西瑪津高效液相色譜法分析方法試驗

2019-06-20 11:25:30鐘楚欣李玉君陳家豪張宏濤

廣東蠶業 2019年4期

鐘楚欣　李玉君　吳　妍　陳家豪　張宏濤

西瑪津高效液相色譜法分析方法試驗

鐘楚欣李玉君吳妍陳家豪張宏濤

（廣東中科英海科技有限公司廣東佛山 528000）

文章建立了西瑪津的高效液相色譜（HPLC）快速檢測分析方法。該方法采用填料粒徑為5.0 μm，規格為4.6 mm×250 mm的SymmetryC18色譜柱，以甲醇：超純水=55:45（V:V）體系為流動相，等度洗脫，柱溫35℃，流速1.000 mL/min，用二極管陣列檢測器（PDA）在波長230 nm對試樣中的西瑪津進行分離與定量分析。結果表明，該方法中西瑪津0.02 ~10 mg/L濃度范圍內，峰面積與其濃度具有良好的線性關系（r=0.9998和r=1.0000）；研究采用固相萃取提取，在水體中添加濃度為0.005 mg/L時，回收率為90.0 ~ 97.6 %，RSD為3.15%；添加濃度為1.00 mg/L時，回收率為98.0 ~ 99.0 %，RSD為0.425%。該方法簡單、快速、靈敏，可用于水體中的西瑪津含量的測定。

高效液相色譜法；西瑪津；固相萃取

西瑪津（simazine）化學名稱為2-氯-4,6-雙（乙胺基）-1,3,5-三嗪，屬于低毒農藥，是高效、安全、內吸傳導型優良除草劑，主要通過植物的根部吸收藥劑，并分布到植物的各個部分，使植物變黃而死亡[1]。其可用于防除玉米、甘蔗及高粱田、茶樹、橡膠及果園、苗圃的闊葉雜草和多數單子葉雜草[2]。因茶園除草成本低、雜草防治效果好，自20 世紀80年代開始西瑪津在我國茶園用于防除一年生雜草[3-4]。

1 材料與方法

1.1 試驗儀器、試劑與材料

Waters-Alliancee2695 高效液相色譜儀，配二極管陣列檢測器（e2998 ）；分析天平（梅特勒-托利多 XP205 ）；精密移液槍；MTN-2800 D氮吹儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）；ZZ-8L數控固相萃取儀（廣州市瑞森生物科技有限公司）；CNWBONDHC-C18 SPE小柱（上海安譜試驗科技股份有限公司）；西瑪津標準品：純度97.3%，由上海市農藥研究所有限公司提供；甲醇：色譜純；乙腈：色譜純；丙酮：色譜純。

1.2 色譜條件

Waters-Alliancee2695 高效液相色譜儀（沃特世，美國）；檢測器：二極管陣列檢測器（PDA）；檢測波長：230 nm；色譜柱：SymmetryC18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相∶甲醇∶超純水=55∶45 （V∶V）；柱溫：35 ℃；流速：1.000 mL/min；進樣量：20 μL；西瑪津的保留時間為4.8 min。

1.3 標準樣品溶液配制

準確稱取0.01 g 97.3 %西瑪津標準品于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至標線，經0.22 μm濾膜過濾后，配制成濃度為973 mg/L的標準溶液貯備液。用甲醇水溶液（V甲醇∶V超純水=1∶1）稀釋，配制成0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、1 mg/L、2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L系列標準工作溶液，備用。

2 結果與討論

2.1 提取方法的選擇

水體中通常選用有機溶劑通過液液萃取或者固相萃取進行提取，本研究比較了液液萃取和固相萃取對西瑪津在水體中的提取效果。分別設置5次重復，經乙酸乙酯萃取2次后，西瑪津的平均回收率為34.3%；經CNWBONDHC-C18 SPE小柱凈化提取后，西瑪津的平均回收率有96.7%。若增加乙酸乙酯的提取次數，回收率會有一定的提高，但考慮到成本和效率問題，故采用CNWBONDHC-C18 SPE小柱凈化提取。

2.2 標準曲線的制作

按上述液相色譜條件測定，以標準溶液濃度（0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L）為橫坐標，以對應色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線1，線性方程1為：y=1.464 ×105x+87.02 ，r=0.9998 ；以標準溶液濃度（0.5 mg/L、1 mg/L、2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L）為橫坐標，以對應色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線2，線性方程2為：y=1.482 ×105x-2.363 ×103，r=1.0000 。結果表明，該方法在0.02 mg/L-0.05 mg/L范圍內和0.5 mg/L-10 mg/L范圍內，分別具有良好的線性相關性。

圖1 　西瑪津標準品高效液相色譜圖

2.3 方法的準確度和精密度

以空白水體為基質，在水體中添加西瑪津標準溶液，添加水平為：0.005 mg/L和1.00 mg/L，每個水平重復5次。用5 mL乙腈和5 mL超純水活化CNWBONDHC-C18 SPE小柱，加入20 mL試驗溶液，濾出液棄去，用丙酮洗脫HC-C18 SPE小柱，收集濾出液于試管中，氮氣吹干，用2.00 mL甲醇水溶液（V甲醇：V超純水=1:1）溶解試管中的殘渣，搖勻后，經0.22 μm濾膜過濾，用上述高效液相分析方法測定，并計算回收率和相對標準偏差。

結果顯示，水體中添加濃度為0.005 mg/L時，回收率為90.0 ~ 97.6 %，RSD為3.15 %；添加濃度為1.00 mg/L時，回收率為98.0 ~ 99.0 %，RSD為0.425 %。結果表明，固相萃取回收方法簡便、快速，且準確度和精密度好。