仔豬豬瘟病毒和豬圓環(huán)病毒2型混合感染的診斷

王 月，李克鑫，李克欽，牛緒東，張?jiān)穑瑒⒔ㄖ?/p>

（1．山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271018；2.山東德信生物科技集團(tuán)，山東 惠民 251700；3.濟(jì)南鑫寶星動(dòng)物藥業(yè)有限公司，山東 濟(jì)南 250022）

豬瘟是由豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus，CSFV)引起豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染性和致死性疾病[1]。豬圓環(huán)病毒病(Porcine Circovirus Diseases)是 由豬圓 環(huán) 病 毒2型(Porcine Circovirus type 2，PCV2)感染引起的仔豬多種綜合征[2]。豬圓環(huán)病毒病是一種條件性疾病，該病病毒主要侵害豬的免疫系統(tǒng)，可造成機(jī)體免疫力下降，從而繼發(fā)如豬偽狂犬病、豬瘟、豬肺炎支原體和豬細(xì)小病毒病等疾病，與之發(fā)生混合感染，加重疾病的發(fā)生和發(fā)展，嚴(yán)重危害著豬群的健康程度[3]。

2018年4月，對(duì)山東省菏澤市某養(yǎng)殖場(chǎng)一例2月齡重約為25 kg的病死仔豬進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查，病理剖檢、PCR檢測(cè)和PT-PCR檢測(cè)，最終經(jīng)實(shí)驗(yàn)室確診為CSFV和PCV2混合感染。

1 發(fā)病情況及癥狀

該場(chǎng)飼養(yǎng)了230頭仔豬、育肥豬和母豬，自2018年2月中下旬開(kāi)始至4月的2個(gè)月內(nèi)，由于正處冬春交替之際，每日溫差較大，共有120頭仔豬接連出現(xiàn)不同程度的發(fā)病癥狀，發(fā)病后死亡了57頭，發(fā)病率為52.17%，死亡率為24.78%，病死率為47.50%。發(fā)病初期，仔豬精神沉郁、采食量明顯下降、腹瀉、咳嗽、氣喘，全身皮膚呈現(xiàn)大量出血斑點(diǎn)（圖1）。耳朵發(fā)紺，數(shù)天后死亡。在此發(fā)病期間，畜主曾對(duì)仔豬用過(guò)氨芐西林鈉、替米考星、氟苯尼考、頭孢類藥物和金銀花等中藥針劑進(jìn)行治療，但病情并未好轉(zhuǎn)。

2 剖檢變化

圖1 全身皮膚呈現(xiàn)大量出血斑點(diǎn)

圖2 腸系膜淋巴結(jié)出血、腫大

圖3 扁桃體壞死

病死豬腹股溝淋巴結(jié)腫大，橫斷面凸起，邊緣鈍圓，但不出血，胸前淋巴結(jié)出血，下頜淋巴結(jié)壞死，腸系膜淋巴結(jié)出血、腫大（圖2），胃門(mén)淋巴結(jié)出血；扁桃體表面彌漫大量灰黃色壞死點(diǎn)（圖3）；軟腦膜出血、水腫；心內(nèi)淤血（圖4），剪開(kāi)左心室，心內(nèi)膜正常，心冠脂肪萎縮、水腫、潮紅；膀胱黏膜充血潮紅（圖5）；氣管環(huán)狀出血，管內(nèi)含有氣泡與黏液（圖6），肺出血、淤血、水腫、肝樣變、胰樣變、肉樣變（圖7）；肝臟表面散在大小不均的灰白色壞死點(diǎn)（圖8）；腎髓質(zhì)部水腫，積尿，腎皮質(zhì)部貧血性出血、淤血、腫大，腎乳頭出血、水腫（圖9）；胃出血、潰瘍、壞死（圖10）；腸道出血（圖11）；脾腫大（圖12）；皮下出血（圖13）。

圖4 心內(nèi)淤血

圖5 膀胱黏膜充血潮紅

圖6 氣管內(nèi)含有氣泡

圖7 肺出血、淤血、水腫

圖8 肝臟表面壞死點(diǎn)

圖9 腎貧血性出血

圖10 胃出血、潰瘍、壞死

圖11 腸道出血

圖12 脾腫大

圖13 皮下出血

圖14 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

無(wú)菌采取送檢病死豬的腦、下頜淋巴結(jié)、胸前淋巴結(jié)、扁桃體、肝臟、肺臟和脾臟接種于麥康凱血瓊脂、巧克力瓊脂以及肉湯培養(yǎng)基上，在37 ℃條件下培養(yǎng)48 h，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，結(jié)果未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)。病料組織提取核酸進(jìn)行CSFV、PRRSV、PRV 和PCV2檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)圖14，CSFV和PCV2核酸出現(xiàn)明顯條帶(599 bp和785 bp)。

4 結(jié)論

根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查和病理剖檢變化，初步診斷為豬瘟、豬偽狂犬病、豬呼吸與繁殖綜合征、豬圓環(huán)病毒感染。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室PCR的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)了PCV2為陽(yáng)性，PRVgE為陰性，而RT-PCR的檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)CSFV為陽(yáng)性，PRRSV為陰性，最終診斷該場(chǎng)仔豬為豬瘟病毒和豬圓環(huán)病毒2型的混合感染。

5 討論與小結(jié)

發(fā)病豬場(chǎng)未制定出一個(gè)詳細(xì)的免疫計(jì)劃是導(dǎo)致本次疫病產(chǎn)生的根本原因。經(jīng)問(wèn)診畜主免疫情況，該場(chǎng)僅對(duì)母豬接種了一次豬瘟、豬丹毒和豬肺疫三聯(lián)疫苗，而仔豬并未接種過(guò)任何疫苗，仔豬母源抗體消失后，給病毒的侵入提供了機(jī)會(huì)，加之正值冬春交替之季，氣溫忽冷忽熱，對(duì)仔豬造成一定的應(yīng)激，加重了感染各類疫病的可能性，最終造成了豬瘟病毒和豬圓環(huán)病毒的混合感染。

從剖檢上看，病死豬的扁桃體、腎臟病變比較明顯，淋巴結(jié)和肺臟的變化也比較嚴(yán)重。豬扁桃體是豬瘟病毒最先入侵的器官之一，然后是內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴器官及骨髓組織[5]。豬圓環(huán)病毒感染可導(dǎo)致外周血中單核細(xì)胞增加，CD4T細(xì)胞和B細(xì)胞數(shù)量減少，產(chǎn)生免疫抑制，給其他病原體的侵入提供了便利條件，導(dǎo)致了本病例中豬圓環(huán)病毒與豬瘟病毒的混合感染。

對(duì)于該病應(yīng)采取的措施，首先要求畜主隔離發(fā)病豬并淘汰嚴(yán)重者，使用三氯異氰尿酸鈉進(jìn)行豬舍帶豬消毒。其次，全群緊急免疫接種豬瘟細(xì)胞苗，并在飼料中添加清瘟敗毒散和阿莫西林預(yù)混劑拌料，一周后豬群基本趨于正常。

根據(jù)該豬場(chǎng)發(fā)病情況制定了防治措施，2周后電話訪問(wèn)，病情基本得到控制。但作者認(rèn)為，不管任何商品豬場(chǎng)，仔豬的疫苗防控是至關(guān)重要的，應(yīng)制定合理的免疫程序。豬瘟發(fā)生后疫苗的緊急免疫接種是十分必要的，并且越早越好（疫苗注射到機(jī)體后產(chǎn)生保護(hù)性抗體需要最少4 d時(shí)間），這樣可以有效地減少因仔豬死亡而帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失。

當(dāng)前豬瘟病毒的感染仍然非常普遍。由于豬瘟疫苗的不規(guī)范應(yīng)用及其他的一些原因，導(dǎo)致豬瘟病毒感染的病情變化越來(lái)越復(fù)雜，防控難度越來(lái)越大，混合感染病例也越來(lái)越多，這應(yīng)引起政府管理部門(mén)和畜牧獸醫(yī)工作者的高度重視。各養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)根據(jù)自己場(chǎng)具體的疫病發(fā)生情況，制定切實(shí)可行的防治措施。