一種外用中藥制劑對乳腺增生的臨床前研究

王曉培，劉 韜*

（成都中醫藥大學附屬醫院，四川 成都 610000）

在本科室長期臨床實踐結合現代藥理藥劑知識，基于局部消炎止痛，活血散結的理論，對川烏、白芷、赤芍、遠志、蒲公英、三棱、莪術、延胡索甘草等進行了研究，篩選出川烏、白芷、赤芍、遠志、甘草為乳腺增生癥外用制劑作進一步研究。本研究通過前期動物實驗證實此外用制劑對治療乳腺增生有一定的治療作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選取健康SD雌性大鼠 30 只，隨機分為3 組: 實驗組,對照組，空白組各10只。

1.2 實驗方法

大鼠后腿內側肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5 mg/kg/d，連續25天，然后肌注黃體酮4 mg/kg/d，連續5天，制造乳腺增生病動物模型。各組大鼠在造模的基礎上同時于造模大鼠乳腺部位分別外用賦形劑（空白組）、外用中藥制劑0.4 g（實驗組）及三苯氧胺樣品0.1 g（對照組），每天1次，并按摩每只乳房1 min，共30天。每天1次，連續30 d。

1.3 用法

各組大鼠在造模的基礎上同時于乳腺部位分別外用賦形劑（空白組）、外用中藥制劑0.4 g（實驗組）及三苯氧胺樣品0.1 g（對照組），每天1次，并按摩每只乳房1 min，30天。

1.4 標本采取及觀察指標

末次給藥后第二天，稱量大鼠體重，脫毛后測量大鼠右下腹部乳暈直徑和乳頭直徑。試驗末將大鼠以1%戊巴比妥鈉按40 mg/kg經腹腔注射麻醉。將大鼠固定，從大鼠腹主動脈抽取4 ml動脈血，注入5 ml離心管中，在4℃下3000 r/min離心15 min,分離血清檢測E2、P。取3個試驗組大鼠2、3對部分乳房，10%的福爾馬林固定，梯度酒精脫水，石蠟包埋切片切片厚4 um。HE染色后在光鏡下觀察增生程度。

1.5 統計學方法

采用SPSS 18.0統計分析數據，P＜0.05為有統計學差異。

2 結 果

2.1 對體重的影響

大鼠肌注苯甲酸雌二醇30 d后體重明顯增加，實驗組與對照組分別與空白組比較有統計學差異(P＜0.05)，空白組大鼠體內雌激素水平增高，使大鼠體內代謝水平紊亂，引起體重變化，而實驗組及對照組抑制體內雌激素水平，使其與空白組產生明顯差異。結果如表1。

表1 造模后對乳腺增生大鼠體重的影響(x±s)

2.2 對乳暈直徑及乳頭直徑的影響

空白組注射苯甲酸雌二醇后，乳暈、乳頭直徑明顯增大，實驗組及對照組在分別使用外用中藥制劑及三苯氧胺30 d后，大鼠乳暈與乳頭直徑較空白組明顯減小(P＜0.05)。結果見表2。

表2 外用中藥制劑對乳頭及乳暈的影響(x±s)

2.3 病理形態觀察

病理性造模后大鼠乳腺小葉數量明顯增多，腺泡數增多，腺泡腔和腺導管腔擴張，間質水腫，纖維組織增生，與實驗組及對照組相比均有統計學差異；實驗組較空白組乳腺小葉及腺泡數較少，腺泡腔和腺導管擴張不明顯，未見管腔明顯擴大。空白組分別與實驗組、對照組比較存在統計學顯著性差異(P＜0.05)。乳腺增生病變判斷標準采用方敏等報道標準[1]，具體內容見表3。

表3 中藥外用制劑對大鼠乳腺增生模型的影響

2.4 對雌二醇、孕酮水平的影響

實驗研究最后測定大鼠血清中雌二醇及孕酮含量，發現空白組大鼠E2含量增加，P含量降低，與實驗組及對照組比較有統計學差異(P＜0.05)；而實驗組與對照組比較無差異(P＞0.05)，具體見表4。

表4 中藥外用制劑對乳腺增生小鼠血清E2、P水平的影響

3 討 論

本研究使用的外用中藥制劑是我科多年臨床經驗總結而成，組方為川烏、白芷、赤芍、遠志、甘草。川烏溫經止痛，祛風除濕，具有很強的麻醉止痛作用；其主要成分烏頭堿對神經肌接頭活動和神經干復合電位在末梢傳導有阻遏作用，高濃度可使神經干完全喪失興奮和傳導功能+。白芷消腫止痛，散結排膿。赤芍清熱涼血，活血化瘀，止痛；含有芍藥甙、樹脂等，具有較好的解痙作用。遠志寧心安神，祛痰開竅，消散癰腫；含有遠志皂甙元A和B、細葉遠志素等。甘草益氣補中，清熱解毒，緩急止痛，調和諸藥；含有甘草甜素、甘草黃酮類化合物、甘草甙等。本研究造模成功后發現大鼠的雌激素明顯升高，孕激素降低，乳腺組織明顯增生，作為空白對照組。外用中藥制劑及三苯氧胺的大鼠，乳頭及乳暈直徑較空白組明顯縮小(P＜0.05);病理組織觀察中發現實驗組及對照組的乳腺小葉數目明顯較少，小葉腺泡較少，腔內分泌物少，說明本制劑及三苯氧胺對大鼠的乳腺增生組織有一定的緩解作用，并可在一定程度上恢復其組織形態。三苯氧胺對血清雌二醇及孕酮的作用是已經明確的，實驗中發現空白組大鼠血清雌二醇(E2)含量明顯增加，孕酮(P)含量顯著降低，與實驗組及對照組相比有統計學差異(P＜0.05);而實驗組與對照組比較無差異(P＞0.05)，說明本外用中藥制劑在治療乳腺增生方面具有與三苯氧胺類似的作用，可以一定程度上降低雌二醇含量，同時升高孕酮，從而達到治療乳腺增生的作用。