克那瓦提Sukeakenawati麥蓋提縣Maigaiti County94.0 HS176PI 167221Turkey92.7 HS73集孜阿克那瓦提Jiziakenawati麥蓋提縣Maigaiti County96.0 HS177PI 169301Turkey54.7 S74阿克恰潘 Akeqiapan且末縣Qiemo County96.7 HS178PI 169302Turkey85.3 HS75紅肉阿克拉瓦提Hongrouakelawati且末Qiemo County92.7 HS179PI 169303Turkey64.7 MS76米籽瓜 Mizigua吐魯番Turpan County58.7 S180PI 169305Turkey98.7 HS77紅心脆 Honxincui吐魯番Turpan County55.3 S181PI 166966Turkey82.7 HS78奎克集孜 Kuikejizi庫爾勒市Kuerle County99.3 HS182PI 167058Turkey89.3 HS

續表 4 甜瓜資源抗病鑒定結果
Table 4 Identification of disease resistance of melon resources

編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性Resis-tance編號Code品種名Landrace原 產 地Origin病情指數Disease Indices抗病性 Resis-tance79賽力克集孜 Salikejizi庫爾勒市Kuerle County98.7 HS183PI 167057Turkey87.3 HS80俄羅斯可洪 Russiakehong伊犁市Yili County53.3 S184PI 167044Turkey86.7 HS81卡爾孕西(1) Kaergaxi 1南疆地區Nanjiangdiqu96.7 HS185PI 167032Turkey66.0 MS82卡爾孕西(2) Kaergaxi 2南疆地區Nanjiangdiqu93.3 HS186PI 169312Turkey67.3 MS83卡爾孕西(3) Kaergaxi 3南疆地區Nanjiangdiqu97.3 HS187PI 169313Turkey54.0 S84歪把子密極甘 Waibazimijigan鄯善縣ShanshanCounty94.7 HS188PI 169314Turkey53.3 S85亞孜勒克卡其勒克Yazilekekaqileke疏附縣Shufu County92.7 HS189PI 169317Turkey96.0 HS86恰爾可洪(綠肉) Qierkehong尉犁縣Yuli County94.0 HS190PI 169306Turkey100.0 HS87恰爾可洪(紅肉) Qierkehong岳普湖Yuepuhu County95.3 HS191PI 169307Turkey99.3 HS88溫宿卡爾孕西Wensukaergaxi阿克蘇市Akesu County90.0 HS192PI 169309Turkey52.7 S89且介可洪 Qiejiekehong于田縣Yutian County94.0 HS193PI 169310Turkey50.7 S90劈山 Pishan伽師縣Jiashi County50.7 S194PI 169311Turkey98.7 HS91伯謝克辛 Baixiekexin伽師縣Jiashi County97.3 HS195PI 169330Turkey98.0 HS92白蘭瓜 Bailangua美國 USA48.7 S196PI 169329Turkey51.3 S93皮山奎瑞克 Pishankuiruike皮山縣Pishan County92.7 HS197PI 169325Turkey94.0 HS94"21"夏甜瓜21 xiatiangua阿克蘇市Akesu County31.3 R198PI 169320Turkey95.3 HS95阿克日下克 Akerixiake疏附縣Shufu County96.7 HS199PI 432338Cyprus24.0 R96賽力克卡什卡爾拉達克Sailikekashikaer ladake麥蓋提縣Maigaiti County94.0 HS200PI 390452Ecuador0.0 IM97花巴登 Huabadeng鄯善縣ShanshanCounty96.0 HS201PI 441987Colombia97.3 HS98小青皮(1) Xiaoqingpi吐魯番Turpan County98.7 HS202PI 436534Senegal96.7 HS99小青皮(2) Xiaoqingpi和田市Hetian County96.0 HS203PI 438628Mexico0.0 IM100奎克拜爾 Kuikebaier伽師縣Jiashi County100.0 HS204PI 439746Cyprus49.3 S101賽力拜爾 Sailibaier伽師縣Jiashi County97.3 HS205PI 442177Mexico0.0 IM102阿合其晚熟Aheqiwanshu和田市Hetian County95.3 HS206PI 439743Iran100.0 HS103賽力克可口其(白肉) Sailikekekouqi和田市Hetian County92.0 HS207PI 438685Mexico0.0 IM104賽力克可口其(紅肉) Sailikekekouqi和田市Hetian County92.7 HS208PI 164723India5.3 HR

3 討 論

種質資源評價是現代化育種中最重要的基礎工作，抗病種質資源的系統評價是選育抗病品種的關鍵，也是進一步深入開展分子標記乃至抗病機理研究的基礎。在人為控制的環境下進行苗期抗病性鑒定，其優點在于溫度、濕度和光照等環境條件容易控制，不受外界其他病害蟲害干擾，并且占用空間較少，試驗周期較短，易于防止病害擴散引起生產田危害，因而，普遍受到從事育種科研工作者的高度重視[16]。

甜瓜霜霉病是受環境條件影響很大的病害，在不同接種濃度、鑒定時期、環境條件下(光、溫度、濕度)，其發病情況可能會出現較大的偏差[17]。病情分級標準對鑒定結果也很重要，目前霜霉病抗病鑒定過程中病情分級標準不統一。甜瓜葉片受到霜霉菌侵染時，葉片會黃萎變色甚至壞死，有的還會形成黑色霉層。壞死斑面積、黃萎變色以及黑色霉層的面積都可以作為評估霜霉病病情的癥狀，有些學者只利用其中一種病癥[18-21]，也有些學者結合2種或2種以上的病癥[22,23]。甜瓜霜霉病抗性鑒定缺乏統一的鑒定體系，在抗性鑒定過程中生理小種、接種方法、接種環境、鑒定時期、病情分級標準和統計分析方法都尚未統一，這也是在甜瓜霜霉病資源抗性鑒定、抗性遺傳研究結果中出現不同觀點的重要原因[25]。因此，建立標準的甜瓜霜霉病鑒定體系，統一標準，最終才能得到準確的鑒定結果，進而有利于抗病機理研究和抗病品種的選育。

通過不同接種方法、接種濃度和接種時期的研究，綜合了病情分析標準，建立了苗期甜瓜霜霉病人工接種鑒定體系，并對208份國內外甜瓜種質資源進行苗期抗霜霉病鑒定。 從鑒定結果可以看出， 有18份資源表現出有對霜霉病的抗性，占供試材料的8.65%；其中，發現5份免疫甜瓜資源，7份高抗資源，6份抗病資源。這些抗病資源有助于進一步深入研究甜瓜抗霜霉病機理，創造新的優質、抗霜霉病的甜瓜自交系，以期為優質、多抗、專用甜瓜新品種選育奠定良好的材料基礎。

4 結 論

建立了苗期甜瓜霜霉病人工接種鑒定體系，并對208份國內外甜瓜種質資源進行苗期抗霜霉病鑒定， 結果18份資源表現出有對霜霉病的抗性，占供試材料的8.65%；其中，發現5份免疫甜瓜資源，7份高抗資源，6份抗病資源。