甘油磷脂酰膽堿含量測(cè)定方法的改進(jìn)

黃祥元　唐偉　蔣艾青

【摘 要】改進(jìn)甘油磷脂酰膽堿原料中甘油磷脂酰膽堿含量測(cè)定方法，將3%的醋酸汞溶液改為冰醋酸。用高氯酸滴定液（0.1mol/L）進(jìn)行滴定，用電位法指示滴定終點(diǎn)。甘油磷脂酰膽堿在0.16g～0.24g范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系（r=0.9999），平均回收率為99.51%（n=6，RSD=0.16%）。該方法操作簡(jiǎn)單、專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確可靠，可用于甘油磷脂酰膽堿原料的含量測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】甘油磷脂酰膽堿;電位滴定法;含量測(cè)定

中圖分類號(hào)： TQ646;O655.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 2095-2457（2019）17-0165-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.17.078

Improvement of the Method for the Determination of Glycerophosphatidylcholine

HUANG Xiang-yuan TANG Wei JIANG Ai-qing

（Yongzhou Vocational and Technical College， Yongzhou Hunan 425000， China）

【Abstract】Animproved method for the determination of glycerophosphatidylcholine in glycerol phosphatidylcholine raw materials was developed. The 3% mercury acetate solution was replaced by glacial acetic acid. The titration was carried out with perchloric acid titration solution （0.1mol/L） and the titration end point was indicated by potentiometry. Glycerophosphatidylcholine showed a good linear relationship in the range of 0.16g-0.24g （r=0.9999）， with an average recovery of 99.51% （n=6， RSD=0.16%）. The method is simple， specific， accurate and reliable， and can be used for the determination of glycerophosphatidylcholine.

【Key words】Glycerol phosphatidylcholine; Potentiometric titration; Content determination

甘油磷脂酰膽堿（Glyceryl phosphoryl choline，GPC）為體內(nèi)天然存在的水溶性磷脂代謝產(chǎn)物，它主要由膽堿、甘油和磷酸構(gòu)成，其分子式為C8H20NO6P。根據(jù)報(bào)道，甘油磷脂酰膽堿是乙酰膽堿和磷脂酰膽堿的前體，并且在治療帕金森疾病、腦部損傷、動(dòng)脈硬化、類風(fēng)濕以及老年記憶力衰退方面具有重要的醫(yī)藥價(jià)值。為了革除汞鹽的使用，本試驗(yàn)對(duì)甘油磷脂酰膽堿含量測(cè)定方法進(jìn)行了改進(jìn)，僅將樣品制備中3%的醋酸汞溶液改為冰醋酸，試驗(yàn)結(jié)果表明，改進(jìn)的方法操作簡(jiǎn)單、專屬性更強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器：785DMP電位滴定儀，玻璃-飽和甘汞電極、AG135電子天平。

試劑：高氯酸、冰醋酸、醋酸酐，均為分析純;甘油磷脂酰膽堿原料3批由廠家提供（批號(hào)為20170801、20160802、20160803）。

1.2 高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

按GB/T 601-2002，配制0.1mol/L高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3 供試品溶液的制備與滴定方法

供試品溶液的制備：取本品約0.2g，精密稱定，置100ml燒杯中，加冰醋酸10ml與醋酸酐40ml，攪拌使溶解，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于25.72mg的甘油磷脂酰膽堿。

樣品滴定方法[4]：取本品約0.2g，精密稱定，置100ml燒杯中，加冰醋酸10ml與醋酸酐40ml，攪拌使溶解。搭建試驗(yàn)裝置，固定好酸式滴定管，將混合均勻的樣品溶液放置在磁力攪拌器上，放入磁力攪拌器并插入玻璃復(fù)合電極，開啟攪拌器開關(guān)，待pH計(jì)讀數(shù)穩(wěn)定后，開始滴定。每加入一定量滴定液需待電位穩(wěn)定后方可記錄電位數(shù)值。為保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，每次滴定的高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積不宜過大。本試驗(yàn)中，開始先以每次1mL的速度加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，當(dāng)接近滴定終點(diǎn)時(shí)，減少為每次0.1mL。記錄每次滴加高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液后滴定管的讀數(shù)V（mL）及測(cè)量的電位值E（mV）。

1.4 空白試驗(yàn)

精密量取冰醋酸10ml與醋酸酐40ml，置100ml燒杯中，將其混合后，采用1.3中樣品滴定方法滴定，記錄試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 空白試驗(yàn)

精密量取冰醋酸10ml與醋酸酐40ml，置100ml燒杯中，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，結(jié)果空白消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）的體積為0.02ml，結(jié)果表明空白試驗(yàn)無干擾。

2.2 線性關(guān)系考察

精密稱取甘油磷脂酰膽堿原料（批號(hào)20170801）0.16g、0.18g、0.20g、0.22g、0.24g，照“1.3”項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，用電位滴定法分別測(cè)定其含量，以取樣量（g）為橫坐標(biāo)，消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）體積數(shù)（ml）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

通過表數(shù)據(jù)表明：甘油磷脂酰膽堿在0.16g～0.24g范圍內(nèi)，其取樣量與消耗滴定液體積數(shù)成良好的線性關(guān)系。

2.3 精密度試驗(yàn)

精密稱取甘油磷脂酰膽堿原料（批號(hào)20170801）0.2g，6份，照“1.3”項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，用電位滴定法分別測(cè)定其含量（按干燥品計(jì)算），結(jié)果見表2。

通過上表試驗(yàn)結(jié)果表明：電位滴定法測(cè)定甘油磷脂酰膽堿含量，精密度良好。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密稱取甘油磷脂酰膽堿原料（批號(hào)20170801）0.2g，6份，照“1.3”項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，分別于0h、2h、4h、8h測(cè)定其含量（按干燥品計(jì)算），結(jié)果見表3。

通過上表試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明：供試品溶液在8h內(nèi)含量測(cè)定基本穩(wěn)定，本方法有良好的穩(wěn)定性。

2.5 回收率試驗(yàn)

取已知含量為98.87%的甘油磷脂酰膽堿原料（批號(hào)20170801），精密稱定，6份，分別加入甘油磷脂酰膽堿對(duì)照品，照“1.3”項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，按上述方法測(cè)定其含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表4。

通過上表試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明：本方法回收率良好。

2.6 樣品測(cè)定

精密稱取3批甘油磷脂酰膽堿原料各0.2g，分別置100ml燒杯中，各加冰醋酸10ml與醋酸酐40ml，攪拌使溶解，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，用電位法指示終點(diǎn)，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，測(cè)定結(jié)果見表5。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)只是在原參考文獻(xiàn)試驗(yàn)[4]的基礎(chǔ)上，將3%的醋酸汞溶液改為冰醋酸，結(jié)果與原方法相比，本方法滴定突躍更明顯。參考非水溶液滴定法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄VII B）可知，通常氫氯酸鹽應(yīng)加入醋酸汞試液滴定，而甘油磷脂酰膽堿非氫氯酸鹽，故可直接滴定，有效地革除了汞鹽的使用，大大降低了對(duì)人體的危害及對(duì)環(huán)境的污染，試驗(yàn)證明，該方法重復(fù)性好，穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確度高。

【參考文獻(xiàn)】

[1]劉丹，張康逸，等.非水點(diǎn)位滴定法測(cè)定甘油磷脂酰膽堿[J].中國(guó)油脂.2012，37（3）：82-84.