柴胡解毒湯對(duì)慢性乙肝患者免疫功能的影響及其安全性分析

魯利甫

(河南省濮陽市中醫(yī)醫(yī)院藥劑科，河南 濮陽 457001)

乙型病毒性肝炎(簡稱乙肝)是由乙型肝炎病毒(HBV)感染后引起的傳染性疾病，由于HBV持續(xù)感染和免疫耐受等因素的影響，患者病情遷延不愈，因此以慢性患者居多。HBV是一種DNA病毒，若感染后不及時(shí)控制或控制效果不理想，容易導(dǎo)致HBV大量復(fù)制，不僅可增強(qiáng)傳染性，還給患者及其家屬帶來不便和痛苦[1]。治療方法主要是抗HBV，但病毒耐藥問題嚴(yán)重[2]。中醫(yī)藥不失為一種有效的輔助治療手段，可以從多靶點(diǎn)、多中心控制疾病發(fā)展，且副作用小[3]。柴胡解毒湯由柴胡、黃芩、鳳尾草、草河車、連翹等16味中藥組成，既可扶正祛邪，又可清熱解毒[4]。本研究主要探討柴胡解毒湯治療慢性乙肝的臨床療效。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年7月—2017年10月在我院收治的158例慢性乙肝患者，中醫(yī)診斷符合《實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科學(xué)》[5]中肝郁脾虛型慢性乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn),肝郁主證：煩躁、抑郁，脅肋或乳房脹痛，咽部梗阻感，脈弦；次證：失眠，口苦咽干，噯氣反酸，經(jīng)色黯有塊，舌質(zhì)紫黯。脾虛主證：倦怠乏力，腹脹，納差，便溏；次癥：面色萎黃，消瘦，惡心嘔吐，舌質(zhì)淡或胖嫩。滿足肝郁主癥2項(xiàng)以上，脾虛主癥1項(xiàng)以上，或肝郁脾虛次癥各2項(xiàng)以上即可診斷。西醫(yī)診斷符合《內(nèi)科學(xué)》[6]中慢性乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn)：血清HBV-DNA及乙肝表面抗原(HBsAg)陽性，乙肝病毒e抗體(HBeAb)及乙肝E抗原(HBeAg)陽性或陰性，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)持續(xù)或反復(fù)異常，肝組織學(xué)檢查提示肝炎病變。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核同意。采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為治療組(79例)和對(duì)照組(79例)。治療組男42例，女37例；年齡27～74歲，平均(48.5±4.8)歲；病程2～21年，平均(6.7±2.9)年。對(duì)照組男40例，女39例；年齡22～76歲，平均(49.3±5.1)歲；病程3～22年，平均(7.1±2.5)年。兩組患者一般資料間經(jīng)比較，差異不顯著(P>0.05)，組間可以比較。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～80歲者；符合上述中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且辨證分型為肝郁脾虛型者；HBV-DNA>1.0×104copies/mL，且HBV-DNA陽性時(shí)間≥6個(gè)月者；簽署知情同意書者。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重精神疾病患者；嚴(yán)重心、腦血管疾病患者；惡性腫瘤患者；伴有重度高血壓、糖尿病等疾病者；過敏性體質(zhì)或?qū)Ρ狙芯克幬镞^敏者；妊娠或哺乳期女性等。

1.3 方法

兩組患者均給予阿德福韋酯片治療，阿德福韋酯片(葛蘭素史克天津有限公司，國藥準(zhǔn)字H20050651，10 mg/片)口服，10 mg/次，1次/日。治療組在此基礎(chǔ)上增加柴胡解毒湯治療，組方：柴胡、黃芩、鳳尾草、草河車、連翹、仙靈脾、土茯苓各15 g，茵陳、赤芍、白花蛇舌草、垂盆草各30 g，田基黃、白術(shù)、山藥各20 g，土鱉蟲、生茜草各10 g。水煎服，1劑/日，分早晚2次服用。兩組均連續(xù)治療12個(gè)月。

1.4 觀察指標(biāo)

(1)依據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[7]評(píng)估兩組患者治療后臨床療效，臨床治愈：納食減少、脘悶腹脹、面色晦暗、倦怠乏力、肝掌等主要臨床癥狀和體征完全消失，肝功能恢復(fù)正常；顯效：上述主要臨床癥狀和體征基本消失，肝功能指標(biāo)水平較治療前降低>60%；有效：上述主要臨床癥狀和體征明顯改善，肝功能指標(biāo)水平較治療前降低>30%；無效：上述主要臨床癥狀和體征無明顯改善，甚或加重，肝功能指標(biāo)水平較治療前降低<30%。(2)采集患者空腹靜脈血5 mL，以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min，分離血清，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測兩組患者治療前后肝功能指標(biāo)，包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)及堿性磷酸酶(ALP)。(3)采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法(PCR)檢測兩組患者HBV-DNA載量，HBV-DNA<1.0×104copies/mL為陰性，計(jì)算HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率。(4)采用流式細(xì)胞儀檢測兩組患者治療前后全血中T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)，包括CD3+、CD4+、CD8+及B淋巴細(xì)胞亞群CD19+比例，并計(jì)算CD4+/CD8+。(5)記錄兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 治療后兩組臨床療效比較

治療后，治療組臨床治愈、顯效、有效、無效分別有24例、33例、18例、4例；對(duì)照組分別為16例、25例、25例和13例，治療組總有效率為94.94%，明顯高于對(duì)照組的83.54%(χ2=5.339，P=0.021)。

2.2 兩組患者治療前后肝功能比較

與治療前比較，治療后兩組患者血清TBIL、ALT、AST及ALP水平均明顯降低，且治療組明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。見表1。

組別 例數(shù)時(shí)間TBIL(μmol/L)ALT(U/L)AST(U/L)ALP(g/L)治療組79治療前48.95±5.40178.85±22.10159.40±18.05179.40±15.44治療后20.10±3.29##77.54±12.21##51.47±7.66##77.96±14.38##t40.55235.66448.92442.732P<0.001<0.001<0.001<0.001對(duì)照組79治療前50.05±6.12174.09±19.94163.29±15.38174.37±17.64治療后37.37±5.58110.03±14.3889.07±10.04101.10±15.45t13.60823.16035.91727.772P<0.001<0.001<0.001<0.001

注：與對(duì)照組比較，##P<0.01

2.3 兩組患者治療后HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率比較

治療后，治療組和對(duì)照組HBV-DNA轉(zhuǎn)陰例數(shù)分別為52例和31例，HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率分別為65.82%和39.24%，治療組HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率明顯高于對(duì)照組(χ2=11.193，P=0.001)。

2.4 兩組患者治療前后免疫功能比較

治療后對(duì)照組全血中CD3+比例及治療組患者全血中CD3+、CD4+比例和CD4+/CD8+均較治療前明顯升高，且治療組明顯高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)；治療組患者全血中CD8+及CD19+比例均明顯降低，且治療組明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。見表2。

2.5 兩組不良反應(yīng)情況

治療期間，治療組出現(xiàn)惡心嘔吐、頭暈頭痛、全身輕度乏力、腹痛分別為3例、1例、2例、1例，總不良反應(yīng)發(fā)生率為8.86%；對(duì)照組出現(xiàn)惡心嘔吐、頭暈頭痛、全身輕度乏力、腹痛、白細(xì)胞輕度減少、發(fā)熱分別為2例、2例、1例、2例、1例、1例，總不良反應(yīng)發(fā)生率為11.39%；兩組總不良反應(yīng)發(fā)生率無明顯差異(χ2=0.278，P=0.598)，所有患者停藥后均可自行緩解，無需治療。

組別 例數(shù)時(shí)間CD3+(%)CD4+(%)CD8+(%)CD19+(%)CD4+/CD8+治療組79治療前50.05±6.4624.46±4.3028.75±3.5817.71±4.380.88±0.21治療后63.23±6.99##28.10±5.14#25.59±3.05##10.04±2.97##1.14±0.32##t12.6814.8285.97212.8826.038P<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001對(duì)照組79治療前49.06±5.0525.25±4.6728.06±3.3818.05±4.840.90±0.27治療后55.69±5.2626.06±4.8228.95±4.2413.34±3.050.92±0.25t8.0821.0731.4597.3180.483P<0.0010.2850.147<0.0010.630

注：與對(duì)照組治療后比較，#P<0.05，##P<0.01

3 討論

西醫(yī)對(duì)于慢性乙肝的治療主要有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗肝纖維化等治療，其中以抗病毒為主，采用藥物治療降低或清除HBV，提高HBsAg轉(zhuǎn)陰率，達(dá)到治療目的。然而，僅僅通過西醫(yī)藥物治療很難徹底清除HBV，且還會(huì)導(dǎo)致HBV出現(xiàn)不同程度的耐藥性，因此，西醫(yī)治療較為棘手。阿德福韋酯主要通過與三磷酸脫氧腺苷(dATP)競爭逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合位點(diǎn)，阻斷DNA復(fù)制，進(jìn)而改善患者肝功能，但血清HBeAg轉(zhuǎn)陰率較低，療效不夠持久，停藥后病情可出現(xiàn)惡化，治療不徹底等因素而限制了臨床應(yīng)用[8]。

中醫(yī)認(rèn)為，病邪入侵，濕熱瘀毒積聚，脾胃受氣，肝膽抑郁是導(dǎo)致慢性乙肝發(fā)生的主要原因，濕熱瘀毒積聚則脾土受阻，阻于中焦，損傷脾胃及腎臟，肝木受郁，肝病及脾，健運(yùn)失調(diào)，腎失封藏，致患者肝氣郁結(jié)、正氣虛虧，且認(rèn)為濕熱瘀毒貫穿慢性乙肝疾病始終，無法排除；隨著疾病進(jìn)展，疾病末期，患者脾失健運(yùn)，肝腎陰虛，最終導(dǎo)致肝脾腎氣血虧虛。因此，治療以清熱解毒、活血利濕、扶正祛邪、健脾補(bǔ)腎為主[9]。柴胡解毒湯方中柴胡既可疏肝解郁，又可清肝膽邪熱；黃芩清熱利濕、保肝護(hù)肝；鳳尾草可解毒利水；草河車的清熱解毒功效顯著，且能消炎止痛；連翹、白花蛇舌草、垂盆草、田基黃均可清熱解毒；仙靈脾、白術(shù)、山藥有健脾補(bǔ)腎之功；土茯苓清熱解毒，利濕消腫，引邪下行，由小便排出，與黃芩共用，增強(qiáng)黃芩保肝利膽的功效；茵陳擅長清熱利濕，有明顯的利膽退黃之功，是治療黃疸要藥；赤芍可瀉肝火；土鱉蟲、生茜草有活血化瘀，通經(jīng)通絡(luò)之功；諸藥合用，共奏利濕祛腫、清熱解毒、疏肝健脾、滋補(bǔ)肝腎之功[10-11]。本研究中治療后兩組血清ALT、AST、TBIL及ALP水平均較治療前降低，且治療組降低的更明顯；治療組HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率及總有效率明顯高于對(duì)照組，兩組總不良反應(yīng)發(fā)生率無明顯差異。說明在阿德福韋酯治療基礎(chǔ)上增加柴胡解毒湯，可明顯改善慢性乙肝患者肝功能，提高HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率，且并未增加不良反應(yīng)發(fā)生率，安全有效，臨床療效優(yōu)于阿德福韋酯單用。HBV感染機(jī)體后主要通過誘導(dǎo)機(jī)體免疫反應(yīng)，進(jìn)而間接損傷肝細(xì)胞，細(xì)胞免疫功能紊亂是HBV感染機(jī)體后引起肝細(xì)胞損害的主要原因。淋巴細(xì)胞是機(jī)體免疫應(yīng)答中最主要的免疫細(xì)胞，比例高低可在一定程度上反映機(jī)體免疫功能。研究[12]指出，外周血T淋巴細(xì)胞或B淋巴細(xì)胞比例變化可作為慢性乙肝患者病情進(jìn)展、療效評(píng)估及預(yù)后的主要考察指標(biāo)。朱金榮[13]研究顯示，柴胡解毒湯可明顯降低慢性乙肝患者外周血B淋巴細(xì)胞比例，改善機(jī)體免疫功能。本研究中，與治療前比較，治療后對(duì)照組患者全血中CD3+比例及治療組CD3+、CD4+比例和CD4+/CD8+均明顯升高，治療組CD8+及CD19+比例明顯降低，且兩組間差異顯著。與石中全等[14]研究結(jié)果相似，說明柴胡解毒湯對(duì)慢性乙肝患者的免疫功能有明顯的調(diào)節(jié)作用，或許與方中柴胡可降低ALT活性及血清TBIL水平，促進(jìn)機(jī)體免疫功能有關(guān)。

綜上，在阿德福韋酯治療基礎(chǔ)上增加柴胡解毒湯，可有效調(diào)節(jié)慢性乙肝患者機(jī)體免疫功能，提高HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率，改善患者肝功能，安全有效，建議臨床推廣。