“益氣調血，扶本培源”藥線灸對輕度認知功能障礙患者血清iNOS、GSH-PX的影響

羅本華 黃羽 周路 芮靖琳 陳周婧 王燕 張亞飛

(廣西中醫藥大學 1針灸推拿學院，廣西 南寧 530001；2第一臨床醫學院；3湖南永州職業技術學院；4深圳市第七人民醫院；5湖南永州職業技術學院附屬醫院)

輕度認知功能障礙(MCI)是以記憶障礙或其他認知功能損害為主要特征，介于正常老化和輕度老年癡呆間的狀態，但并未影響患者的社會及工作職能，未達到癡呆的診斷標準〔1〕。MCI是癡呆早期診斷研究中最活躍的部分，為癡呆癥的防治提供了一個機會〔2〕，是目前獲得公認的唯一可以防治、逆轉的老年性癡呆類型。中醫針灸、民族醫藥對本病防治做了許多創新，本文旨在探討“益氣調血，扶本培元”壯醫藥線灸對MCI患者血清誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)含量的影響及其改善認知功能的抗氧化應激損傷機制。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2015年8月至2017年11月廣西中醫藥大學第一附屬醫院、仁愛分院和附屬瑞康醫院健康體檢科、神經內科和針灸門診及社區養老院就診的年齡60歲以上的MCI患者(n=66，MCI組)，男30例，女36例，平均(64.57±6.84)歲；從1 046例60歲以上健康體檢者中隨機抽取66例為對照組；兩組性別、年齡差異無統計學意義(P>0.05)。MCI組按隨機數字表法分成藥線灸組和藥物對照組各33例；經臨床實驗脫落后各組均得到30例，藥線灸組男12例，女18例，年齡(75.06±7.75)歲，病程(12.68±2.85)；藥物治療組男14例，女16例，年齡(72.06±8.34)歲，病程(14.37±2.64)。兩者性別、年齡、病程差異均無統計學意義(P>0.05)。

1.2納入標準及排除標準 納入標準：①MCI病例納入標準采用Petersen等〔1〕制定的標準：有記憶障礙或其他認知障礙且至少持續3個月以上(有家屬或知情者證實)；簡易精神狀態量表(MMSE)〔3〕：中學以上25～27分，小學21～24分，文盲18～20分；記憶力或其他認知功能減退尚未達到癡呆的診斷標準，臨床癡呆量表(CDR) 0.5分；日常生活活動基本自理；排除其他可引起腦功能衰退的系統疾病；受試者自愿簽署知情同意書；對本研究的意義有正確認識，有良好的依從性；既往能閱讀簡單的報紙文章，意識清醒，無語言障礙，能配合完成相關量表檢查。②對照組納入標準：為同期醫院健康體檢科和養老院人員中，除外可能影響認知功能的疾病；均未發現認知功能衰退及日常生活能力損害，不能診斷為癡呆；MMSE 28～30分；CDR為0.0分；無嚴重心、肝、腎等內科疾患及精神科疾病。排除標準：①據《精神障礙診斷和統計手冊》第Ⅳ版標準〔4〕，診斷為老年性癡呆的患者：MMSE檢查(中學以上≤24分，小學≤20分，文盲≤17分)；CDR為1.0～2.0分。②血管性癡呆、多發梗塞性癡呆或皮質下動脈硬化性腦病患者；③嗜酒、長期服用抗精神病藥物、嚴重頭部外傷史者；④有影響中樞神經系統功能的內科疾病，如甲狀腺疾病，貧血，維生素B12缺乏、葉酸缺乏，控制不佳的糖尿病，嚴重心、肝、肺、腎等臟器疾病者；⑤嚴重抑郁癥、精神分裂癥等精神疾病者；⑥不能配合認知功能檢查者;⑦生化指標不完善者。

1.3臨床干預 ①藥線灸組：采用“益氣調血，扶本培源”壯醫藥線灸療法治療。取穴：膻中、中脘、氣海、血海、足三里、外關。采用2號藥線(直徑0.5 mm)，按《壯醫藥線點灸療法》〔5〕中的施灸方法點灸，輕刺激手法，按“先上后下、先軀干再四肢、先陽后陰”次序點灸以上相應腧穴各3壯。均隔日1次，共15次。②藥物對照組：口服鹽酸多奈哌齊(批準文號：國藥準字H20030583，產品規格：5mg，陜西方舟制藥有限公司)，治療用量5 mg/d，1次/d，晚上睡前口服，療程為1個月。

1.4檢測指標 均于清晨抽取靜脈血，分離血清，-20°冰凍備檢。MCI組均于治療前1 d和治療后1 d各檢測血清iNOS、GSH-PX含量，檢測方法均為酶聯免疫吸附試驗，iNOS、GSH-PX試劑盒均購自武漢貝茵萊生物科技有限公司。

1.5統計學方法 采用SPSS16.0軟件進行配對樣本t檢驗、獨立樣本t檢驗、χ2檢驗。

2 結 果

2.1MCI組和對照組血清iNOS、GSH-PX比較 MCI組iNOS含量顯著高于對照組(P<0.001)，而GSH-PX含量顯著低于對照組(P<0.001)。見表1。

表1 兩組血清iNOS、GSH-PX含量比較

2.2MCI組臨床干預結果 治療前后兩組iNOS、GSH-PX含量組間比較差異均無統計學意義(P>0.05)。兩組治療前后自身比較，血清iNOS含量顯著降低、GSH-PX含量顯著升高(均P<0.001)。見表2。

表2 治療前后兩組血清iNOS、GSH-Px濃度比較

3 討 論

MCI就概念及臨床表現，應歸屬于中醫學的“健忘”范疇，中醫理論認為，情志失暢，多臟腑失調，以致“憶、意、志、思、慮、智”的意識思維活動功能受損，是健忘的主要病因，故多臟腑失調、本虛標實、虛實夾雜是本病病機〔6〕。本實驗使用的藥線灸干預方法是以老年癡呆為多臟腑失調、上中下三焦多相兼發病的大量病例流行性調查基礎上〔7〕，并以癡呆三焦氣化失司相關論的新病機觀和由此確立的“益氣調血，扶本培元”治則〔8〕為基礎，結合了具有“養生保健、抗老防衰的悠久歷史、卓越功用”的壯醫藥線灸刺激而成；對延緩和阻止血管性癡呆(VD)和MCI的發生及防治取得成效〔9，10〕。

自由基損傷學說是衰老的公認發病機制，認為衰老過程中的退行性變化是由于在機體組織細胞正常代謝過程中不斷產生的自由基積累，結果可與細胞中的各種成分(如膜磷脂、蛋白質、核酸等)發生氧化，造成細胞結構損傷和功能代謝障礙，導致神經性退行性病變發生。體內自由基防御能力隨年齡的增長而減弱。自由基損傷學說也是近年來MCI發病機制的研究熱點之一。神經變性性疾病與自由基代謝失衡有關〔11〕；GSH-PX是機體內廣泛存在的催化過氧化氫分解的一種酶，對細胞膜結構和功能的完整性有保護作用，維持機體內正常的活性氧水平。iNOS是病理型一氧化氮合酶，是影響學習記憶的關鍵酶，激活后產生大量一氧化氮，引起細胞毒性作用。多奈哌齊是乙酰膽堿酯酶抑制劑，能選擇性抑制中樞神經系統中乙酞膽堿的降解，增加神經細胞突觸間隙乙酞膽堿濃度，改善認知功能障礙，是目前治療老年性癡呆、MCI等主要一線治療用藥。研究也證實多奈哌齊能減輕自由基導致的神經變性作用，保護海馬神經元免受損傷，達到改善擬VD大鼠的學習、記憶目的。研究發現〔12〕：多奈哌齊對擬癡呆大鼠海馬神經元的保護作用機制可能是提高GSH-PX和過氧化氫酶的活性來減輕神經元損傷。Butterfield等〔13〕研究得出蛋白質氧化對MCI向癡呆轉化具有重要意義。Pratico等〔14〕發現，與認知功能正常的老年對照組相比較，MCI患者的腦脊液、血漿和尿液中脂質過氧化的增強，也預示其有發展為AD的趨勢。故血中GSH-PX、超氧化物歧化酶及iNOS等生化指標含量的變化不僅是反映MCI患者病情的重要指標之一，也可視為MCI的臨床療效評判標準，在MCI的防治中具有重要的意義。本研究提示MCI組存在廣泛而明確的氧自由基損傷發病機制；本臨床干預實驗證實“益氣調血，扶本培源”藥線灸能顯著改善氧自由基損傷，有助于MCI的臨床療效，改善膽堿能神經元認知損傷作用不差于多奈哌齊〔15〕。與劉存志等〔16〕、李談等〔17〕的“益氣調血，扶本培源”針法結果一致。因而，本研究確定該藥線灸法具有顯著抗MCI氧自由基損傷機制的作用，對于延緩、阻止MCI的發生及MCI的防治具有非常重要的意義，更對整個老年期癡呆的早防早治具有重要社會意義。