結(jié)核分枝桿菌/利福平耐藥實(shí)時熒光定量核酸擴(kuò)增檢測與痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果比較分析

徐婧　孔維順

doi：10.3969/j .issn.1007-614x.2019.01.092摘要 目的：探討結(jié)核分枝桿菌/利福平耐藥實(shí)時熒光定量核酸擴(kuò)增檢測（Xpert MTB/RIF）與痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果的差異。方法：收治檢測的可疑肺結(jié)核患者30例進(jìn)行Xpert MTB/RIF和痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果：患者30例經(jīng)過跟蹤觀察，確診肺結(jié)核21例，排除肺結(jié)核9例。痰液涂片抗酸染色：30例患者找到抗酸桿菌10例，陽性檢出率33.30A（10/30），正確診斷率47.6%（10/21）;痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果：痰培養(yǎng)陽性15例，陽性檢出率50.0%（15/30），正確診斷率71.4%（15/21），藥敏試驗(yàn)利福平耐藥4例，耐藥率19.0% （4/21）。Xpert MTB/RIF：結(jié)核分支桿菌陽性21例，陽性檢出率70.0%（21/30），正確診斷率100.0%（21/21）;利福平耐藥3例，耐藥率14.3% （4/21）。結(jié)論：結(jié)核分枝桿菌/利福平耐藥Xpert MTB/RIF與痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)均是診斷結(jié)核病的重要手段，Xpert MTB/RIF檢查更快速，值得臨床推廣。

關(guān)鍵詞 結(jié)核分枝桿菌;Xpert MTB/RIF：痰培養(yǎng);抗酸染色;藥敏試驗(yàn)

結(jié)核病是由結(jié)核桿菌感染引起的慢性傳染病，痰液涂片抗酸染色是診斷結(jié)核病的重要依據(jù)，但是痰涂片陽性率低，結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)條件要求苛刻且耗時長，影響了診斷和治療。結(jié)核分枝桿菌/利福平耐藥實(shí)時熒光定量核酸擴(kuò)增檢測（Xpert MTB/RIF）是一項(xiàng)在全球獲得廣泛認(rèn)可的結(jié)核快速診斷技術(shù)[1]，近年來在臨床廣泛應(yīng)用，為探討探討結(jié)核分枝桿菌/利福平耐藥XpertMTB/RIF與痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果的差異，2017年1月-2018年1月收治可疑肺結(jié)核患者30例進(jìn)行Xpert MTB/RIF和痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果，現(xiàn)將結(jié)果匯報如下。

資料與方法

2017年1月-2018年1月收治可疑肺結(jié)核患者30例，對其進(jìn)行Xpen MTB/RIF和痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，其中男17例，女13例，年齡15-75歲，平均（43.1±3.2）歲。所有患者均咳嗽1個月以上，咳痰，其中低熱17例、胸悶16例、黃痰14例。

方法：（1）標(biāo)本的采集：對30例臨床可疑肺結(jié)核病患者收集夜間痰液、晨痰和即時痰3份，每份痰標(biāo)本3 -5 mL。讓患者先用清水嗽口，用力咳出氣管深處的痰液，勿混入鼻咽分泌物。所有患者標(biāo)本均進(jìn)行抗酸桿菌涂片鏡檢、痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)和Xpert MTB/RIF監(jiān)測。（2）抗酸桿菌涂片鏡檢：按照2012年版《中國結(jié)核病防治規(guī)劃實(shí)施工作指南》操作，即取樣制作痰涂片，用萋一那氏染色法后直接鏡檢。（3）痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)：將送檢痰液用4%氫氧化鈉處理后，接種于酸性羅氏（L-J）培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)，3-7d后觀察，以后每周觀察菌落生長情況，若有菌落生長，則進(jìn)行抗酸染色檢測并做藥敏試驗(yàn)。（4）Xpen MTB/RIF：將送檢痰液用4%氫氧化鈉處理后，應(yīng)用Xpert MTB/RIF檢測試劑盒，利用Gene Xpert儀進(jìn)行檢測。

結(jié)果

檢測結(jié)果：30例患者經(jīng)過跟蹤觀察，確診肺結(jié)核21例，排除肺結(jié)核9例。痰液涂片抗酸染色：30例患者找到抗酸桿菌10例，陽性檢出率33.3% （10/30），正確診斷率47.6%（10/21）;痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果：痰培養(yǎng)陽性15例.陽性檢出率50.0%（15/30），正確診斷率71.4%（15/21），藥敏試驗(yàn)利福平耐藥4例，耐藥率19.O%（4/21）。Xpert MTB/RIF：結(jié)核分支桿菌陽性21例，陽性檢出率70.O% （21/30），正確診斷率100.00-10（21/21）;利福平耐藥3例，耐藥率14.3%（4/21）。

討論

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的危害人類健康的全球性公共衛(wèi)生問題，1882年科霍發(fā)現(xiàn)了結(jié)核病的病原菌為結(jié)核桿菌，對結(jié)核病有了新的認(rèn)識，也開創(chuàng)了治療結(jié)核病的新篇章。目前，由于不正規(guī)治療等因素，導(dǎo)致耐多藥/廣泛耐藥結(jié)核病的出現(xiàn)和蔓延，已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生和社會問題，早期診斷及發(fā)現(xiàn)其中耐藥病例是治療成功的關(guān)鍵。

傳統(tǒng)的抗酸桿菌檢查和痰結(jié)核菌培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)由于陽性檢出率低和監(jiān)測需時較長等因素，不能適應(yīng)臨床的需求。Xpen MTB/RIF檢測試劑盒為美國Cepheid公司開發(fā)的，適用于Gene Xpert儀器，可以在2h內(nèi)直接時間從患者新鮮痰液或凍存痰液中檢測是否含有結(jié)核分枝桿菌及對利福平的耐藥性，整個過程都在一密閉環(huán)境中進(jìn)行，手動時間短，不超過5 min，對操作者和周圍環(huán)境安全。這種檢查方法既實(shí)現(xiàn)對結(jié)核病的確診又能得出是否對利福平耐藥，檢測時間短，能快速報告[2]。

本組資料結(jié)果顯示，Xpert MTB/RIF適應(yīng)疑似結(jié)核分枝桿菌感染的患者，正確診斷率高，而且可以得知是否對利福平耐藥，本組資料痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果利福平耐藥4例，而Xpert MTB/RIF則出現(xiàn)耐藥基因而耐藥3例，說明結(jié)核分支桿菌耐藥基因的突變有個過程，雖然沒有形成基因突變，但是臨床上已經(jīng)出現(xiàn)耐藥，藥敏試驗(yàn)就充分說明了這一點(diǎn)。另外，抗酸桿菌涂片鏡檢雖然陽性率低，但是比較經(jīng)濟(jì)，檢查方便，適應(yīng)于大量排菌患者的檢查，可作為篩查的檢查手段，對于臨床疑似結(jié)核病患者，可選擇Xpen MTB/RIF檢查，快速，精準(zhǔn)。

綜上所述，結(jié)核分枝桿菌/利福平耐藥Xpert MTB/RIF與痰培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)均是診斷結(jié)核病的重要手段，Xpert MTB/RIF檢查勇陜速，值得臨床推廣。

參考文獻(xiàn)

[1] 李妍，張?zhí)烊A，鮮小萍，等.Xpen MTB/RIF技術(shù)在MTB檢測中的應(yīng)用價值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2016，12（1）：52-55.

[2]李雪黎，溫海平，桑俊，等.Xpert MTB/RIF在肺結(jié)核及耐藥結(jié)核檢測中的應(yīng)用價值分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2018，39（1）：100-102.