非小細胞肺癌患者血清鐵蛋白、胸苷激酶1、基質金屬蛋白酶9表達及臨床價值探討

王總飛，劉先本，張瑞祥，劉士磊

(鄭州大學附屬腫瘤醫院胸外科，河南 鄭州 450008)

非小細胞肺癌(NSCLC)在肺癌中占4/5左右，早期癥狀無特異性，臨床確診時多處于中晚期，易侵襲或轉移，患者5年生存率不高[1]。早期診治NSCLC，對提高患者生存率，改善其生存質量具有十分重要的意義。近年來腫瘤標記物在惡性腫瘤診斷、治療、預后評估中應用較多[2，3]，血清鐵蛋白(SF)為新型腫瘤標志物之一，其診斷肺癌敏感度較高。胸腺激酶1(STK1)屬于DNA修復酶，參與細胞增殖過程，被發現在實體腫瘤中高表達，且關于其對NSCLC化療效果評估的價值報道多[4，5]。基質金屬蛋白酶9(MMP-9)通過對細胞外基質(ECM)降解以參與腫瘤生長、侵襲與轉移[6]。本研究探討血清SF、STK1、MMP-9在NSCLC患者中的表達及臨床意義，為臨床NSCLC治療提供重要參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料2016年2月至2018年2月我院收治的NSCLC患者80例(觀察組)，均通過病理學檢查證實，術前均無放化療干預，排除肝腎功能異常、免疫異常、合并其他惡性腫瘤等患者。其中男44例，女36例；年齡40～80歲[(56.38±3.29)歲]；病理分型：鱗癌52例，腺癌28例；TNM分期：I期30例，II期33例，III期17例；有吸煙史30例，有淋巴結轉移26例。同期診治的肺部良性疾病患者65例(對照1組)，疾病類型：慢性阻塞性肺疾病(COPD)42例，肺炎18例，肺結核5例。其中男36例，女29例；年齡36～77歲[(55.84±3.35)歲]；有吸煙史22例。同期健康體檢正常人員50例(對照2組)，其中男25例，女25例；年齡37～76歲[(55.69±3.16)歲]；有吸煙史17例。三組性別、年齡、吸煙史比較差異均無統計學意義(P> 0.05)，有可比性。本次研究患者均自愿參與，并簽署知情同意書。

1.2 方法清晨空腹采集各組對象肘靜脈血4 ml，以每分鐘3000轉的速率(r=5 cm)離心5分鐘，血清分離后保存待測。通過酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測各組對象血清SF、MMP-9水平，試劑盒均購自上海江萊生物科技有限公司；免疫印跡增強化學發光法對血清STK1測定，化學發光成像分析儀及其配套試劑購自西安瑞邁分析儀器有限責任公司。

1.3 統計學方法采用SPSS 20.0統計軟件處理數據。計量資料行正態性和方差齊性檢驗，不符合正態分布則通過對數轉化后呈正態或近似正態分布，多組間行單因素方差分析，組內兩兩比較行LSD-t檢驗；兩組間行獨立樣本t檢驗。Pearson相關性分析SF、MMP-9與STK1水平的關系。P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清SF、MMP-9、STK1水平比較觀察組血清SF、MMP-9、STK1水平高于對照1組、對照2組(P< 0.05)；對照1組血清SF、SKT1水平高于對照2組(P< 0.05)，兩組血清MMP-9水平比較差異無統計學意義(P> 0.05)。見表1。

表1 三組血清SF、MMP-9、STK1水平比較

*與對照2組比較，P< 0.05；#與對照1組比較，P< 0.05

2.2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較鱗癌、III期、淋巴結轉移患者血清SF、MMP-9、SKT1水平分別高于腺癌、I～II期、非淋巴結轉移患者(P< 0.05)；>60歲患者血清MMP-9水平高于≤60歲患者(P< 0.05)。見表2。

表2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較

2.3 相關性分析NSCLC患者血清SF與MMP-9、STK1水平均呈正相關(r=0.580、0.612，P< 0.05)；血清MMP-9、STK1水平也呈正相關(r=0.563，P< 0.05)。

3 討論

NSCLC患者預后與腫瘤侵襲、轉移密切相關，而腫瘤侵襲、轉移復雜，新生血管形成、免疫低下、腫瘤標志物等均可能導致腫瘤浸潤、轉移。SF屬于結合蛋白之一，為人體鐵儲備重要形式，人體各組織中SF有所表達，特別是骨髓、肝臟及脾臟。有研究表明SF與惡性腫瘤發生有關[7]。范國華等[8]研究發現相比肺良性病變，肺癌患者血清SF水平明顯高，且與肺癌患者病理類型、腫瘤直徑、分化程度、臨床分期可能有關。認為血清SF可能參與肺癌發生、發展過程。同時該學者提出SF不穩定一說，假陽性率較高。對此需聯合其他指標或檢查手段進一步診斷。周晶等[9]研究發現SF對NSCLC診斷敏感度、特異度分別為62.86%、86.00%，聯合C反應蛋白(CRP)、癌胚抗原(CEA)檢測NSCLC的敏感度、特異度分別為87.14%、51.00%。可見SF聯合CRP、CEA能顯著提高NSCLC診斷敏感度，但不會提高其特異度。本研究結果顯示相比肺部良性疾病、健康人員，NSCLC患者血清SF水平顯著高，提示NSCLC患者多出現鐵超載現象。分析其原因：相關致癌理化因子對人體鐵代謝影響，減少鐵排出量，人體內鐵儲備增多，此時抽血檢測血清SF升高；同時炎癥等對SF有一定的誘導作用，這是肺部良性疾病患者SF比健康人員高的原因之一。同時本研究發現NSCLC不同病理分型、TNM分期、淋巴結轉移與否患者血清SF水平存在顯著差異，提示血清SF明顯上升可能傾向鱗癌，且其顯著表達與NSCLC分期、淋巴結轉移有關。

細胞基膜、細胞基質被認為是腫瘤侵襲、轉移的天然屏障，腫瘤細胞通過之且往遠處轉移，這個過程中誘導機體形成蛋白酶類，對細胞基質降解。相關報道發現，NSCLC患者血清MMP-9水平與腫瘤浸潤、轉移密切相關，可作為NSCLC預后預測重要指標[10]。MMP-9為MMPs家族成員之一，其相對分子質量大，它被激活后對I、V、IV、VII、X型細胞外基質(如膠原蛋白、纖維黏連蛋白等)有不同程度的降解作用，促使腫瘤細胞易穿過基底膜浸潤結締組織基質，進而促腫瘤侵襲、轉移。徐曉艷等[11]研究發現NSCLC組織MMP-9陽性表達率高，且其表達和患者年齡、分化程度、淋巴結轉移密切相關。本研究結果顯示相比肺部良性疾病患者、健康人員，NSCLC患者血清MMP-9水平顯著高，與梁乃超[12]報道一致。本研究還發現血清MMP-9水平可能與NSCLC患者年齡、病理分型、TNM分期、淋巴結轉移有關。MMP-9通過對基底膜、細胞外基質降解以促腫瘤細胞往周邊組織侵襲[13]。

STK1被證實在多種實體腫瘤中高表達。目前關于STK1與NSCLC的研究以化療效果評估為主[14]。黃仁飛等[15]對59例NSCLC患者化療4周期不同療效患者STK1水平測定，發現化療4周期后STK1陽性率比化療前明顯降低，且化療有效者明顯比無效者低。認為STK1水平監測能有效評估NSCLC患者化療效果。本研究結果顯示NSCLC患者血清STK1水平相比肺部良性疾病、健康人員顯著高，這可能與STK1參與細胞周期調控有關。有文獻發現，STK1與腫瘤細胞轉化有關，能讓S期調控異常，G/S期時STK1水平持續上升，M期時其水平最高[16]。本研究還發現血清STK1水平可能與NSCLC患者病理分型、TNM分期、淋巴結轉移有關。另外，本研究還發現NSCLC患者血清SF、MMP-9與STK1水平均正相關。提示血清SF、MMP-9、STK1協同促腫瘤生長、浸潤及轉移。

綜上，血清SF、MMP-9、STK1水平在NSCLC患者中高表達，且其水平與腫瘤病理分型、TNM分期、淋巴結轉移密切相關。血清SF、MMP-9、STK1可能協同參與NSCLC發生、侵襲及轉移。