降血脂乳酸菌的篩選及發(fā)酵工藝的優(yōu)化

王麗 陶志強(qiáng) 馬雁 陳萱 趙瑞峰 張棟 陸震 印伯星 關(guān)成冉

摘? 要：目的：篩選具有顯著降低血清中的血脂水平功能的乳酸菌。方法：選取實(shí)驗(yàn)室中7株乳酸菌，對其降膽固醇和降甘油三酯的能力進(jìn)行測定，篩選出具有較高降血脂能力的菌株，并進(jìn)一步研究接菌量、發(fā)酵溫度、初始pH值、發(fā)酵時間等不同發(fā)酵工藝條件對乳酸菌降膽固醇和降甘油三酯能力的影響。結(jié)果：降膽固醇能力最好的菌株是Y10，降甘油三酯能力最好的菌株是X1。對發(fā)酵工藝條件優(yōu)化，Y10降解膽固醇的最優(yōu)發(fā)酵條件為接菌量4%、溫度40℃、pH值6.0、發(fā)酵時間30h。X1降解甘油三酯的最優(yōu)發(fā)酵條件為接菌量4%、溫度40℃、pH值6.5、發(fā)酵時間36h。

關(guān)鍵詞：乳酸菌;發(fā)酵條件;降膽固醇;降甘油三酯

中圖分類號 TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2019）11-0023-5

Abstract：Objective：Lactic acid bacteria were to be screened whichhave a significant function of lowering blood lipid levels in serum.Method：This research selected seven lactic acid bacteria preserved in the lab.The ability to reduce cholesterol and lower triglycerides were determined and the strain with strong lipid-lowering capacity were selected.Furthermore，the amount of bacteria，fermentation temperature，initial pH value，fermentation time and other fermentation processes for the ability to reduce cholesterol and cholesterol and lower triglycerides were optimized.Result：The strain with the best cholesterol-lowering ability was Y10，and the strain with the best triglyceride-lowering ability was X1.The cholesterol-degrading ability of Y10 was best under the fermentation conditions of 4% inoculation，40℃，pH 6.0 and 30h.The degradation ability of X1 to triglyceride is best under the fermentation conditions of 4% inoculation，pH 6.5 and 40 °C for 36h.

Key words：Lactic acid bacteria;Fermentation condition;Cholesterol-reducing;Triglyceride-reducing

據(jù)統(tǒng)計，全世界每年約有3000萬人死于高血脂引起的相關(guān)疾病，目前治療心腦血管疾病主要還是依靠藥物治療1]。然而，藥物治療不僅成本較高，而且造成的副作用影響較大[2]。研究表明[3]，降低血清中的血脂水平，可大幅避免心血管疾病造成的死亡。血脂中的主要成分是甘油三酯和膽固醇，乳酸菌作為人體內(nèi)最主要的益生菌，已被證實(shí)可以顯著改善血清中的血脂水平[4-6]，并使腸道系統(tǒng)發(fā)生長期有益的變化，且具有較高的安全性[7-8]。與其他降血脂的方法相比，乳酸菌降血脂具有專一性強(qiáng)、降解率高、副作用較小等顯著特點(diǎn)。本課題通過體外實(shí)驗(yàn)研究乳酸菌的降血脂能力，并對菌株降血脂能力的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，為開發(fā)降血脂水平的乳酸菌功能性制品提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑 鹽酸、膽鹽3號、膽固醇、氫氧化鈉、牛膽鹽、吐溫-80，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;甘油三酯，北京索萊寶科技有限公司;膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒，生工生物工程股份有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)菌株 實(shí)驗(yàn)使用乳酸菌由江蘇省乳品生物技術(shù)與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室分離保藏，分別命名為：F5、X1、Y5、Y10、Grx10、K01-4、S7。

1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備 高壓蒸汽滅菌鍋SX-500，日本TOMYG公司;超凈工作臺SW-CJ-1F，蘇州凈化設(shè)備有限公司;全自動微生物生長曲線分析儀，Bioscreen公司;高速冷凍離心機(jī)Legend mach1.6R，美國Thermo Fisher SCIENTIFIC有限公司;超純水儀Millipore Direct8，美國Millipore公司;電子天平PL2002，梅特勒公司;恒溫培養(yǎng)箱DNP-9272，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。

1.4 培養(yǎng)基 MRS培養(yǎng)基：參考相關(guān)文獻(xiàn)[9]的方法配置。膽固醇培養(yǎng)基：膽固醇0.10g溶解于20mL的吐溫-80中（可加熱），稱取膽鹽3g，加入1000mL的MRS培養(yǎng)基中，調(diào)pH至6.0±0.2，121℃滅菌15min，冷卻備用。甘油三酯培養(yǎng)基：甘油三酯0.20g溶解于20mL的吐溫-80中（可加熱），加入1000mL的MRS培養(yǎng)基中，調(diào)pH至（6.0±0.2），121℃滅菌15min，冷卻備用。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1 乳酸菌的活化 將實(shí)驗(yàn)室所分離保藏的7株乳酸菌按3%接種量接種到MRS液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)18h～36h，置于4℃冷藏備用。