680例胎兒臍血產前診斷結果分析

周 俊 郭曉輝 周 莉

深圳市人民醫院產科，廣東深圳 518000

染色體數目和結構異常是導致新生兒出生缺陷常見病因，目前尚無特異性的治療方法[1]。目前常用的有創性產前診斷方法有羊膜腔穿刺、絨毛穿刺等，但其具有培養時間長，成功率不高等缺點[2-3]。對于孕周較大的孕婦，臍帶穿刺已經成為一種安全、有效的常用性產前診斷方法[4]。本研究總結了2017 年5 月～2018 年6 月本院行臍帶穿刺術臍血細胞培養以及染色體核型分析的680 例病例，闡述不同指征異常核型異常檢出情況，并比較正常新生兒與異常新生兒肝腎功能指標差異，為臨床臍血穿刺產前診斷提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年5 月～2018 年6 月本院產科進行產前檢查或遺傳咨詢孕婦680 例，年齡21 ～45歲，平均（28.6±3.5）歲；孕周17 ～39 周，平均（31.74±2.85）周；產前診斷指征為高齡36 例，超聲診斷胎兒畸形399 例，唐氏篩查高危88 例，不良孕產史36 例，羊水過多或過少83 例，夫妻雙方地貧26 例，其他12 例。680 例具有不同診斷指征的高危孕婦中共娩出新生兒579 例，其中正常新生兒230 例，納入正常新生兒組；異常新生兒349 例，包括早產109 例，過期新生兒85 例，合并各類新生兒疾病155 例，納入異常新生兒組。正常新生兒組包括男嬰112 例，女嬰118 例。異常新生兒組包括男嬰175 例，女嬰174 例。兩組新生兒性別比較，差異無統計學意義（P ＞0.05）。

1.2 方法

標本采集：術前常規行B 超檢查，了解胎兒發育情況、胎心、胎盤和羊水等基本情況，臍帶定位，選擇穿刺點和角度，固定支架，在超聲引導下行臍帶管穿刺術，取臍血4mL，置于肝素鈉抗凝的一次性取血管中送實驗室培養；（2）細胞培養與染色體核型分析：將2mL 臍血接種于1640 培養基中37℃恒溫培養箱中培養68h，加10μg/mL 的秋水仙素90 ～100μL 繼續培養1.5h，常規收獲刺片，胰酶消化G 顯帶，鏡下觀察每例均經分析計數20 ～ 30 個中期分裂相，配對分析5 個核型，如發現嵌合體則加大計數至50 ～100 個核型。（3）將抗凝處理后的臍血2mL 于高速冷凍離心機常溫下進行離心，轉速為3000r/min，離心10min，置于-20℃低溫保存，通過放射免疫法測定β2-MG 含量，常規血生化法測定尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、總膽紅素（TBIL）水平。

1.3 統計學方法

采用SPSS23.0 統計學軟件進行數據分析，計數資料以（表示，兩組肝腎功能指標比較采用t 檢驗，核型異常檢出率比較采用χ2檢驗，采用Logistic多因素回歸分析臍血功能指標與新生兒預后之間的關系，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同指征異常核型異常檢出情況

680 例臍血染色體核型中，101 例核型異常，異常率為14.85%。高齡產婦36 例，超聲診斷胎兒畸形399 例，唐氏篩查高危88 例，不良孕產史36 例，羊水或絨毛染色體異常63 例，夫妻雙方地貧36 例，其他22 例，檢出率分別為11.11%、16.79%、5.68%、8.33%、31.74%、5.56%、0.00%，羊水或絨毛染色體異常核型異常檢出率高于其他指征，各類指征核型異常檢出率差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表1。

表1 不同指征異常核型異常檢出情況

2.2 臍血染色體異常核型的類型及相應指征分布情況

101 例核型異常中，三體綜合癥共33 例，其中21-三體17 例，18-三體4 例，13-三體12 例，占總核型異常比例分別為16.83%、3.96%、11.88%；性染色體異常10 例，占總核型異常比例為9.90%；嵌合體22 例，占總核型異常比例為21.78%；倒位11 例，占總核型異常比例為10.89%；其他21 例，占總核型異常比例為20.79%。見表2。

2.3 正常新生兒與異常新生兒臍血肝腎功能指標比較

680 例具有不同診斷指征的高危孕婦中共娩出新生兒579 例，異常新生兒組肝腎功能指標β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 含量均高于正常新生兒組，差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表3。

表2 臍血染色體異常核型的類型及相應指征分布情況

表3 正常新生兒與異常新生兒臍血肝腎功能指標比較（）

表3 正常新生兒與異常新生兒臍血肝腎功能指標比較（）

組別 n β2-MG（μg/mL） BUN（mmol/L） Cr（μmol/L） ALT（U/L） AST（U/L） TBIL（μmol/L）正常新生兒組 230 2.35±0.56 4.12±1.23 53.98±17.85 8.12±3.71 5.12±1.07 30.35±8.47異常新生兒組 349 3.28±1.08 4.39±1.27 70.79±16.83 9.87±4.85 5.98±1.41 37.65±9.12 t 12.034 2.535 11.479 4.648 7.845 9.693 P 0.000 0.012 0.000 0.000 0.000 0.000

表4 臍血肝腎功能指標與新生兒預后Logistic多因素回歸分析

2.4 臍血肝腎功能指標與新生兒預后Logistic回歸分析

臍血肝腎功能指標β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 含量是影響新生兒預后的獨立危險因素。見表4。

3 討論

完善的產前診斷措施，為優生優育提供了有力保障，在孕中晚期，隨著胎兒的生長發育以及超聲影像技術的應用，越來越多的胎兒畸形被發現，當孕周＞25 周時，羊水細胞逐漸老化，胎脂增多，培養困難，培養周期較長，此時行臍帶血核型檢查對胎兒評估具有重要作用[5-6]。

臍血的產前診斷應用范圍廣泛，包括胎兒有無遺傳性疾病、宮內感染以及血液系統疾病，因此，臍靜脈穿刺和染色體核型分析是孕中晚期重要的產前診斷技術和方法[7]。同時，臍血染色體核型分析亦可作為病因診斷的有效手段，產前臍血進行細胞遺傳學及肝腎代謝功能診斷，可為胎兒評估以及胎兒預后情況提供重要參考價值[8]。

本研究中680 例臍血染色體核型中，101 例核型異常，異常率為14.85%，高于李素萍等[9]研究結果。本文中高齡孕產婦染色體異常檢出率達到11.11%，隨著年齡的增長，孕產婦卵細胞染色體紡錘體老化，導致染色體不分離的頻率較高，從而增加了染色體三體發生風險，核型異常檢出率較高。本研究中羊水或絨毛染色體異常受檢人數為63 例，異常檢出率為31.74%，低于林秀華等[10]研究結果，絨毛及羊水細胞隨著孕周的增長逐漸老化，產前診斷時間受到限制，同時羊水細胞培養易出現假性嵌合體，造成誤診，臍血診斷不僅為孕中晚期胎兒染色體產前診斷提供了技術支持，還可進一步診斷核實羊水細胞診斷結果，彌補了絨毛和羊水檢測的缺陷。本研究中B 超異常受檢例數為399 例，占總例數的一半以上，為進行臍血檢查的主要指征，胎兒畸形與染色體關系密切，此組共檢出67 例異常，檢出率為16.79%，占異常核型的66.33%，與湯麗霞等[11]研究結果相近，因此當B 超檢測表現出一些非特異性的超聲征象時，如腦室輕度擴張、胎兒水腫以及心臟強光點等，應進行產前診斷，以排除染色體異常。唐氏篩查高危組受檢例數88 例，占總例數的12.94%，5 例核型異常，檢出率為5.68%，由此臍血染色體可用于排查各項高危指征產婦胎兒染色體異常情況，盧麗華等[12]研究結果支持本結論。

染色體數目異常尤其是三體綜合癥，是嚴重出生缺陷的主要病因，表現為嚴重的生長發育障礙、智力低下、多發畸形等[13]。少部分21-三體綜合癥B 超顯示無明顯結構畸形，只有通過核型診斷進行確診[14]。本研究中。本文中染色體數目異常共43例，其中三體綜合癥33 例，性染色體異常10 例，染色體三體為妊娠中晚期的主要異常核型，染色體數目和結構的異常常涉及到多個基因數量的增減，因此常表現為胎兒器官結構異常，且大部分三體胎兒為多發畸形，僅小部分21 三體表現為微小的器官結構異常。染色體倒位，普遍認為基因無缺失，一般臨床表現正常，屬于遺傳多態，少數認為有基因的位置效應，可增加流產率[15]。本文中染色體倒位共11 例，其中9 號倒位5 例，6 號倒位2 例，3 號倒位3 例，8 號倒位1 例。

本研究中異常新生兒組臍血肝腎功能指標檢測β2-MG、BUN、Cr、ALT、AST、TBIL 指標含量均高于正常新生兒組，且通過Logistic 多因素回歸分析結果顯示各項肝腎功能指標聯合檢測是影響斷新生兒預后的因素，臍動脈血為胎兒體內代謝后的血液，可反映胎兒體內代謝狀態，高危因素對胎兒腎小球濾過功能造成不同程度的影響和損害，造成電解質紊亂，腎血流量減少，影響腎小管的吸收，因此產前臍血肝腎功能指標檢測，可為胎兒預后狀態提供參考價值，提前做好相應預防措施，有利于保障產婦及胎兒生命安全。

綜上所述，妊娠中晚期臍血穿刺產前診斷可有效減少先天缺陷兒的出生，落實優生政策，為胎兒預后情況提供參考價值，有利于保障產婦與胎兒生命安全。