麥草畏原藥高效液相色譜分析方法試驗

李玉君　鐘楚欣　陳家豪　吳　妍　張宏濤

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麥草畏原藥高效液相色譜分析方法試驗

李玉君鐘楚欣陳家豪吳妍張宏濤

（中科英海科技有限公司 廣東佛山 528000）

麥草畏是一種安息香酸系列除草劑。采用高效液相色譜法，以乙腈＋0.1%磷酸（60:40）為流動相，使用ACEExcel 5 SUPERC18不銹鋼柱，流速為1.0 mL/min，紫外檢測器，檢測波長為220 nm。結果表明，該分析方法的線性相關系數為0.9 999，標準偏差為0.210，平均回收率為99.2%。結果表明，麥草畏保留時間為4.963 min，線性相關系數為0.999 987和0.999 971。在10個添加水平范圍內，回收率分別為98.5～100.5 %和100.3～100.7 %，相對標準偏差( RSD）分別為1.05 %和0.178 %，方法檢出限為0.00 704 mga.i./L。該方法簡單、快速、靈敏度高、準確度好，能夠滿足蔬菜中麥草畏殘留量的檢測要求。

麥草畏；原藥；高效液相色譜；分析

麥草畏（dicamba），化學名稱為3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸，商品名為百草敵、麥草威，由美國維爾斯科爾化學公司（VelsicolChemicalCorp）于1961年創制，1963年在加拿大取得登記，1967年首次作為除草劑報道并取得美國登記，20世紀90年代傳入我國[1]。麥草畏屬安息香酸系列除草劑，作用機理屬于激素型除草劑[3]。據統計，2016年全球麥草畏市場規模可達2.9億美元，美國是麥草畏應用第一市場，中國是全球第二應用市場，主要登記于轉基因種子（大豆、玉米）[2]。

麥草畏，純品為白色結晶，分子量為221.04 ，易溶于水，在農田生態系統中容易發生遷移而引起土壤和地下水等污染，對水質安全和人類健康造成危害[3-4]。因此，高效的、準確的測定方法是研究水中麥草畏的殘留的關鍵。

1 試驗部分

1.1 試劑與儀器

麥草畏標準品，乙腈：色譜純；磷酸：色譜純；實驗用水為超純水。AllianceE2695 型高效液相色譜儀（Waters，具紫外檢測器和自動進樣器）；Empower色譜工作站；色譜柱：ACEExcel 5 SuperC18 ，250 mm×4.6mm（5μm），電子分析天平：型號CPA225 D，賽多利斯，精度0.00001。

1.2 液相色譜操作條件

流動相制備：吸取1.00 mL磷酸，用水定容至1000 mL，搖勻，配制得到0.1%磷酸溶液，過濾膜過濾脫氣后備用。流速：1.00 mL/min；柱溫：35 ℃；檢測波長：220 nm；進樣體積：20.0 μL，流動相：乙腈：0.1 %磷酸溶液（60:40），保留時間：約4.9 min。

麥草畏標樣的高效液相色譜圖見圖1。

圖1 麥草畏標樣高效液相色譜圖

1.3 測定步驟

1.3.1 溶液的配制

分別準確稱取麥草畏標樣（98 %）0.01 g（精確至0.0002 g），置于10 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，搖勻，配制成母液1000 mg/L。

1.3.2 標準曲線設計

用乙腈水溶液（V乙腈∶V超純水=1∶1）將母藥進行稀釋，配制一系列標準工作溶液，分別為：0.0100 mg /L，0.0200 mg/L，0.0500 mg /L，0.100 mg /L，0.200 mg/L，0.500 mg/L，1.00 mg/L，2.00 mg/L，5.00 mg/L，10.0 mg /L。按1.2方法每個濃度采集3針。

2 結果與討論

2.1 色譜柱的選擇

HPLC檢測麥草畏需要用到0.1%磷酸溶液作為流動相。ACEExcel 5 SuperC18 色譜柱具有擴展pH穩定性的超惰性色譜柱，可用于pH1.5~11.5 之間的LC/MS兼容緩沖液，用于麥草畏的測定時，穩定性高，重現性好。

2.2 色譜條件的選擇

通過HPLC的紫外檢測器（UV）進行全波長掃描，得到麥草畏的紫外波長掃描圖。麥草畏在200～400 nm間有較大的吸收。考慮到雜質響應值的影響，將檢測波長定220 nm。

根據麥草畏的理化性質，選擇以乙腈＋0.01 %磷酸溶液為流動相，以ACEExcel 5 SuperC18 為色譜柱，柱溫35 ℃，將不同體積比的流動相在色譜柱上進行試驗。當乙腈與0.01 %磷酸溶液以60∶40 的比例作流動相，流速為1.000 mL/min時，麥草畏響應值較高，且基線平穩，峰形對稱。

2.3 分析方法的線性相關性試驗與檢出限

在設定的色譜條件下，對不同濃度的麥草畏標準溶液進行HPLC測定。使用Empower 3軟件采集并處理圖譜數據，以麥草畏有效成分濃度為橫坐標，峰響應值為縱坐標繪制標準曲線。

表1 　麥草畏線性結果

結果表明，在0.0100 mg/L~10.0mg/L范圍內，麥草畏含量與色譜峰面積呈良好的線性關系。以3倍的信噪比確定麥草畏的最低檢出限為0.00704 mg/L。

2.4 分析方法的專屬性試驗

取空白溶劑（乙腈水溶液（V乙腈：V超純水=1：1））、標準溶液（10.0 mg/L）和供試品試驗溶液（10.0 mg/L）經0.22 μm濾膜過濾后進樣測試，各采集1針。按1.2的方法進行測定麥草畏的含量。

2.5 分析方法的精密度試驗

取濃度0.01 mg/L和10.0 mg/L分別連續進樣6針，測得麥草畏的標準偏差分別為1.864 和0.210 。

表2　 精密度試驗結果

2.6 分析方法的添加回收與重復性試驗

麥草畏在25 ℃條件下在水中的溶解度為6.5 g/L，本實驗設計1個空白對照組和2檔試驗組，每檔濃度5個重復。對空白對照組與2檔試驗濃度組一共11 個前處理后得到的樣品各采集1針。基質為曝氣自來水。分別往兩個兩個試驗組添加一定量的麥草畏標樣。前處理方法：取1~2 mL試驗溶液經0.22 um過濾膜過濾后，按1.3方法進行測定麥草畏的含量。測得麥草畏的平均回收率分別是98.5~100.5 %和100.3~100.7 %，相對標準偏差分別為1.05 %和0.178 %。如表3所示。

表3 　添加回收試驗結果

3 結論

試驗結果表明，本方法檢測麥草畏原藥有較高的準確度和精密度，線性關系良好。方法具有簡單、快速、準確及分離效果好的優點，是進行蔬菜中麥草畏的殘留檢測較理想的分析方法。

[1]陳勇,邵守言,朱桂生,等.麥草畏市場現狀及合成路線研究進展(Ι)[J].農藥研究,2018(05):11-14.

[2]楊益軍.中國除草劑產業的現狀及主流產品市場分析[J].今日農藥,2017(12):36-41.

[3]張吉蘋,蔣新娣,黃薇,等.基于分子絡合的分散液液微萃取與高效液相色譜聯用檢測環境水樣中2種苯氧羧酸類除草劑[J].色譜,2018(5):458-463.

[4]金黨琴,定邦東,龔愛琴,等.快速溶劑萃取高效液相色譜法測定蔬菜中烯禾啶和麥草畏殘留[J].學試劑,2018,40(4):357- 360.

10.3969/j.issn.2095-1205.2019.04.23

李玉君(1992- )，女，廣東佛山人，助理工程師，研究方向：環境毒理檢測及理化分析。

張宏濤(1978- )，男，吉林雙遼人，工程師，研究方向：毒理學研究。

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2095-1205(2019)04-40-02