驢場發生非感染性關節炎的病例報告

王素紅,夏 楠,馬秀亮,劉桂芹,劉文強

(1.山東省聊城市畜牧站,山東 聊城 252000;2.聊城大學農學院,山東 聊城 252059)

引起動物關節疾病的原因很多,當家畜在不良道路上過度用力或運動,致使關節過度屈伸而發病,造成不同程度的關節損傷,副傷寒沙門菌或鏈球菌感染也容易發生本病。除非發生嚴重的病原菌感染,關節炎大多數屬于散發病例,但是在規模化養驢場,為了排水便利或美觀,經常會對運動場進行硬化改造。而且由于品種改良,種公驢大型化趨勢造成關節負重增加,從而造成了比較嚴重的關節損傷,發病率較高。驢的關節損傷或挫傷會造成疼痛、跛行、不愿運動和關節腫脹等,繼發漿液性關節炎,嚴重影響動物的利用價值。2016-2017年,在山東省規模化驢場,種公驢發生了較多的關節損傷病例,對此進行了診斷,報告如下。

1 發病情況調查

2016年7月-2017年9月,來自山東省某地市的一家繁育驢場,共有54頭患有不同程度關節炎癥狀的成年種公驢(德州驢),動物長期處于硬質磚鋪地面的驢舍和運動場,關節疾病發病率為67.5%：驢兩側膝關節有明顯水腫、組織增生或腫大等情況(25.9%,14/54),輕度水腫(35.2%,19/54),大部分表現為不愿觸碰和運動、走路跛行(66.7%,36/54),參考AAEP跛行分級標準達到3級混合跛行。體溫38.5℃,心率45次/min,食欲無明顯變化。

1.1 樣品采集與處理 隨機選取8頭發病驢進行常規采血,檢測血液常規指標和血清生化指標。無菌穿刺采集膝關節腔組織液,在1 h內(10 000 r/min離心15 min),收集上清液,-80℃保存備用。選取8頭健康成年種公驢作為對照。

1.2 細菌分離和鑒定 將關節液病料涂片、染色鏡檢,然后劃線接種于腦心浸液肉湯、血瓊脂培養基、麥康凱培養基、TSI培養基和S.S.瓊脂平板上,置于37℃培養24 h,觀察細菌生長狀況。同時接種于改良Thiaucourts氏PPLO固體培養基上,37℃培養5～7 d。

1.3 測定項目及方法 采血后進行血液常規指標(普朗公司)和血清生化指標(全自動生化分析儀TBA-120)的測定。使用ELISA試劑盒(上海賽默生物科技發展有限公司)對血清和關節液中的IL-1β、TNF-α和PGE2的含量進行檢測[1-2]。

1.4 數據的統計分析 采用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析處理。

2 結果與分析

2.1 細菌分離和鑒定結果 病料經培養48 h后,增菌培養基和鑒別培養基上均無細菌生長,經培養7 d后無支原體生長。表明細菌和支原體分離鑒定結果為陰性。

2.2 血液常規指標測定 對發病動物和健康動物的血常規平均指標的比較可知,發生關節炎的動物嗜中性粒細胞數值顯著升高,而其中的分葉核含量極顯著升高(P＜0.01),單核細胞和白細胞數值顯著升高(P＜0.05)。提示發生明顯炎癥。如表1所示。

表1 血液常規指標的檢測結果

2.3 血清生化值測定結果 對發病動物和健康動物的血清生化平均指標的比較可知,發生關節炎的動物血清中的ALP值為322.6±9.52 U/L,與對照相比212.28±5.67 U/L,極顯著升高(P＜0.01),提示有骨的疾病或損傷。CK(關節炎組448.15±9.54 U/L,對照組308.10±2.54 U/L)和AST(關節炎組521.85±6.24 U/L,對照組352.62±7.34 U/L)的值顯著升高(P＜0.05),如中插彩版圖1所示。其他指標未見明顯變化,提示發生骨骼肌損傷。使用ELISA試劑盒對關節液中相關炎性因子的檢測表明,IL-1β(關節炎組95.56±8.64 pg/L,對照組89.25±6.58 pg/L)、TNF-α(關節炎組 75.61 ±4.59 pg/L,對照組62.89± 6.11 pg/L)和PGE2(關節炎組402.26±26.17 pg/L,對照組359.44±22.58 pg/L)的檢測表明,這些炎性因子數值發生顯著升高,如中插彩版圖2所示。

圖1 部分血清生化指標的測定結果

圖2 炎性因子的測定結果

3 討論

關節疾病是馬屬動物的常見病,包括關節扭傷、挫傷、漿液性關節炎和化膿性關節炎等,大部分都是由于各種外力作用、機械性損傷、不良道路或各種病原體感染等因素有關,以散發居多。文獻[3-4]表明在骨關節炎模型中,負重和過度運動可以加快造成兔、鼠的關節損傷。在規模化驢場,由于種公驢長期處于驢舍和運動場等硬質地面活動,加之種公驢的自身體重較大,各關節尤其是膝關節的長期負重明顯,過度勞損,造成了疼痛、跛行和不愿運動為臨診特征的關節疾病,并且出現了較多病例。

文獻[5-6]報道了新疆零星發生的約80匹馬由于沙門菌引起的副傷寒性關節炎病例。本次觀察的病例關節液中沒有化膿性表現,也沒有分離到沙門菌、鏈球菌和支原體等常見病原體,表明不屬于感染性炎癥。發生關節炎組的中性粒細胞、單核細胞和白細胞數值顯著升高。提示發生明顯炎癥過程。血液中時間性粒細胞沒有顯著變化,提示未發生風濕性關節炎等變態反應性疾病。關節炎患病動物血清生化指標中,ALP、CK和AST的值顯著升高,其他指標未見明顯變化,提示發生關節或肌肉損傷等炎癥過程。文獻[7]建立的蒙古馬骨關節炎模型,TNF-α和PGE2的含量有顯著上升趨勢,而且促進了蛋白酶的分泌和軟骨的降解,可以作為關節炎的檢測指標進行參考。而關節液中的生物標志物IL-1β、TNF-α和PGE2等促炎因子的檢測結果同時表明,這些種公驢發生了非感染性炎癥過程。

建議消除地面硬化,擴大公驢活動場地。臨床治療措施包括制止溢血,促進吸收(溫敷或穿刺放液等),鎮痛消炎,舒筋活血,防止結締組織增生,避免遺留關節機能障礙。選擇消炎止痛的治療藥物,包括吲哚美辛、雙氯酚酸鈉等進行對癥治療。