應用酶聯免疫吸附試驗和磁微粒化學發光免疫法檢測孕婦乙型肝炎表面抗原的意義

藍唯

【摘 要】目的：分析酶聯免疫吸附試驗和磁微粒化學發光免疫法檢測孕婦乙型肝炎表面抗原的意義。方法：選取2018年1月至12月期間我院收治的80例乙型肝炎孕婦，均采取酶聯免疫吸附試驗和磁微粒化學發光免疫法檢測乙肝表面抗原，分析兩種檢測方法結果。結果：80份樣本中酶聯免疫吸附法檢出陽性64份，陽性率為80.0%，電化學發光免疫檢測出陽性77份，陽性率為96.25%，兩種檢出陽性率差異顯著（P<0.05）。結論：對于孕婦乙型肝炎表面抗原檢測中磁微粒化學發光免疫檢測法準確性高于酶聯免疫吸附法，臨床可優選使用。

【關鍵詞】酶聯免疫吸附試驗;磁微粒化學發光免疫法檢測;乙型肝炎表面抗原

【中圖分類號】R512.6【文獻標識碼】B【文章編號】1672-3783（2019）06-03--02

慢性乙型肝炎（HBV）為一種常見的傳染性疾病，相關部分統計數據顯示我國目前具有約1億人受乙肝病毒影響[1]，使得慢性乙肝成為威脅人民生命健康的殺手。目前慢性乙肝的檢測方法主要為酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、磁微粒化學發光免疫法（CLIA）等技術，ELISA用于HBsAg定性檢測，CLIA用于定量檢測，因此兩種檢測方法陽性率如何為本次研究重點。

1 資料與方法

1.1 基礎資料來源

2018年1月至12月期間在我院接受治療的80例乙型肝炎病人，患者相關診斷均符合2015版中華醫學會感染病學分會制定的《慢性乙型肝炎防治指南》的相關標準[2]。80例孕婦年齡20-41歲，平均（32.0±2.6）歲，孕周16-33周，平均（22.3±5.2）周，本次患者均同意相應的檢測方法并與我方簽訂相應協議。

1.2 方法

抽取清晨空腹肘靜脈外周血5ml于具有抗凝劑的試管中，室溫下靜止約1h后離心，離心設置為4000r/min，離心5min，離心后吸取上清液，分為A、B試管中，-70℃保存。A試管使用ELISA檢測，所用試劑為上海榮盛生物藥業有限公司生產，酶標儀及洗板機為瑞士帝肯，嚴格按照說明書操作。B試管使用CLIA方法檢測，儀器為鄭州安圖公司生產的A2000化學發光儀，試劑為鄭州安圖生物工程有限公司生產的磁微粒化學發光法乙肝表面抗原定量檢測試劑盒，檢測按照試劑盒方法及步驟。

1.3 陽性結果判斷標準

ELISA檢測法：標本的OD值≥COV為陽性，CLIA法檢測后數值>0.05IU/ml為陽性，確認試驗以抑制率>50%為陽性。

1.4 數據分析

組間數據納入統計學分析軟件SPSS20.0中分析，X2檢驗分析計數資料，組間數據比價后P<0.05為差異明顯。

2 結果

80份樣本中酶聯免疫吸附法檢出陽性64份，陽性率為80.0%，磁微粒化學發光免疫檢測出陽性77份，陽性率為96.25%，兩種檢出陽性率差異顯著（X2=1.16，P=0.026）。

3 討論

乙型肝炎病毒是一種具有強傳染性的病毒，一般母嬰為該種病毒傳染的主要途徑，嬰兒感染該種病毒后可能出現流產、早產以及胎兒畸形等嚴重結果，因此對于孕婦人人員進行乙型肝炎病毒檢測尤其重要，其直接影響新生兒接受乙型肝炎疫苗免疫策略。

目前監測乙肝的方法較多，使用頻率較高的方法為酶聯免疫吸附試驗、磁微粒化學發光免疫法檢測、膠體金免疫層析發等。在我國大部分醫院監測乙型肝炎表面抗原一般采取酶聯免疫吸附試驗，但該種檢測方式要求樣品濃度較高，而臨床樣本濃度較低使得檢測敏感性低從而出現漏診對于患者治療帶來不良影響。膠體金免疫層析分析方法是檢測在酶聯免疫吸附基礎之上的一種檢測方式，該種檢測方式操作簡單，無需特殊設備支持均可獲得該項效果，因此在乙型肝炎表面抗原的檢測中較多使用，但該種檢測方式也存在一定短板，容易出現假陽性和假陰性，導致臨床檢測結果不穩定。磁微粒化學發光免疫法檢測一般為儀器自動完成檢測，具有較高靈敏度、準確性且無輻射，對于檢測人員安全性高。該技術采用雙抗體夾心法原理進行檢測，用抗-HBs抗體包被磁微粒，用辣根過氧化物酶標記的抗-HBs抗體制備酶結合物，通過免疫反應形成抗體-抗原-抗體-酶復合物，該復合物催化發光底物發出光子，發光強度與HBsAg含量成正比。檢測過程中樣品在儀器中具有緩沖液處理，利用表面活性劑能夠增加脂類和蛋白質的溶解度的特點，減少非特異性物質的結合，并清除未結合的物質，利用緩沖液增強離子強度，并提供弱堿性環境，使吸附在載體上的非特異性抗體、抗原或其他蛋白質成分遠離它們的等電點，轉變為帶更多負電荷的離子，有利于其溶解而被徹底沖洗干凈，使得檢測的陽性率獲得保證。酶聯免疫吸附試驗不及發光檢測法具有高靈敏度和可重復性，因此具有較高漏檢率及假陽性，加上酶的純度和反應過程容易受到環境因素影響，使得結果準確度不高。

在本次檢測分析中80例乙型肝炎孕婦分別采取酶聯免疫吸附試驗、磁微粒化學發光免疫法檢測，結果酶聯免疫吸附試驗陽性率為80.0%，磁微粒化學發光免疫法檢測陽性率為96.25%，提示磁微粒化學發光免疫法檢測更加理想，結果與前人報道基本一致[3]。總之，經本次對比分析我們認為對于孕婦乙型肝炎表面抗原的檢測中使用磁微粒化學發光免疫法檢測陽性率明顯高于酶聯免疫吸附試驗，臨床可根據具體情況優先選擇。

參考文獻

Yao QQ，Dong XL，Wang XC，et al. Hepatitis B virus surface antigen（HBsAg）-positive and HBsAg-negative hepatitis B virus infection among mother-teenager pairs 13 years after neonatal hepatitis B virus vaccination[J]. Clin Vaccine Immunol，2013，20（2）：269-275.

中華醫學會肝病學分會，中華醫學會感染病學分會. 慢性乙型肝炎防治指南（2015 年更新版）[J]. 臨床肝膽病雜志，2015，31（12）：1941-1960.

邱文杰. 酶聯免疫吸附與磁微粒化學發光法檢測乙型肝炎病毒的對比研究[J].世界臨床醫學，2016，，10（17）：241-242.