右美托咪啶預處理對肥厚心肌缺血再灌注損傷的影響及機制

況 彤 龔長蓮 羅 政

（南昌縣人民醫院，江西 南昌 330200）

心肌缺血后再灌注損傷指冠狀動脈部分或完全急性阻塞后，在一定時間又重新獲得再通時，缺血心肌雖然得以恢復正常灌注，但其組織損傷反而呈進行性加重的病理過程。心肌缺血再損傷是臨床麻醉中較為常見的病理過程，臨床上患者常伴有一些心臟疾病，如心肌肥厚等[1]。右美托咪啶具有鎮痛、鎮靜及抗焦慮的作用，屬于新型選擇性腎上腺素α2受體激動劑[2]，其對肥厚心肌的缺血再灌注損傷的作用研究具有現實意義。本文旨在分析右美托咪啶預處理對肥厚心肌缺血再灌注損傷的影響及機制，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本次選100只大鼠作為研究對象，所有大鼠均健康、成年，其中20只最為正常心肌對照組（正常對照組），平均體質量（248.23±5.45）g，不做任何處理，其余將離體心臟分為四組，即缺血再灌注（20例，對照組）、Dex組（20例）、Dex/wortmannin組（20例）、Dex/L-NAME組（20例），對照組的平均體質量（254.12±10.45）g，Dex組的平均體質量（248.34±9.65）g，Dex/wortmannin組的平均體質量（258.67±9.45）g，Dex/L-NAME組的平均體質量（257.78±9.65）g，以上五組大鼠的體質量經分析，無顯著差異（P＞0.05）。

1.2 方法：心肌肥厚大鼠模型建立：成年SD大鼠，麻醉后固定于仰臥位，常規消毒，鋪巾。從腹中線切開，分離腹主動脈和腎動脈，在腎動脈上方約1 cm處將腹主動脈結扎于G7針頭上，之后抽出針頭，縫合。術后注射青霉素。術后第7周對大鼠用超聲診斷儀檢測心臟結構及功能。之后，取出心臟，對心臟外觀及心臟實際重量進行測定。實驗方法：心肌缺血將肥厚心肌的大鼠麻醉后，切開胸腔，摘出心臟并迅速接上Langendorff離體心臟灌注裝置，同時用KHB緩沖液開始灌注，通過恒溫水槽維持體溫在37 ℃，接上測壓氣囊和電磁流量計及針狀電極。穩定后根據實驗方案要求加入Dex、L-NAME（NO合成酶抑制劑）、Wortmannin（PI3K抑制劑），在穩定期末，再灌注開始和結束時各測一次血氣。再灌注結束后，把左心室切成2 mm的薄片，計算心肌梗死率。

采用全自動生化分析儀和相關試劑盒檢測血漿缺血前后乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）活性；用酶聯免疫吸附測試檢測（ELISA）法檢測cTNⅠ的活性、PI3K、MMP-2蛋白表達，Western-blotting方法測PI3K活性；用熒光分光光度計法測心肌組織中NO含量及NOS活性。取心肌組織做成石蠟切片，用免疫組化的方法測定MMP-2和IL-1β；用原位雜交的方法對MMP-2和IL-1β進行檢測。心肌用1%氯三苯四唑（TTC）染色后，用高像素數碼相機拍照，應用Image-Pro Plus圖像處理軟件分析梗死面積百分比。

1.3 觀察指標：LDH、CK-MB、cTNⅠ、PI3K、NO、NOS、MMP-2、IL-1β及其心肌梗死面積。

1.4 統計學分析：采用SPSS19.0分析，計量資料采用均數±標準差（x-±s）表示，用t檢驗，P＜0.05為差異顯著。

2 結 果

五組各項指標比較：LDH、CK-MB、cTNⅠ、NO、NOS、MMP-2、IL-1β、心肌梗死面積各項指標在五組間差異具有統計學意義（P＜0.05），其中Dex組、Dex/wortmannin組、Dex/L-NAME組的LDH、CK-MB、cTNⅠ、MMP-2、IL-1β及心肌梗死面積均低于對照組、正常對照組相應值，并且以上指標Dex/wortmannin組和Dex/L-NAME組低于Dex組相應值（P＜0.05）。見表1。

3 討 論

右美托咪定是一種高選擇性α2腎上腺受體激動劑，諸多研究對心臟、腎等器官具有保護特性，但對于復蘇后心肌功能障礙的作用機制還不清楚。近期，研究證明右美托咪定對缺血再灌注心肌具有保護作用，且這種保護作用是通過磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和一氧化氮（NO）介導實現的。麻醉中使用右美托咪定既有自身優點又保護心臟功能為臨床提供了一個新的思路。肥厚心肌具有不同于正常心肌的一些特性，如收縮蛋白表達的改變，供血血管的改變，細胞溶質鈣的調節及底物傳輸和利用的改變，肥厚心肌對缺血耐受性是降低的，同時對再灌注敏感性增加。

表1 五組各項指標比較（

表1 五組各項指標比較（

注：與正常對照組相比，*P＜0.05；與Dex組相比，#P＜0.05

images/BZ_47_175_2870_2300_2916.png正常對照組 23.47±0.16 56.79±0.18 55.97±6.19 110.89±21.15 21.49±1.74 67.46±13.79 41.98±2.97對照組 23.23±0.23 56.34±0.21 55.78±6.25 110.67±21.62 21.32±1.23 67.23±13.45 41.23±2.89 Dex組 20.34±0.12* 50.56±1.56* 49.34±6.02* 109.37±20.17 18.32±2.01 60.23±10.56* 31.56±2.02*Dex/wortmannin組 17.34±0.12*# 45.67±1.04* 47.34±5.78* 102.78±16.18*# 15.47±2.82*# 58.47±9.38* 29.56±2.12*Dex/L-NAME組 15.23±0.34*# 40.51±1.00*# 46.34±6.81*# 92.49±15.20*# 13.42±1.43*# 55.63±8.28*# 25.45±2.02*#

右美托咪定預處理中，PI3K和NO參與介導其對缺血再灌注損傷的保護作用，內皮型一氧化氮合酶（eNOS）生成NO通過可溶性GC受體誘導cGMP的產生具有抑制心肌肥厚的作用，eNOS特異過量表達抑制異丙腎上腺素誘導的心肌肥厚；eNOS缺乏易發生高血壓和心肌肥大；基質金屬蛋白酶（MMPs）在心肌肥厚過程中有重要作用，它們也是缺血再灌注后心肌重塑中代表性的酶。白細胞介素IL-1β是缺血再灌注損傷中主要的活性細胞因子之一，是心肌重塑過程中重要的影響因素。近年有研究指出，MMP-2和PI3K及NO途徑之間可能存在關聯。以右美托咪定預處理干預離體大鼠心臟缺血再灌注模型，發現右美托咪定可以改善線粒體功能，促進缺血前線粒體 ATP 敏感性鉀通道，抑制再灌注早期線粒體滲透性轉換孔的開發[3]。LDH是乳酸脫氫酶同工酶的一型，心臟以LDH為主，CK-MB是肌酸激酶同工酶的一種，主要存在于心肌中，當心肌缺損時，幾cTNⅠ可通過受損心肌細胞膜釋放到血液中。本次研究右美托咪定預處理，可以提高PI3K、NO水平，減輕心肌損傷，改善心功能。