羅 婧,周兆紅,王偉偉
(1.甘肅省天水市秦州區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,741000;2.河南省乘風(fēng)動(dòng)物保健技術(shù)研究所,450000)
豬瘟,俗稱(chēng)爛腸瘟,是由黃病毒科豬瘟病毒屬的豬瘟病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。一旦發(fā)病,會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的危害,被世界衛(wèi)生組織(OIE)列為A 類(lèi)傳染病。雖然在《2017年的國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》已不再將該病列入國(guó)家強(qiáng)制免疫的病種之列,但仍在我國(guó)一類(lèi)動(dòng)物疫病的病種名錄之中,可見(jiàn)其一旦發(fā)病將帶來(lái)的危害程度,目前尚無(wú)有效藥物對(duì)該病進(jìn)行治療,所以預(yù)防免疫仍然是預(yù)防該病的重要手段之一。而如何監(jiān)測(cè)豬瘟免疫抗體水平,及時(shí)了解和分析免疫失敗的原因,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。本次研究通過(guò)對(duì)甘肅省天水市秦州區(qū)(以下均簡(jiǎn)稱(chēng)秦州區(qū))2016年-2018年的16 各鄉(xiāng)鎮(zhèn)32 個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和32 個(gè)行政村的散養(yǎng)戶(hù)進(jìn)行了監(jiān)測(cè),了解豬瘟免疫情況,為秦州區(qū)今后的豬瘟免疫提供參考依據(jù)[1]。
1.1 樣本來(lái)源 2016年-2018年秦州地區(qū)16 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)32 家養(yǎng)殖場(chǎng)和32 個(gè)行政村,血清樣品8790份血清樣品;
1.2 試驗(yàn)器材及耗材 10-100μL 單道移液器,10-100μL8 道移液器,96 孔110。微量反應(yīng)板。
1.3 試劑及材料,豬瘟正向間接血凝試驗(yàn)抗原,陽(yáng)性對(duì)照血清,陰性對(duì)照血清,稀釋液,待檢血清。判定標(biāo)準(zhǔn)為當(dāng)檢測(cè)血清的抗體滴度≥1:32,判定為合格,小于則視為不合格。
1.4 檢測(cè)方法及依據(jù) 豬瘟免疫抗體檢測(cè)采用正向間接血凝試驗(yàn)進(jìn)行操作,本方法依據(jù)是參照《豬瘟診斷技術(shù)規(guī)程》NY/SY156-2000,將待檢血清(56℃水浴滅活30min),在血凝板每孔加入稀釋液50μL,再取待檢血清、陽(yáng)性對(duì)照血清、陰性血對(duì)照清各50μL 加入每排(每板8 排)的第1孔,然后用8 道移液器對(duì)每排的第1 孔進(jìn)行反復(fù)吹吸10-12 次,進(jìn)行倍比稀釋至第9 孔棄去50μL,陽(yáng)性對(duì)照血清、陰性血對(duì)照清倍比稀釋至第12 孔棄去50μL。然后各孔加入血凝抗原25μL(用前充分搖勻),將血凝板置于微量振蕩器上振蕩1~2min,封板膜封板,室溫或37℃下靜止1.5~2h,亦可室溫過(guò)夜。揭掉封板膜,將血凝板放在白紙上,在對(duì)照血清檢測(cè)結(jié)果均成立的前提下,記錄待檢血清檢測(cè)結(jié)果,接種豬瘟疫苗的豬群免疫抗體效價(jià)達(dá)到1:32(第5 孔),呈現(xiàn)“++”凝集為陽(yáng)性,待檢血清≤1:16 為陰性。
2.1 不同年份的豬瘟抗體水平 見(jiàn)表1。

表1 2016-2018年秦州區(qū)不同年份豬瘟免疫抗體水平比較
從表1的統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示可以看出,2016年-2018年的抗體水平分別是73.04%、82.01%和89.39%,逐年有明顯的上升趨勢(shì)。
2.2 不同規(guī)模養(yǎng)殖戶(hù)豬瘟免疫抗體 見(jiàn)表2。

表2 2016年-2018年秦州區(qū)不同規(guī)模養(yǎng)殖戶(hù)豬瘟免疫抗體水平比較
從表2統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示可以看出,2016年-2018年的規(guī)模場(chǎng)的抗體水平為87.75%,散養(yǎng)戶(hù)的抗體水平為71.79%,規(guī)模場(chǎng)與養(yǎng)殖戶(hù)之間豬瘟免疫抗體存在明顯差距,需要引起足夠的重視。
本次試驗(yàn)共對(duì)秦州區(qū)2016年-2018年的8790 份豬血清進(jìn)行豬瘟免疫抗體進(jìn)行了檢測(cè),豬瘟免疫抗體的合格數(shù)為7177 份,平均合格率為81.65%,總體水平較為理想,但縱向比較來(lái)看,規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的豬瘟免疫抗體水平為87.75%,散養(yǎng)戶(hù)的只有71.79%,相差15.96 個(gè)百分點(diǎn),極大的拉低了秦州區(qū)的防疫水平,這是造成秦州區(qū)豬瘟免疫抗體水平不是十分理想重要因素。原因分析得出,秦州區(qū)散養(yǎng)戶(hù)防疫意識(shí)淡薄,對(duì)于防疫抱有僥幸心里,認(rèn)為發(fā)病的可能性極小,不防疫不會(huì)對(duì)養(yǎng)豬造成多大的損失,有的甚至拒絕配合防疫員開(kāi)展免疫工作,這給防疫工作造成了極大的困難。
隨著近年來(lái)秦州區(qū)養(yǎng)豬業(yè)的不斷壯大,規(guī)模場(chǎng)管理水平有了明顯的提高,規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)有了專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行飼養(yǎng)管理,還聘請(qǐng)專(zhuān)業(yè)的豬場(chǎng)獸醫(yī)制定嚴(yán)格免疫程序進(jìn)行免疫,同時(shí)還會(huì)定期的采集樣品送至秦州區(qū)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室對(duì)免疫抗體水平進(jìn)行檢測(cè)監(jiān)督,因此,在2018年規(guī)模場(chǎng)的豬瘟免疫抗體水平達(dá)到了96.02%(1738/1810)。散養(yǎng)戶(hù)養(yǎng)殖條件有限,管理水平低,主要靠防疫員來(lái)進(jìn)行防疫,而秦州區(qū)的防疫員隊(duì)伍中大多數(shù)防疫員為半路出家,專(zhuān)業(yè)知識(shí)和操作技能較規(guī)模場(chǎng)的駐場(chǎng)獸醫(yī)水平還有一定的差距,但隨著秦州區(qū)今年來(lái)不斷加強(qiáng)防疫隊(duì)伍建設(shè),組織專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員對(duì)防疫員進(jìn)行定期的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和實(shí)踐技能培訓(xùn),因而,秦州區(qū)2018年的豬瘟免疫抗體水平從2016年的60.8%上升至了80.00%,上升了20.8個(gè)百分點(diǎn)。這對(duì)秦州區(qū)的防疫工作是一個(gè)極大的鼓舞。
《2017年國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》中,將高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟不再列入強(qiáng)制免疫計(jì)劃,高致病性豬藍(lán)耳病在秦州區(qū)也不再進(jìn)行免疫,而豬瘟免仍在進(jìn)行,這也是豬瘟免疫抗體水平提高的重要原因之一。因?yàn)樵诖呵飪杉炯蟹酪咂趦?nèi)同時(shí)進(jìn)行高致病性豬藍(lán)耳病和豬瘟的免疫時(shí),有臨床實(shí)踐表明,高致病性豬藍(lán)耳病病毒處于活躍期時(shí),會(huì)對(duì)豬瘟免疫抗體存在抑制和干擾[2]。因此,高致病性豬藍(lán)耳病免疫退出秦州區(qū)春秋兩季及集中免疫的歷史舞臺(tái),也變向的提高了秦州區(qū)的豬瘟抗體免疫水平。