Sysmex XN-L-550全自動血細胞分析儀性能驗證及評價

何文軍，鐘偉國，李 曼

（廣州中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院，廣東省中醫(yī)院，廣州 510370）

0 引言

Sysmex XN-L-550全自動血細胞分析儀（以下簡稱“XN-L-550全自動血細胞分析儀”）是一臺新型全自動模塊血液、體液分析裝置，與其他小型全自動血液分析儀相比，增加了網織紅細胞通道，檢測精度有了很大提高，在血細胞計數異常、報警內容和散點圖上細胞分布異常方面的提示大大減少了陽性標本的漏檢率。依據CNAS-CL02：2012《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則》（ISO 15189）[1]和《醫(yī)療機構臨床實驗室管理辦法（衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔2006〕73號）》要求，實驗室應對新引進的設備進行方法學性能驗證以保證各項性能參數符合臨床使用要求。本實驗室以靶機SysmexXE-5000全自動血細胞分析儀（以下簡稱“XE-5000全自動血細胞分析儀”）為參照儀器，對XN-L-550全自動血細胞分析儀的本底計數、攜帶污染率、批內精密度、正確度、儀器不同吸樣模式的結果可比性、實驗室內的結果可比性、參考區(qū)間、線性范圍進行驗證，對主要檢測項目白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、紅細胞比容（HCT）、血小板（PLT）、紅細胞平均體積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）的結果進行總結如下。

1 資料

1.1 標本來源

40份新鮮血液樣本來源于廣東省中醫(yī)院住院、門診患者和健康體檢者，EDTA-K2抗凝，4 h完成標本測試。

1.2 儀器和試劑

XN-L-550全自動血細胞分析儀與XE-5000全自動血細胞分析儀，使用儀器原裝配套試劑。

2 方法

2.1 本底計數

采用稀釋液在儀器上檢測3次，取最大值，判斷標準為 WBC≤0.5×109/L、RBC≤0.5×1012/L、Hb≤2g/L、PLT≤10×109/L。

2.2 攜帶污染率

參照WS/T 406—2012《臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質量要求》，取高濃度樣本檢測3次，檢測結果分別為H1、H2、H3；再取低濃度樣本連續(xù)測定3次，檢測結果分別為L1、L2、L3。測定項目包括 WBC、RBC、Hb、PLT，攜帶污染率計算公式為（L1-L3）/（H3-L3）×100%[2]，判斷標準：WBC≤3.0%，RBC≤2.0%，Hb≤2.0%，PLT≤4.0%。

2.3 精密度

（1）批內精密度：參照 WS/T 406—2012，檢測項目范圍要求：WBC（4～10）×109/L，RBC（3.5～5.5）×1012/L，Hb110～160g/L，HCT35%～55%，PLT（100～300）×109/L，MCV 80～100 fL，MCH 27～34 pg，MCHC 320～360 g/L。取1份在檢測范圍內的血液樣本，分別采用手動模式和自動模式重復檢測11次，計算后10次結果的標準差（s）、算術平均值（xˉ）及變異系數（coefficient of variation，CV）。CV 判斷標準：WBC≤4.0%，RBC≤2.0%，Hb≤1.5%，HCT≤3.0%，PLT≤5.0%，MCV≤2.0%，MCH≤2.0%，MCHC≤2.5%。

（2）批間精密度：以室內質控在控結果的CV為評價指標，選取中值（批號71071102）和高值（批號71071103）2個濃度的質控品，分別連續(xù)檢測20個結果（剔除失控數據）并計算，CV判斷標準：WBC≤6.0%，RBC≤2.5%，Hb≤2.0%，HCT≤4.0%，PLT≤8.0%，MCV≤2.5%，MCH≤2.5%，MCHC≤3.0%。

2.4 正確度

參照標準WS/T 406—2012，取10份在參考區(qū)間內的新鮮血液樣本，均檢測2次，計算以上20次結果的均值，以XE-5000血細胞分析儀的測定均值為標準，計算偏倚。允許偏倚：WBC≤5.0%，RBC≤2.0%，Hb≤2.5%，HCT≤2.5%，PLT≤6.0%，MCV≤3.0%，MCH≤3.0%，MCHC≤3.0%。

2.5 儀器不同吸樣模式的結果可比性

取5份血液樣本，手動和自動各檢測2次，計算不同檢測模式均值間的相對差異，相對差異要求：WBC≤5.0%，RBC≤2.0%，Hb≤2.0%，HCT≤3.0%，PLT≤7.0%，MCV≤3.0%，MCH≤3.0%，MCHC≤3.0%。

2.6 實驗室內的結果可比性

選取20份臨床血液樣本，以XE-5000全自動血細胞分析儀為參照儀器，以該儀器檢測結果為標準計算相對偏差，所有項目的相對偏差達到目標的比例應≥80%。相對偏差要求：WBC≤7.5%，RBC≤3.0%，Hb≤3.5%，HCT≤3.5%，PLT≤12.5%，MCV≤3.5%，MCH≤3.5%，MCHC≤3.5%。

2.7 參考區(qū)間驗證

參照WS/T 405—2012《血細胞分析參考區(qū)間》[3]，取健康男性、女性各20例，對檢測數值所引用的生物參考區(qū)間進行驗證，≤2個超出范圍，驗證通過；＞2個超出范圍，另選健康男性、女性各20例重新驗證。

2.8 線性范圍

選取1個接近上限的高值血液樣本（H）進行稀釋，稀釋比例分別為100%、80%、60%、40%、20%、10%、0%，各重復測定3次，計算均值。將檢測值與理論值進行比較（偏差小于10%），驗證y=ax+b線性范圍。要求：a值在 1±0.05 范圍內，相關系數r2≥0.975[4-6]。

3 結果

3.1 本底計數

WBC 0.02×109/L、RBC 0.01×1012/L、Hb 0.05 g/L、PLT 0.00×109/L，儀器本底檢測結果良好。

3.2 攜帶污染率

WBC、RBC、Hb、PLT 的攜帶污染率均為 0.00%，符合標準要求。結果見表1。

表1 攜帶污染率檢測結果

3.3 精密度

批內精密度和批間精密度的CV均低于檢測要求，儀器重復性良好。結果見表2、3。

表2 不同檢測模式批內精密度檢測結果

表3 批間精密度檢測結果

3.4 正確度驗證

以XE-5000全自動血細胞分析儀的測定均值為標準，偏倚分別為WBC 4.01%、RBC 0.10%、Hb 0.56%、HCT 1.44% 、PLT 3.69% 、MCV 1.31% 、MCH 0.42%、MCHC-0.95%，均低于允許偏倚，2臺儀器結果有很好的相關性。結果見表4。

3.5 儀器不同吸樣模式的結果可比性

5份樣本中，手動和自動2種吸樣模式結果的可比性均達到要求，達標率為100%，2種吸樣模式的結果具有可比性。

3.6 實驗室內的結果可比性

與XE-5000全自動血細胞分析儀的測定均值進行比對，結果可比性驗證的允許偏差符合要求，達標率為100%，2臺儀器結果具有可比性。

表4 正確度驗證結果

3.7 參考區(qū)間驗證

健康男性、女性各20例的檢測結果均在引用的生物參考區(qū)間內，該參考區(qū)間符合本實驗室檢測人群。結果見表5。

表5 參考區(qū)間驗證結果

3.8 線性范圍

WBC、RBC、Hb、HCT、PLT 的線性范圍分別為（0.00～124.56）×109/L、（0.00～7.20）×1012/L、（0.00～287.00）g/L、0.00%～62.70%、（0.00～910.00）×109/L，a值在1.00±0.03范圍內，r2≥0.997。結果見表6。

表6 線性范圍驗證結果

4 討論

外周血液檢查作為基本的檢查項目在日常的診斷和治療中經常運用。從貧血和感染性疾病等篩查[7]到提供疾病診斷，其作用是為了初步確診疾病及評價血液學的病理變化。目前，XN-L-550全自動血細胞分析儀在其他血細胞分析儀的基礎上增加了新的功能，增加了測量血小板數量的新型熒光染料（PLT-F通道）、檢測有核紅血細胞數并對白細胞總數進行修正的功能（WNR通道）、低值白細胞樣本白細胞數的檢測模式（LW模式），使各自的檢測精度均有提高。

根據CNAS-CL02：2012要求，更換新儀器和檢測系統(tǒng)時，實驗室對其相關性能和廠家提供的主要資料需予以驗證和評價。本實驗室對XN-L-550全自動血細胞分析儀的本底計數、攜帶污染率、精密度、正確度、儀器不同吸樣模式的結果可比性、實驗室內的結果可比性、參考區(qū)間、線性范圍進行驗證。結果顯示，對WBC、RBC、Hb、PLT等指標進行本底計數和攜帶污染率驗證，實驗結果遠低于檢測要求，說明該儀器在檢測各樣本間的污染程度低、交叉污染小[8]。精密度是表示測量的再現性，是保證準確的先決條件，本實驗對 WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC等幾項主要指標的批內和批間精密度分別進行了驗證，批內精密度和批間精密度均小于參考值，儀器的重復性好，同一樣品測定值之間的一致性程度高；以XE-5000全自動血細胞分析儀的測定均值為標準驗證的正確度結果顯示2臺儀器測量的結果一致性好，XN-L-550全自動血細胞分析儀測量結果系統(tǒng)誤差小。通過與XE-5000全自動血細胞分析儀的比對和XN-L-550全自動血細胞分析儀2種不同吸樣模式的比對結果顯示，2臺儀器的相關性好，2種吸樣模式檢測結果具有可比性。參考區(qū)間驗證結果顯示，選用樣本中檢測結果均在引用的生物參考區(qū)間內，該參考區(qū)間可以引用。線性范圍指在一定測量區(qū)間內，測量結果與樣本中測量物的量值直接成比例，本實驗中a值均在1.00±0.03范圍內，r2≥0.997，該儀器線性范圍較寬，適合臨床使用。

綜上所述，Sysmex XN-L-550全自動血細胞分析儀各項性能指標驗證結果良好，檢測結果穩(wěn)定，用血量少，可準確、快速地檢測血液樣本，滿足臨床需求。另一方面，在異常細胞的檢出性能方面，該儀器也存在與其他血細胞分析儀同樣的局限，因此應結合臨床診斷、經驗以及顯微鏡鏡檢為臨床提供更加可靠的結果。