液態奶中的三聚氰胺檢測方法

曹愛巧 譚磊 吳雯娟 黃婷 羅燕

摘 ?要：研究建立了使用液相色譜串聯質譜法測定液態奶中的三聚氰胺檢測方法。用二乙胺乙腈水溶液超聲提取液態奶中的三聚氰胺，離心后進行過濾，濾液不需要凈化，直接用氮氣吹干，20%甲醇溶液復溶。驗證結果滿足SN/T 0001-93的要求，具有較好的精密度和準確度，該方法具有特異性強、前處理簡單等特點，適合液態奶中三聚氰胺的定量測定。

關鍵詞：液態奶;三聚氰胺;液相色譜串聯質譜

中圖分類號：S859.84 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2019）05-0056-03

三聚氰胺俗稱密胺、蛋白精，是一種三嗪類含氮雜環有機化合物，常被用作化工原料[1]。三聚氰胺對人體有害，微溶于水，無味，白色單斜晶體，可溶于甲醇、甲醛和乙酸等，不溶于丙酮和醚類，不能作為食品添加劑使用或是用于食品加工。但是，不法商人為了提高食品或飼料檢測中蛋白質含量指標，借助三聚氰胺的高含氮量，把其摻進食品或飼料中[2]。非法添加三聚氰胺會對人的腎臟和膀胱等器官產生有害作用，引發結石[3]。中華人民共和國國家衛生健康委員會、工業和信息化部和農業農村部等五部委聯合發布公告，制定了三聚氰胺在乳與乳制品中的臨時管理限量值，其中規定液態奶（包括原料乳）、奶粉和其他配方乳粉中三聚氰胺的限量值為2.5 mg/kg，高于2.5 mg/kg的產品一律不得銷售。含乳15%以上的其他食品中三聚氰胺的限量為2.5 mg/kg，高于2.5 mg/kg的產品一律不得銷售[4-5]。

三聚氰胺在高溫下可能會分解，放出氰化物，在強酸或強堿環境下，還會發生水解。測定三聚氰胺的方法有高效液相色譜法[6-7]、氣相色譜質譜法[8]和高效液相色譜串聯質譜法，高效液相色譜法的靈敏度較低，且無法提供被檢測物的結構信息，一般常作為篩選方法。氣相色譜質譜法和高效液相色譜串聯質譜法能夠進行確證分析。中華人民共和國國家標準GB/T22388-2008《原料乳與乳制品中三聚氧胺檢測方法》規定了高效液相色譜法、氣相色譜質譜法和高效液相色譜串聯質譜法測定三聚氰胺的方法，但均需對提取液進行固相萃取凈化。本文旨在對液態奶中三聚氰胺高效液相色譜串聯質譜法進一步探討。本研究使用二乙胺乙腈水溶液超聲提取液態奶中的三聚氰胺，離心后進行過濾，濾液不需要凈化，直接用氮氣吹干，20%甲醇溶液復溶。消除牛奶基質的影響，增強了抗干擾能力，降低了檢出限和提高了定量重現性。該法較為簡便，縮短了分析時間，降低了成本。

1 ?試驗部分

稱取2.00 g試樣，置于15 mL刻度試管中，加入7 mL乙腈，渦旋振蕩1 min，加入1 mL二乙胺，用水定容到10 mL，渦旋振蕩1 min，超聲提取15 min，8 000轉/min冷凍離心8 min（4 ℃），過濾后備用。移取 ? ? 2 mL在80 ℃下氮氣吹干，1 mL的20%甲醇溶液復溶，供液相色譜串聯質譜上機測定。

2 ?結果與討論

2.1 標準曲線

按方法條件設置儀器參數，配制一系列濃度的標準樣品溶液（0.01 μg/mL、 ? ? ? 0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL和 ?0.5 μg/mL），待儀器基線穩定后，對系列標準樣品溶液進行測定，繪制標準曲線，其相關系數r=0.998592。

2.2 方法檢出限確定[9]

以空白牛奶樣品為基質，一個陽性添加濃度C（10.0 μg/g），按照方法進行前處理，進行上機測定，測得信噪比S/N=19.49，可計算檢出限為0.0015 μg/g。計算公式如下：

檢出限（Method Detection Limit，MDL）（μg/g）=3C/（S/N）

2.3 方法精密度和回收率試驗

以空白牛奶樣品為基質，進行加標回收試驗，加標濃度分別為0.01 mg/kg、0.05 mg/kg和0.2 mg/kg。將加標樣品和空白樣品按方法進行前處理[9]，上機測試，結果見表1、表2和表3。

2.4 結論

經過上述試驗驗證，本方法用于液態奶中三聚氰胺殘留的測定，一系列濃度的標準樣品溶液（0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL和0.5 μg/mL）的標準曲線相關系數r=0.998592;方法檢出限確定為0.001 5 μg/g，符合標準方法的要求;0.01 mg/kg、0.05 mg/kg和0.2 mg/kg ? 加標試驗變異系數分別為5.07%、2.39%和4.82%，加標試驗回收率范圍分別為88.10%～100.50%、97.86%～104.54%和87.79～102.74%。驗證結果滿足中華人民共和國國家標準SN/T 0001-93的要求，具有較好的精密度和準確度，該方法具有特異性強、前處理簡單等特點，適合液態奶中三聚氰胺的定量測定。

參考文獻：（9篇，略）