蘇氏圓腹人工繁殖及雜交子代胚胎發育觀察

袁宗偉，陳 詔，徐鴻飛，盧飛麟，楊賓蘭，滕 云，溫守歐

(廣西壯族自治區水產引育種中心，廣西 南寧 530031)

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.2 試驗方法

表1 不同處理蘇氏圓腹人工催產催產素的使用劑量Table 1 Different artificial oxytocin doses for P.sutchi

1.2.3 魚苗孵化與出池管理 人工授精后，將粘附受精卵的網片(布卵密度為1萬～5萬粒/m2)均勻攤布于規格為3.0 m×5.0 m×1.0 m的育苗池中。固定網片通過懸掛與池底成一定角度，孵化期間通過水位管調控水位，保持池水深度30～40 cm，每個育苗池中布置氣石6～8只以保證溶氧，整個孵化過程采用微流水孵化，出苗前加大換水量。

當胚胎發育至原腸中期(受精6～8 h)時，從附著受精卵的網片上隨機剪取 3 cm×3 cm的網布放入白瓷盆中檢查，將壞卵和空心卵剔除計數后統計已受精卵數，并計算受精率(已受精卵數占總卵數的百分比)。魚苗孵出后計算孵化率(為孵出魚苗數占受精卵的百分比)，出膜完畢后立即下塘，孵化魚苗按親本配對分開培育(不區分人工授精方法)，培育40～45 d后出池銷售，統計苗種成活率(為培育40～45 d出池苗數占下塘魚苗數的百分比)。

1.2.4 胚胎發育及胚后發育觀察 黑色♂×粉色♀雜交子代受精卵受精后，每次均用羽毛隨機從網片上刮取100粒受精卵，采用Miotic168KL解剖鏡及Miotic200攝像系統進行連續觀察和拍攝，受精后至原腸胚期每隔10～15 min觀察1次，原腸胚期至出膜期間隔1～2 h觀察1次，詳細記錄各發育時期的重要形態特征，并用Photoshop 7.0處理圖片。

2 結果與分析

2.1 催產素不同劑量的催產與孵化效果

人工催產后按照親魚產卵情況分為全產、半產和未產。全產指人工授精后魚體腹部已干癟，擠壓腹部無卵子流出；半產指人工授精后魚體腹部半癟，但擠壓腹部仍有部分卵子流出；未產指人工授精后魚體腹部仍膨大，但擠壓腹部不能擠出卵子。從表2可知道，僅使用DOM+LHRH-A2催產的親魚沒有產卵，使用DOM+LHRH-A2+HCG混合后注射可以獲得較好的催產效果；第2次注射后8～12 h內進行人工授精均能受精和孵化。其中，以(DOM 8 mg+LHRH-A210 μg+HCG 800 IU)/kg的催產效果最佳，最佳人工授精時間(效應時間)為第2次注射后8～10 h，受精率、孵化率分別達95.3%和83.5%。

2.2 不同人工授精方法的孵化效果

2.3 不同體色親魚所產苗種的成活率

2.4 胚胎發育及胚后發育特征

表2 蘇氏圓腹的催產與孵化效果Table 2 Oxytocin and hatching effects of P.sutchi

表3 不同人工授精方法蘇氏圓腹的孵化效果Table 3 Hatching effects of different artificial insemination methods on P.sutchi

表4 不同體色蘇氏圓腹所產苗種的出池成活率Table 4 Out-pond survival rate of fries produced by P.sutchi with different body color

表5 28℃條件下蘇氏圓腹胚胎發育時序及主要特征Table 5 Embryonic development time and major characters of P.sutchi at 28℃

注：1，受精卵；2，受精15 min；3，分裂前；4，2細胞；5，4細胞；6，8細胞；7，16細胞；8，32細胞；9，64細胞；10，128細胞；11，多細胞；12，囊胚早期；13，囊胚晚期；14，原腸早期；15，原腸中期；16，原腸晚期；17，神經胚期；18，胚孔封閉；19，體節出現；20，眼基出現；21，眼囊期；22，尾芽期；23，耳囊期；24，晶體出現；25，心臟搏動；26，孵出前期；27，破膜；28，剛出膜；29，孵出1 d；30，孵出3 d。

圖1黑色♂×粉色♀雜交子代的胚胎發育過程
Fig.1 Embryonic development process of black ♂×pink ♀ hybrid progenies

2.4.2 仔魚期 剛出膜的仔魚苗身體無色透明，腹部卵黃囊較大，占其身體的1/2以上(圖1-28)，此時魚苗的游泳能力弱，貼附在網片或其他物體上，偶作間歇上下運動，大多數棲于池底，部分隨氣石充氣形成的水流翻滾，體長3.0 mm左右；10～12 h后活力增加，尾鰭由圓弧形逐漸向上尾形發育，心臟搏動加強，上下頜形成并可活動，體長4.0 mm以上，偶作平游運動；24 h后，在頜部左右長出長短各一的須2對，并不斷生長，長須可至消化道末端，卵黃囊縮小，此時體長5.1 mm(圖1-29)；2 d后，身體伸長，達6.0 mm，可長時間作平游運動，胃囊、腸道、鰓等器官基本發育成形，上下頜各長出一排尖齒，尾鰭在中部出現分叉，卵黃幾近吸收完。

2.4.3 稚魚期 2.5～3 d后消化道貫通，仔魚開口攝食，口裂達230 μm，上下頜不斷咬合，色素逐漸出現，在消化道后端和肛門之間出現紅色斑塊(圖1-30)；4 d后，尾鰭由上尾向正尾轉變，背鰭和腹鰭開始生成；9～10 d稚魚達15 mm，此時可見鰾點，尾鰭轉變成正尾，體色素明顯可辨；各器官逐漸發育完全。

3 結論與討論

3.1 催產素不同劑量及效應時間對蘇氏圓腹催產效果的影響

3.2 不同人工授精方法對蘇氏圓腹受精率的影響

3.3 不同體色雜交蘇氏圓腹的受精卵、胚胎發育及仔稚魚發育特性