復合中藥凝膠劑的制備

何 敏,趙存真,李建柱,趙云煥,吳海港,陳 敏

(1.信陽農林學院牧醫工程學院信陽市獸藥新制劑研究與創制工程技術中心,河南 信陽 464000;2.信陽農林學院牧醫工程學院河南省大別山區生態畜禽健康生產工程研究中心,河南 信陽 464000)

天葵子味甘、苦,性寒[1]。具有清熱解毒,消腫散結之功效。常用于治療乳癰、蛇蟲咬傷等。有試驗表明,天葵子提取物對細菌和真菌具有抑制作用[2]。蒲公英、苦參、白鮮皮具有清熱解毒和消腫消炎的功效,常制作成外用制劑用于治療皮膚疾病。因此將天葵子與這幾種中藥制作成復方制劑使用,可能會增強單一藥物治療皮膚疾病的作用。目前在臨床應用中未見有報道將天葵子制成外用制劑使用。治療皮膚炎癥常用的外用制劑有軟膏劑、噴劑等[3]。根據使用的情況來看,軟膏劑容易產生涂布不均勻且容易摩擦掉等缺點,使用效果不好;噴劑則因為流動性太大容易揮發,而凝膠劑很大程度上克服了以上兩種劑型的缺點。

凝膠劑作為一種新型的外用制劑[4],具有質地細膩、不易流動、易于涂布等優點,并且凝膠劑的制備工藝條件較為簡單,適合中藥復方制劑的生產現狀,便于推廣應用。因此,為優選復方天葵子的配方、考查其藥效,本試驗采用正交試驗設計,以復合中藥凝膠劑的外觀性狀,黏稠度,涂展性和穩定性等指標考察中藥、卡波姆-940、甘油、氮酮的用量,選擇復合天葵子凝膠劑的最佳配比,并對本試驗所選出的最佳復合天葵子凝膠劑進行初步藥效學探究,以期為應用于動物皮膚疾病的臨床治療和預防提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器 離心機(型號：TGL-16G,沈陽理化儀器廠);電子恒溫水浴鍋(型號：YCX-4,金壇市城西崢嶸試驗儀器廠);電子天平(型號：FA2004,上海蒲春計量儀器有限公司);冰箱(型號：BCD-555KWM,合肥美的榮事達電冰箱有限公司);電熱套(型號：DZTW,北京市永光明醫療儀器廠)。

1.2 試驗藥品 天葵子、蒲公英、苦參、白鮮皮,購自信陽張仲景大藥房。甘油、卡波姆-940(CP-940)、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)、氮酮、三乙醇胺,購自中國天津巴斯夫化工有限公司。

1.3 實驗動物 家兔5月齡,體重2.0±0.5kg,由信陽職業技術學院實驗動物中心提供。

2 方法

2.1 凝膠劑的制備

2.1.1 中藥有效成分的提取(水提法) 用電子秤稱量天葵子50 g、蒲公英30 g、苦參20 g、白鮮皮20 g。用粉碎機粉碎藥材,在600 mL蒸餾水中浸泡30 min。煮沸后沸騰30 min,倒出藥液并過濾。向藥渣中添加蒸餾水進行第二煎,方法同第一煎,共3煎。每次600 mL蒸餾水。合并3次所得的濾液并濃縮至120 mL,1∶1(g/mL)濃縮,冷卻。放入4℃冰箱保存待用。

2.1.2 基質的選擇 初定基質和基礎方配比為：基質1%,主藥5%,甘油5%,氮酮2%。以凝膠劑的外觀性狀(顏色、形態、粘稠度、涂展性)、穩定性(55℃、6 h;-20℃、24 h;4 000 r/min離心30 min)為考查指標,對卡波姆-940和羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)進行選擇。

2.1.3 制備方法 稱取處方量的凝膠劑基質均勻撒在適量蒸餾水的表面,靜置溶脹24 h。將甘油、氮酮、加入主藥中攪拌均勻后,將其加入凝膠劑基質中,混勻。為了避免凝膠劑在處理的過程中過酸或過堿,對皮膚造成刺激,加入適量三乙醇胺調節凝膠劑pH值至7左右,加蒸餾水至足量,攪拌均勻即可。

2.1.4 正交試驗設計 根據文獻報道,凝膠劑處方中的卡波姆-940用量多在1%。中藥主藥用量多在5% ～15%,甘油用量多在5% ～15%,氮酮用量多在0.5%～1.5%,并結合預試驗確定的各因素水平,制定因素水平表。因素水平見表1。

表1 因素水平

按照2.1.3的凝膠劑的制備方法和表1進行正交試驗設計,正交設計見表2,共設計9個處方,分別編號1～9。

表2 正交設計

2.2 質量檢測

2.2.1 穩定性檢查 按照正交設計確定的凝膠劑配方制備：3份凝膠劑,進行穩定性檢查。檢查凝膠劑的耐熱、耐寒分層現象,判斷凝膠劑的穩定性。(1)耐熱試驗：將制備好的凝膠劑置于55℃水浴鍋內恒溫放置2 h后取出,恢復室溫后觀察凝膠有無分層現象及顏色變化;(2)耐寒試驗：將凝膠劑置于-20℃冰箱內恒溫放置72 h,恢復室溫后觀察凝膠有無分層現象及顏色變化;(3)離心試驗：將凝膠劑置于離心機中,3 000 r/min離心30 min后取出,觀察凝膠有無分層現象及顏色變化。

2.2.2 刺激性測定 將制備好的天葵子復合凝膠劑均勻涂抹于家兔耳朵表面以及背部皮膚表面(除毛,所涂位置家兔不能舔到),2 h后觀察涂布部位有無發紅、腫脹等刺激性。

2.2.3 其他檢測 通過觀察、涂抹等方法對復方天葵子的外觀、黏稠度、延展性等進行檢測。

2.2.4 評分標準 為了客觀地對試驗結果進行評定,優化選定復方天葵子凝膠劑的最佳配比,根據《中華人民共和國獸藥典》(2015版)關于凝膠劑的質量要求,參照參考文獻[7]制定凝膠制劑質量檢測評分標準。評分標準見表3。

2.3 藥效學試驗 準備5只年齡、體重均相似的家兔,在其背部用鈍行器物(同一人同一力度)擊打,使其呈現紅、腫炎癥表現。擊打3處,一處用云南白藥氣霧劑處理作為對照組;一處用天葵子復合凝膠劑涂抹作為試驗組;一處用生理鹽水處理作為空白組。1 d 2次,觀察5 d,并給予治療藥效評分,評分標準為紅腫表現,1分;稍微紅腫,2分,恢復良好,3分。

表3 檢測評分標準

3 結果

3.1 基質的選擇 不同基質對凝膠劑的影響見表4。試驗結果顯示,卡波姆-940均勻細膩,延展性、黏稠度、穩定性好,不分層不變色,更適宜作為復方天葵子的成膠劑,因此本試驗采用卡波姆-940為凝膠基質。

表4 凝膠劑基質的選擇

3.2 正交試驗結果 按照表3評分標準,從外觀、延展性、黏稠度、穩定性和刺激性等方面對制備的1-9號中藥凝膠劑進行打分評價,評分結果見表5。

由表5的K值和R值結果可見,各因素影響凝膠劑制劑質量大小順序為卡波姆940＞主藥＞氮酮＞甘油,得出最佳配比組合為A2B3C2D3,即1.5%卡波姆940,15%主藥,10%甘油,1.5%氮酮。隨后按照得出的各因素最佳組合制備凝膠劑,并進行質量檢測驗證,結果顯示,此配方制備的凝膠劑外觀細膩均勻,黏稠性及涂展性佳,穩定性好,對動物皮膚無刺激性,評分為22.7,評分最高。

表5 凝膠制劑評分結果

3.3 藥效學結果 通過上述試驗,選定1.5%卡波姆-940,15%主藥,10%甘油,1.5%氮酮的處方為本試驗的最佳方案,因此對最佳配比的復方天葵子進行初步藥效探究,將所制復方中藥凝膠劑涂抹于已經致炎的5只家兔皮膚表面。通過對照試驗5 d后觀察家兔的恢復情況表明,以天葵子為主藥的復合凝膠劑在一定程度上對治療炎癥有效果。藥物治療效果見表6。

表6 藥物治療效果

4 討論

凝膠劑是一種由藥物與適當基質混合而成,具有凝膠特性的半固體或黏稠狀液體的制劑[6-7],主要是由成膠劑、保濕劑、透皮促進劑、酸堿調節劑等組成[8]。在試驗中甘油作為保濕劑,且刺激性小,適宜用于皮膚制劑。氮酮是國內廣泛使用的高效皮膚滲透促進劑[9],為無色或淡黃色、透明、無味、無毒無刺激油狀液體,不溶于水,溶于醇、醚、酮、醛、烷、氯仿等大多數有機溶劑,對親水和親油藥物均有很強的透皮作用,通常加入0.2% ～2%即可將透皮吸收效果成倍增加,從而增強藥物療效和化裝品的使用效果,減少主藥和營養物的使用,降低成本。

凝膠劑基質類型可分為親水性凝膠、親脂性凝膠和乳劑型凝膠。其中,在臨床上最為常用的凝膠劑是親水性凝膠劑。目前常用的親水性凝膠劑基質有卡波姆-940、羧甲基纖維素鈉等。在選擇凝膠基質時應主要考慮以下問題,外觀是否光滑透明,質地是否均勻細膩,黏度、稠度是否適宜易于涂布,選擇一個好的凝膠基質是制作凝膠劑的關鍵。不同的的基質具有不同的特性,能夠制備成不同的凝膠制劑,由此產生不同的臨床效果。因此,需要慎重、合理的選擇凝膠基質。有資料顯示,卡波姆-940穩定性、延展性和涂布效果都很好[10-11],通過試驗對比,本試驗選用卡波姆-940作為為復方天葵子凝膠劑的基質。

藥物制成凝膠劑型,能較長時間與作用部位緊密粘附,制法簡單,使用舒適。中藥凝膠劑將傳統中藥制劑的處方和凝膠劑制備技術相結合,在使用上方便,并且易于接受。中藥凝膠劑不僅可以容納中藥提取物,也可以容納中藥材極細粉,制備工藝也較為簡單,是一種良好的藥用劑型,有廣泛的發展前景[4]。天葵子入藥具有清熱解毒、消腫止痛、解毒等功效,臨床常用于治療乳腺炎、扁桃體炎、癰腫等癥。研究發現天葵子中含有的

內酯類和氰苷類化合物具有一定抗菌抗炎的藥理活性[1],因此,本試驗將天葵子與臨床常外用治療皮膚疾病的蒲公英、苦參、白鮮皮制備復方中藥凝膠制劑,以卡波姆-940、主藥、甘油、氮酮作為正交試驗的4個因素,從凝膠劑的外觀、延展性、黏稠度、穩定性、刺激性等進行檢測,對復方天葵子凝膠劑配方進行優選,并對其藥效進行初步探究。結果顯示,復方天葵子凝膠劑的最佳配比為1.5%卡波姆-940,15%主藥,10%甘油,1.5%氮酮,以天葵子為主藥的復合中藥凝膠劑在治療皮膚炎癥具有一定效果。