黃芩無糖配方顆粒制備工藝研究及質量評價

鄧寒霜，李筱玲，趙月梅

(商洛學院 生物醫藥與食品工程學院，陜西 商洛 726000)

黃芩為唇形科植物黃芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)的干燥根[1]，始載于《神農本草經》，又被稱為山茶根、黃芩茶、土金茶根等。黃芩味苦，性寒，歸肺、膽、脾、小腸、大腸經，具有清熱燥濕，止血安胎之功效[2～4]。黃芩的主要藥效物質是黃酮以及苷類，現代藥理學研究表明，黃芩具有調節免疫系統、抗菌消炎、抗病毒、抗腫瘤、治療心腦血管疾病、抗過敏、解熱鎮痛等作用[5～8]。黃芩作為中醫臨床使用和中成藥生產中最為常見的品種之一[9]，具有良好的市場開發前景。

中藥配方顆粒是以傳統中藥飲片為原料，制成的一種統一規格、統一劑量、統一標準的新型配方用藥。相比于傳統中藥，中藥配方顆粒制劑具有服用方便、易于攜帶，臨床使用組合方便快捷，靈活多變等優勢[10]。中藥顆粒劑按照是否添加蔗糖為輔料，可以分為含糖顆粒和無糖顆粒兩類。由于蔗糖具高生物活性，易誘發胃炎、齲齒、糖尿病及肥胖等病癥，含糖顆粒不宜用于年老及禁糖患者。無糖顆粒擴大了顆粒劑的適應范圍，可解除糖尿病患者及糖耐量不足患者的用藥限制[11～14]。本課題旨在遵循傳統中醫用藥理論、確保藥材有效成分得以保留的前提下，探索黃芩無糖配方顆粒的最優制備工藝，以期為進一步開發黃芩藥材資源奠定一定的基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 藥材與藥品 黃芩藥材，購買自陜西天士力植物藥業有限公司，經商洛學院執業藥師李筱玲鑒定為唇形科植物黃芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)的干燥根；黃芩苷對照品，購自北京世紀奧科生物技術有限公司，批號：21967-41-9；色譜純甲醇(HPLC，Fisher Chemical)；95%乙醇(AR，天津元澤化工貿易有限公司)；無水乙醇(AR，天津元澤化工貿易有限公司)；甲醇(AR，天津元澤化工貿易有限公司)；磷酸(AR，山東德彥化工有限公司)；純凈水(杭州娃哈哈集團有限公司)；糊精(AR，天津博迪化工股份有限公司)等。

1.1.2 儀器與設備 高效液相色譜儀(LC-20A，島津公司，具體配置為：在線脫氣機、四元泵、自動進樣器、二極管陣列檢測器)；C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5μm，Kromasil公司)；電子天平(BS110，賽多利斯天平公司)；電熱鼓風干燥箱(DHG-9030A，上海齊欣科學儀器有限公司)；微型粉碎機(FW80，天津泰斯特儀器有限公司)；旋轉蒸發器(RE52-99，上海亞榮生化儀器廠)等。

1.2 實驗方法

1.2.1 黃芩苷含量測定 色譜條件 以甲醇-0.2%磷酸水(47:53)為流動相，檢測波長280 nm，進樣體積10 μL，柱溫30 ℃，理論板數按黃芩苷峰計算應不低于2 500。

對照品溶液的制備 取黃芩苷對照品適量，加甲醇制成濃度為60 mg·mL-1的溶液，微孔濾膜過濾，取續濾液備用。

供試品溶液的制備 取樣品粉末0.3 g，加入70%的乙醇40 mL，加熱回流3 h，過濾，收集濾液，以70%乙醇定容至100 mL；精密量取上述溶液1 mL，以甲醇稀釋至10 mL，微孔濾膜過濾，取續濾液備用。

1.2.2 黃芩藥材浸膏的制備 取黃芩藥材粉末適量，以20倍量60%的乙醇為溶劑，在80 ℃下回流提取2 h，過濾，收集濾液；殘渣加10倍量60%的乙醇，在80 ℃下回流提取1 h，過濾，合并兩次濾液，減壓濃縮至相對密度在1.25～1.30之間，即得[15]。

1.2.3 黃芩配方顆粒制備工藝 取黃芩藥材浸膏適量，混入一定比例的糊精為輔料，加入適量不同濃度的乙醇溶液為潤濕劑，用手不斷搓捏混勻至“手握成團，輕壓即散”狀后，擠壓通過制粒篩，收集所得顆粒，在60℃下烘干，即得黃芩配方顆粒。

1.2.4 正交試驗方案 以顆粒劑中黃芩苷含量和顆粒劑粒度、水分、干燥失重、溶化性等檢查項目為綜合評價指標，對輔料用量、乙醇濃度、潤濕劑用量三個因素進行正交試驗，優先最佳工藝參數。具體因素水平及試驗方案設計見表1、表2。

表1 黃芩配方顆粒制備試驗因素及水平

表2 黃芩配方顆粒制備正交試驗方案

1.2.5 顆粒劑質量評分標準 照1.2.1項中規定，對所得黃芩無糖配方顆粒進行含量測定；照《中國藥典(2015版，第四部)》中有關顆粒劑質量評價的規定，對所得黃芩無糖配方顆粒進行粒度、溶化性、水分和干燥失重檢查；對含量測定及各項檢查結果進行打分，以各項目得分總和為綜合評價指標。

其中黃芩苷含量占60分；顆粒劑粒度、水分、溶化性和干燥失重的檢查結果各占10分，具體評分標準如下。

①含量測定項目，以含量最高者為滿分60分，其他組數據與最高者相比，再乘以60分，即為其分數；

②粒度檢查項目，以不合格率最低者為滿分為10分，最低者與其他組數據相比，再乘以10分，即為其他組分數；

③溶化性檢查項目，以全部溶化者為滿分10分，輕微渾濁8～9分，中度渾濁6～7分，重度渾濁0～5分；

④水分檢查項目，以含水量最低者為滿分10分，最低者與其他組數據相比，再乘以10分，即為其他組分數；

⑤干燥失重項目檢查，以減失重量最低者為滿分10分，最低者與其他組數據相比，再乘以10分，即為其他組分數。

2 結果與分析

2.1 黃芩藥材中黃芩苷含量測定

取黃芩藥材樣品適量，照1.2.1項下供試品溶液制備方法處理，吸取黃芩苷對照品溶液及黃芩藥材供試品溶液各10 μL進樣，記錄色譜圖，具體結果見圖1、圖2。

2.2 黃芩無糖配方顆粒質量檢查

2.2.1 外觀性狀 如圖3所示，試驗所得的黃芩配方顆粒，顆粒均勻、色澤一致，均呈淺棕褐色，無吸潮、軟化、結塊、潮解等現象。

由圖1可知，黃芩苷色譜峰保留時間為15.221 min。

由圖2可知，藥材樣品中黃芩苷含量較高，經計算得其中黃芩苷含量為28.4%，達到藥典標準3倍以上，說明筆者所用黃芩藥材質量較好。

圖1 黃芩苷標準品高效液相色譜圖

圖2 黃芩藥材高效液相色譜圖

圖3 不同處理所得黃芩無糖配方顆粒成品

2.2.2 粒度、水分、干燥失重、溶化性檢查 取黃芩顆粒適量，照藥典規定進行粒度、含水量、溶化性檢查[16]，并按1.2.5項中規定對各處理所得樣品進行打分，具體結果見表3。

由表3可知，各處理所得黃芩免煎顆粒各項檢查指標均符合藥典要求。

2.2.3 不同處理顆粒劑中黃芩苷含量 取不同處理所得黃芩顆粒樣品適量，照1.2.1項下供試品溶液制備方法處理，吸取黃芩苷對照品溶液及黃芩顆粒供試品溶液各10 μL進樣，記錄色譜圖，具體結果見圖4、表4。

表3 黃芩無糖配方顆粒劑粒度、水分、溶化性檢查結果

圖4 黃芩配方顆粒高效液相色譜

由圖4可知，黃芩配方顆粒中含有黃芩苷成分，顆粒劑色譜圖與黃芩藥材色譜圖形狀類似，說明所得配方顆粒基本保留了黃芩原藥材中有效成分，黃芩苷得以有效轉移至顆粒劑中。不同處理所得黃芩配方顆粒中黃芩苷含量檢測結果見表4。

表4 不同處理黃芩顆粒中黃芩苷含量

由表4可知，各處理中，當輔料用量為浸膏量4倍，乙醇濃度為75%，潤濕劑用量為輔料與浸膏總量的15%時，所得顆粒劑中黃芩苷含量最高，為11.8%。

2.3 正交試驗結果

將各處理所得顆粒劑按1.2.5下規定進行質量評分，并以各項目得分之和作為綜合評價指標進行正交分析，具體結果見表5、表6。

由表5、表6數據分析可得，以顆粒劑質量檢測綜合評分為評價指標，試驗因素對實驗結果影響的主次順序為A>B>C，即輔料用量對黃芩無糖配方顆粒質量影響最大，其次是乙醇濃度的影響，潤濕劑用量對試驗結果的影響最小。經正交實驗優選得最佳因素水平組合為A2B2C2，即以75%的乙醇溶液為潤濕劑，潤濕劑用量為輔料與浸膏總量的10%，輔料用量為藥物浸膏量的4倍，在此條件下制得的黃芩無糖配方顆粒質量最優。

因上述最優因素水平組合并未出現在正交試驗中。為檢驗正交試驗結果的可靠性，筆者對篩選出的最優黃芩無糖配方顆粒劑的制備工藝進行了驗證，結果見表6。

表5 黃芩配方顆粒正交試驗結果分析

表6 黃芩配方顆粒制備正交試驗方差分析

表7 黃芩無糖配方顆粒制備最優工藝條件驗證試驗結果

驗證試驗所得顆粒劑干燥、粒度均勻、色澤一致，呈淺紅棕色，無吸潮、軟化、結塊、潮解等現象。由表6可知，其各項檢測指標均符合藥典規定，驗證實驗結果重現性較好，表明研究結果可靠，在最優工藝下制備所得黃芩配方顆粒質量較好。

3 結論與討論

中藥配方顆粒相較于傳統湯劑來說，具有方便服用、便于攜帶、易于調配、劑量準確等優點；而相對于片劑來說，顆粒劑的溶解時間短、藥物溶出迅速、患者吸收快，能降低部分藥物對胃的刺激、生物利用度高。特別是無糖型顆粒，因其不含蔗糖，使得顆粒劑質量更為穩定，且更適合老年、兒童及糖尿病患者使用。另外，對于生產者與管理者而言，中藥配方顆粒生產環境衛生清潔，質量標準統一，便于進行質量管理，方便儲存與運輸。因此中藥無糖配方顆粒具有廣闊的應用前景。

筆者在參閱部分參考文獻及充分預試驗的基礎之上，對黃芩無糖配方顆粒的制備工藝進行了探索，得出其最佳制備工藝為：取黃芩藥材提物適量；以4倍于黃芩提取物的糊精為輔料，加入輔料與浸膏總量10%，濃度為75%的乙醇為潤濕劑，充分搓捏混勻，制成軟材后，擠壓通過制粒篩，制成顆粒，于60℃烘干，即得。

因藥材浸膏的相對密度，對顆粒劑制備效果影響較大，本課題組還對浸膏密度進行了考察，發現當相對密度在1.25～1.30之間時，藥材浸膏粘度適宜，掛壁現象較輕，浸膏損失小，因此本文所有試驗處理均將藥材浸膏相對密度控制在1.25～1.30之間。

黃芩作為中醫臨床使用和中成藥生產中最為常見的品種之一，長期被收錄于《中國藥典》之中，具有良好的市場開發前景。黃芩是“五大商藥”之一，陜西省商洛市是我國黃芩主要產區之一，黃芩蘊藏量豐富。為進一步開發商洛黃芩資源，提升商洛中藥品牌形象、增加商洛中藥材生產附加值，本課題組在今后的研究中將進一步對黃芩無糖配方顆粒的制備工藝進行優化，并對其藥理、藥效做初步的探索。