TIP30 與VEGF 在肺癌中的臨床表達意義*

熊云剛 趙露 姜森 成克倫

（貴州航天醫(yī)院病理科 遵義 563000）

肺癌是全球男性癌癥中引起死亡的主要疾病類型。根據(jù)我國2015 年的監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示，肺癌發(fā)病率、死亡率分別達到 35.23/10 萬、27.93/10 萬，5 年生存率僅為16.10%[1]。提高患者5 年生存率關(guān)鍵在于肺癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷。傳統(tǒng)肺癌血清標志物在監(jiān)測療效及評估預后方面具有較大幫助，但對早期肺癌及各期肺癌的總體診斷價值有限。TIP30 基因又稱CC3、TAT 結(jié)合蛋白 30[2]。TIP30 參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展，甚至已初步探索了其影響腫瘤的機制[3～4]。TIP30 成為肺癌的預后指標可以判斷患者的預后，指導臨床診療工作，有利于減輕患者的負擔，因此，研究TIP30 在肺癌中的表達具有臨床現(xiàn)實意義。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是一種高度特異性的促血管內(nèi)皮細胞生長因子，具有促進細胞外基質(zhì)變性、增加血管內(nèi)皮細胞通透性、促進血管內(nèi)皮細胞遷移、增殖和血管形成等各方面作用，VEGF 參與了許多血管生成依賴性疾病的發(fā)生發(fā)展，包括某些炎癥疾病、糖尿病視網(wǎng)膜病變、癌癥等[5～6]。本研究選取經(jīng)病理科確診的90 例肺癌組織與20 例正常肺組織進行研究，探討肺癌組織和正常肺組織中VEGF 蛋白的表達和TIP30 蛋白表達的差異性。現(xiàn)報道如下：

1 資料和方法

1.1 一般資料 本研究選取醫(yī)院病理科2019 年6月至2021 年6 月確診的90 例肺癌組織作為研究對象，設(shè)為肺癌組，選取不同的肺癌組織標本（其中鱗狀細胞癌 30 例、腺癌 30 例、小細胞癌 30 例），并收集正常的肺組織作為對照組（20 例）。肺癌組男54例，女 36 例；年齡 37～79 歲，平均年齡（45.28±2.21）歲；TNM 分期：Ⅰ期 12 例，Ⅱ期 10 例，Ⅲ期 53 例，Ⅳ期15 例；分化程度：低分化26 例，中分化33 例，高分化31 例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移55 例，無轉(zhuǎn)移35 例。對照組男12 例，女8 例；年齡35～78 歲，平均年齡（44.68±1.64）歲。兩組患者一般資料（性別、年齡）對比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審批同意（倫審〈2023〉1-004 號）。

1.2 納入標準與排除標準 （1）納入標準：肺癌組患者均明確診斷為肺癌，TNM 分期為ⅢB～Ⅳ期，有1 個及以上的可測量病灶；肺癌組患者預計生存期≥3 個月，未接受過手術(shù)、化放療、靶向等治療；所有研究對象年齡均≥20 歲；所有患者依從性良好，自愿配合本研究；所有患者均知情同意，且簽署知情同意書。（2）排除標準：表皮生長因子受體（EGFR）突變陰性及PD-1 表達陰性；已有全身衰竭癥狀，或合并其他部分原發(fā)惡性腫瘤；患有心、腎、肝、造血系統(tǒng)等嚴重的原發(fā)性臟器疾病；有精神、心理疾病史，或具有意識障礙性疾病，不能有效配合本研究、身體運動功能障礙；自愿退出本研究。

1.3 研究方法 收集醫(yī)院經(jīng)病理科確診的肺癌患者病理組織標本與對照組正常肺組織標本，常規(guī)取材脫水后石蠟切片，應(yīng)用免疫組化SP 法[7]檢測對照組和肺癌組中TIP30 蛋白的表達并比較。肺癌患者病理標本與對照組正常肺組織標本均常規(guī)取材脫水，石蠟切片，應(yīng)用免疫組化SP 法進行檢測VEGF蛋白的表達。

1.4 診斷標準 TIP30 和VEGF 染色結(jié)果判定，以在細胞質(zhì)和細胞膜內(nèi)發(fā)現(xiàn)棕黃色顆粒作為陽性信號[8]。顯色深淺計分判斷標準如下：細胞無顯色計為0 分；淺黃色計為1 分，棕黃色計為2 分，棕褐色計為3 分。顯色細胞比例計分的標準如下：0 分標準為顯色細胞比例小于 10%；1 分標準為顯色比例為10%～30%；2 分標準為顯色比例為 31%～60%；3 分標準為顯色比例為60%以上。每例積分為顯色深淺的積分與顯色比例的積分之和，積分＞2 表示表達陽性，＜2 則表示表達陰性。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計學軟件分析處理數(shù)據(jù)。正態(tài)分布的計量資料以（）表示，采用獨立樣本t檢驗，非正態(tài)分布的計量資料以M（QR）表示，采用非參數(shù)檢驗；計數(shù)資料以%表示，組間比較用χ2或Fisher 精確檢驗，檢驗水準為α=0.05；等級資料比較采用秩和檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組TIP30、VEGF 蛋白表達水平比較 肺癌組TIP30 蛋白表達水平顯著低于對照組，VEGF 蛋白表達水平顯著高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組TIP30、VEGF 蛋白表達水平比較（分，）

表1 兩組TIP30、VEGF 蛋白表達水平比較（分，）

組別 n TIP30 VEGF肺癌組對照組90 20 t P 2.25±0.05 5.43±0.32 27.178 0.000 7.86±1.12 1.42±0.23 50.010 0.000

2.2 兩組TIP30、VEGF 陽性率比較 與對照組對比，TIP30 在肺癌組中陽性率更低，陰性率更高（P＜0.05）；VEGF 在肺癌組中陽性率更高，陰性率更低（P＜0.05）。見表 2。

表2 兩組TIP30、VEGF 陽性率比較[例（%）]

2.3 不同病理類型肺癌組中TIP30 陰性、VEGF 陽性表達率比較 在不同肺癌類型中TIP30 的陰性表達率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；在不同肺癌類型中VEGF 陽性表達率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表 3。

表3 不同病理類型肺癌組中TIP30 陰性、VEGF 陽性表達率比較[例（%）]

2.4 不同病理特征TIP30 陰性表達率、VEGF 陽性表達率比較 TIP30 的陰性表達與患者年齡、性別、是否抽煙、腫瘤直徑無明顯相關(guān)性，與患者病理類型、TNM 分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有明顯相關(guān)性，且在小細胞癌、TNM 分期為Ⅲ～Ⅳ、中高分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的陰性表達率顯著高于鱗狀細胞癌和腺癌、TNM 分期為Ⅰ～Ⅱ、低分化、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者（P＜0.05）；VEGF 的陽性表達與患者年齡、性別、是否抽煙、病理類型、TNM 分期無明顯相關(guān)性，與腫瘤直徑、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有明顯相關(guān)性，且VEGF 腫瘤直徑＞3 cm、中高分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者中陽性表達率高于腫瘤直徑≤3 cm、低分化、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（P＜0.05）。見表 4。

表4 不同病理特征TIP30 陰性表達率、VEGF陽性表達率比較

2.5 TIP30 陰性表達率、VEGF 陽性表達率的影響因素分析 以病理類型（鱗狀細胞癌和腺癌=0，小細胞癌 =1）、TNM 分期（Ⅰ～Ⅱ期 =0，Ⅲ～Ⅳ=1）、分化程度（低分化=0，中高分化=1）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（無=0，有 =1）為自變量，TIP30 陰性表達為因變量，多因素Logistic 回歸模型結(jié)果表明，病理類型、TNM分期、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為TIP30 陰性表達的危險因素。見表5。以腫瘤直徑（≤3 cm=0，＞3 cm=1）、分化程度（低分化 =0，中高分化 =1）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（無=0，有=1）為自變量，VEGF 陽性表達為因變量，多因素Logistic 回歸模型結(jié)果表明，腫瘤直徑、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為VEGF 陽性表達的危險因素。見表6。

表5 TIP30 陰性表達率的多因素分析

表6 VEGF 陽性表達率的多因素分析

3 討論

肺癌是臨床上較為常見的惡性腫瘤之一，具有進展快、惡性程度高、治愈率低以及預后差的特點[9～10]。通常情況下，肺癌早期無明顯癥狀，待到臨床確診時，多數(shù)已經(jīng)發(fā)展至晚期，對于患者生命健康產(chǎn)生巨大威脅。肺癌晚期的治療以縮小腫瘤體積、抑制腫瘤進展、減輕患者痛苦、改善臨床癥狀為主要原則，以此提升患者的生存質(zhì)量。化療是治療肺癌的常用方法，但治療總有效率僅為20%～45%，且預后效果欠佳。伴隨生物學研究的不斷發(fā)展，臨床逐漸將靶向精準治療用于晚期肺癌患者的治療之中，已取得較為理想的臨床效果，應(yīng)用血清標志物實現(xiàn)肺癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷對于肺癌的治療意義重大。

TIP30 基因又稱 CC3、TAT 結(jié)合蛋白 30。TIP30蛋白可通過抑制腫瘤細胞的生長，促進細胞凋亡。細胞凋亡是一種生理機制，在組織細胞發(fā)育、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用。而當細胞出現(xiàn)過度增殖或凋亡異常時，會引發(fā)癌癥等疾病。而TIP30 蛋白主要表達于細胞質(zhì)內(nèi)，可調(diào)節(jié)細胞核內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄。TIP30 蛋白指標可發(fā)揮促進凋亡作用[11]。TIP30 蛋白在肺癌組織中陽性表達低，TIP30 蛋白可抑制蛋白輸入核內(nèi)，誘發(fā)細胞凋亡，從而發(fā)揮抑癌作用。TIP30在人體心臟、肝部、肺部、大腦等組織中廣泛存在，而在肺癌、肝癌腫瘤患者體內(nèi)存在缺失，相較于正常人體內(nèi)，癌癥患者體內(nèi)TIP30 陽性表達降低[12]。VEGF是一種血管內(nèi)皮生長因子，其可促進血管新生，增加血管壁通透性。VEGF 是目前已知的最有效直接作用血管生成蛋白，是一種可擴散的內(nèi)皮細胞特異性有絲分裂原和血管生成因子，還能增加血管通透性，腫瘤的增殖、侵襲過程對其具有依賴[13～14]。在許多惡性腫瘤中，高VEGF 表達與不良預后有關(guān)[15～16]。本研究探討肺癌組織中和正常肺組織中VEGF 蛋白表達和TIP30 蛋白表達的差異性，并分析了兩者的陽性表達與肺癌患者病理特征的相關(guān)性。

本研究結(jié)果表明，肺癌組TIP30 蛋白表達水平顯著低于對照組，VEGF 蛋白表達水平顯著高于對照組（P＜0.05）；與對照組對比，TIP30 在肺癌組中陽性率更低，陰性率更高（P＜0.05）；VEGF 在肺癌組中陽性率更高，陰性率更低（P＜0.05）。這表明在肺癌腫瘤組織中，TIP30 呈低表達，VEGF 呈高表達，與在其他腫瘤中TIP30、VEGF 的表達結(jié)果相一致。

同時，本研究比較了不同病理特征患者的TIP30 陰性表達率、VEGF 陽性表達率，并進行了多因素Logistic 回歸分析。本研究結(jié)果表明，VEGF 的陽性表達與患者年齡、性別、是否抽煙、病理類型、TNM 分期無明顯相關(guān)性，與腫瘤直徑、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有明顯相關(guān)性，且VEGF 在腫瘤直徑＞3 cm、中高分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者中陽性表達率高于腫瘤直徑≤3 cm、低分化、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（P＜0.05）；TIP30 的陰性表達與患者年齡、性別、是否抽煙、腫瘤直徑無明顯相關(guān)性，與患者病理類型、TNM 分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有明顯相關(guān)性，且在小細胞癌、TNM 分期為Ⅲ～Ⅳ、中高分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的陰性表達率顯著高于鱗狀細胞癌和腺癌、TNM 分期為Ⅰ～Ⅱ、低分化、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌患者（P＜0.05）；病理類型、TNM分期、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為TIP30 陰性表達的危險因素，腫瘤直徑、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為VEGF 陽性表達的危險因素。這提示TIP30 和VEGF 的表達分別與患者的病理類型、腫瘤直徑、TNM 分期、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，上述兩指標可為今后肺癌的診斷提供輔助價值。本研究不足之處在于，由于人力資源限制，本研究未具體比較分析不同類型肺癌患者中TIP30 和VEGF 的表達情況，且研究未進行深入的機制探討，在后續(xù)的研究中，將彌補這些不足，進行深入的探討分析。

綜上所述，肺癌患者中TIP30 多呈陰性表達，VEGF 多呈陽性表達，分別與患者的病理類型、腫瘤直徑、TNM 分期、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理特征存在相關(guān)性，且上述因素分別為TIP30 陰性表達、VEGF 陽性表達的危險因素。