血清神經元特異性烯醇化酶與老年帕金森病患者認知功能障礙的相關性

李欣 范國鋒 陸健輝 胡金蓮

(佛山市高明區人民醫院，廣東 佛山 528500)

帕金森病(PD)是一種常見運動障礙性疾病，以老年人多見，據報道60歲以上每10萬人中約1 000人患病，70～79歲達到高峰〔1〕。PD的病位主要在黑質，以黑質神經細胞變性、丟失為病理特征，引起典型的運動系統癥狀。PD還可出現非運動系統癥狀，其中并發認知功能障礙率高達80%，約30%的患者最終發展為PD癡呆〔2〕。研究認為PD發病與多種病因引起的多巴胺能神經元的變性、壞死及路易小體病理改變等有關，是一種腦損傷性疾病〔3〕。神經元特異性烯醇化酶(NSE)主要存在于神經組織中，是中樞神經系統腦損傷的特異性、敏感性標志物，可以反映人體腦損傷和神經元受損的嚴重程度，也是評價腦損傷繼發認知功能障礙的有效指標〔4,5〕。目前針對老年PD患者血清NSE水平與其認知功能障礙的相關性研究鮮見報道。本研究檢測PD患者血清中NSE含量，并探討其與PD認知功能障礙的關系。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取2016年1月至2018年7月佛山市高明區人民醫院神經內科門診及住院PD患者55例(PD組)，男33例，女22例；年齡60～75歲，平均(66.76±7.52)歲；受教育年限6.77～18.44年，平均(12.67±2.82)年；體重指數(BMI)20.66～35.59 kg/m2，平均(27.03±3.63)kg/m2；病程11個月至15年，平均(2.94±0.34)年；改良Hoehn-Yohr(H-Y)分級〔6〕:Ⅰ～Ⅳ級，其中早期(H-Y分級Ⅰ～Ⅱ級)30例，中晚期(H-Y分級Ⅲ級及以上)25例；合并輕度認知功能損害33例，無輕度認知功能損害22例。PD診斷根據《PD的診斷》〔6〕擬定，并經2位高年資神經內科醫師診斷。(1)符合PD診斷標準:①運動減少。②至少具備以下一項:姿勢不穩，肌肉僵直，靜止性震顫4～6 Hz。(2)支持診斷PD須具備以下3項及以上:①單側起病；②逐漸進展；③靜止性震顫；④左旋多巴干預后反應良好；⑤左旋多巴導致嚴重異動癥；⑥發病后多為持續性不對稱性受累；⑦左旋多巴療效可持續5年及以上；⑧病程在10年及以上。納入標準:①首次診斷為PD者。②年齡≥60歲，男女均可。③受教育年限超過5年。④入組前未予認知功能障礙相關治療。⑤與患者或患者家屬簽署知情協議。排除標準:①合并腦血管病、阿爾茨海默病等神經系統疾病。②PD癡呆、PD疊加綜合征、肝豆狀核變性或其他神經退行性疾病者。③有藥物濫用或酗酒史者。④精神病者。⑤心、肺、肝、腎及造血系統嚴重功能障礙。另收集同期體檢健康者共50例(健康對照組)，男29例，女21例；60～75歲，平均(67.01±7.89)歲；受教育年限6.93～18.52年，平均(12.75±2.99)年；BMI 20.71～35.41 kg/m2，平均(26.82±3.90)kg/m2。兩組在性別、年齡等方面差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。研究經醫院倫理委員會審批同意。留取PD患者血標本及臨床評估時為新診斷未治療或至少停藥1 w者。

1.2認知功能評價 研究對象行蒙特利爾認知評估量表〔7〕(MoCA)和簡易智精神能量表(MMSE)〔8〕。MoCA包括執行、視空間、命名、注意力、延遲回憶、語言表達、抽象思維、定向力，分值0～30分，<26分為認知障礙；MMSE包括定向力、記憶力、注意力和計算力、回憶能力和語言能力，分值 0～30分，MMSE評分<25為認知障礙。上述認知功能評價均由同1位經過相關培訓的主治醫師在患者情緒平穩下操作。

1.3血清標本采集及指標測定 血清采集:抽取所有研究對象空腹下取靜脈血3 ml左右，室溫靜置約30 min，3 000 r/min離心10 min，提取血清，標記后置于-80℃待統一測定。采取酶聯免疫吸附試驗測定血清NSE、神經生長因子(NGF)、腦源性神經營養因子(BDNF)水平，NSE試劑盒(上海樊克生物科技有限公司，批號FK-F12084)，NGF試劑盒(上海樊克生物科技有限公司，批號FK-F11194)，BDNF試劑盒(上海鈺博生物科技有限公司，批號KT-11531)，操作嚴格按照說明書進行。

1.4統計學處理 采用SPSS19.0軟件進行t檢驗、單因素方差分析、逐步多重線性回歸法、Pearson檢驗。

2 結 果

2.1血清NSE、NGF、BDNF水平比較 PD組血清NSE水平明顯高于健康對照組，NGF、BDNF水平明顯低于健康對照組(P<0.001)。見表1。

表1 血清NSE、NGF、BDNF水平比較

2.2不同H-Y分級血清NSE、NGF、BDNF水平比較 中晚期PD組血清NSE明顯高于早期PD組，NGF、BDNF水平明顯低于早期PD組(P<0.001)。見表2。

表2 不同H-Y分級血清NSE、NGF、BDNF水平比較

2.3有無認知功能損害PD患者血清NSE、NGF、BDNF水平比較 有認知功能損害PD患者血清NSE水平顯著高于無認知功能損害PD患者，血清NGF、BDNF水平顯著低于無認知功能損害PD患者(P<0.001)。見表3。

表3 有無認知功能損害PD患者血清NSE、NGF、BDNF水平比較

2.4逐步回歸法探討PD患者認知功能的影響因素 患者MoCA評分為(23.16±3.27)分，MMSE評分為(26.85±2.39)分。H-Y Ⅰ～Ⅱ級患者MoCA評分(25.45±2.31)分，MMSE評分(27.59±1.94)分，H-Y Ⅲ～Ⅳ級MoCA評分(22.75±2.53)分，MMS評分(25.93±2.04)分。用逐步多重線性回歸法在回歸方程中引入年齡、病程、H-Y分級、受教育年限、血清NSE、NGF、BDNF水平有可能影響認知功能的因素，其中H-Y分級、受教育年限、血清NSE、NGF、BDNF水平與認知功能評分(MoCA評分、MMSE評分)存在顯著相關性被選入方程。其中MoCA評分和MMSE評分與受教育年限、血清NGF、BDNF水平呈正相關，與H-Y分級、NSE呈負相關(P<0.05)，而與年齡、病程水平無顯著相關。標準化偏回歸系數絕對值由大至小的順序為受教育年限、血清BDNF、NGF、NSE水平及H-Y分級。見表4。

表4 PD患者認知功能的影響因素逐步回歸分析

2.5血清NSE水平與NGF、BDNF水平相關性 PD患者血清NSE水平與NGF、BDNF水平均呈負相關(r=-0.509、-0.531，均P<0.001)。

3 討 論

認知功能障礙是PD最常見致殘性非運動癥狀之一，確定與PD認知功能障礙相關生物標志物對癡呆高危人群的早期識別及給予相應臨床干預極為有益。目前大量PD合并認知功能障礙的鑒定標志物已被報道，包含遺傳學、生物化學、神經影像學、神經生理學等，但PD認知功能障礙不管在臨床還是病理學角度均存在異質性，提高PD合并認知功能障礙的靈敏度和特異性需不同生物標志物聯合診斷〔9〕。因此，探討PD認知功能障礙患者的生物學標志物仍是當前臨床面臨的重點課題。PD認知功能障礙可累及不同認知領域，患者表現出不同形式的認知功能障礙〔10,11〕。MoCA和MMSE評分從不同方面評價認知功能障礙，故本研究中同時采用該兩種評分量表評價PD認知功能障礙。

研究表明PD認知功能下降與腦內多巴胺能神經元受損有關，多巴胺能神經元損傷會引起紋狀體多巴胺去神經支配或多巴胺能神經不能執行正常功能，繼發性導致顳葉皮層、丘腦、海馬、中腦等部位神經遞質合成和分泌減少，加重PD認知損害嚴重程度〔12〕。NSE是存在于神經細胞中的糖醇解代謝酶，腦組織損傷時NSE 由細胞釋放入血，引起血中NSE 水平增加，可間接反映神經細胞的損傷程度〔13〕。本研究結果顯示:PD組患者血清NSE水平明顯高于健康對照組，中晚期PD組患者血清NSE明顯高于對照組早期PD組，可能是PD患者腦內神經元受損，大量NSE被釋放至血中所致，提示血清中NSE水平上升與疾病嚴重程度有關。研究表明NSE水平也是臨床判斷腦損傷患者繼發認知功能障礙的有效指標，但NSE與PD認知功能障礙之間的關系仍不清楚〔14,15〕。劉宇明等〔16〕研究顯示認知障礙患者血清NSE水平顯著升高，與MMSE評分呈負相關。本研究中，有認知功能損害PD患者血清NSE水平顯著高于無認知功能損害PD患者，提示NSE水平與PD認知功能障礙的發生密切相關。

BDNF、NGF均為神經營養因子成分，是腦內神經元的發生、發育所依賴的營養物質，對各種原因所致腦損傷有修復作用，兩者缺乏可直接或間接導致認知功能障礙〔17,18〕。劉佳等〔19〕研究證實PD認知功能障礙患者BDNF水平顯著降低，是影響老年PD 患者認知功能障礙的獨立危險因素之一。動物實驗發現通過調控NGF、BDNF及其受體的表達，對PD神經損傷發揮保護作用〔20〕。海馬是BDNF、NGF合成的重要場所，海馬直接參與信息的貯存和回憶、學習記憶功能，海馬中BDNF、NGF缺乏將導致動物學習和記憶功能缺陷，直接影響認知功能〔21〕。本研究提示血清NGF、BDNF水平除了與PD的發病機制有關外，與PD認知功能障礙的發生也聯系密切。

逐步多重線性回歸分析結果表明血清NSE濃度越高及NGF、BDNF濃度較低的PD患者可能合并認知功能障礙。從標準化偏回歸系數絕對值大小來看，受教育年限對認知功能影響最大，再者依次為血清BDNF、NGF、NSE水平、H-Y分級，故血清NSE、NGF、BDNF水平可能是影響PD患者認知功能的重要因素，血清NSE水平可能是臨床早期預測PD認知功能障礙的有效指標。進一步的Pearson檢驗分析發現，PD認知功能障礙患者血清NSE水平與NGF、BDNF水平均呈負相關，但PD合并認知功能障礙患者NSE與NGF、BDNF之間的機制關系目前尚不清楚。

綜上所述，血清高NSE濃度可能為PD認知功能損害的危險因素之一，臨床檢測該指標可能有助于PD合并認知功能障礙的防治。本研究不足在于納入的樣本量偏小，故上述結果仍需要進一步擴大樣本量以驗證。