全自動生化分析儀交叉污染的原因分析

劉學琦

【摘 要】全自動生化分析儀已經在臨床上廣泛應用，給檢驗人員增加了許多新課題，除了學習保養維護、操作以外，也要注意儀器使用流程和試劑的使用對實驗結果的干擾，本文結合自己的實際工作分析探討了全自動生化分析儀交叉污染的各種原因，盡量避免使用過程中發生交叉污染，以及發生交叉污染后怎樣找出原因。

【關鍵詞】全自動生化分析儀;交叉污染

【中圖分類號】R443【文獻標識碼】A【文章編號】1005-0019（2019）11--01

現代醫療不斷發展，目前，由于全自動生化分析儀其準確性高、測量速度快、消耗劑量少等優點和多樣本、多項目的處理能力，給臨床上對疾病的診治以及健康狀態提供可靠的信息依據，已經在各級醫院得到廣泛使用，成為醫院進行生化分析的主要工具。但是現在多種全自動生化分析儀都存在交叉污染的問題，從而導致檢測結果出現誤差，每個檢驗結果都會影響到醫生對疾病的診治，因此避免實驗中發生交叉污染就變得尤為重要。本人根據檢驗經歷和實際情況，對全自動生化分析儀交叉感染的原因及如何找出原因作以下分析報告。

一、全自動生化分析儀交叉污染的種類

（一）試劑之間的化學污染

1.反應進程同時。上一個試劑的反應結果對下一個試劑反應進程帶來了間接的干擾，因此，下一個項目檢測到的是這兩個試劑反應的綜合結果。比如，上一個反應的產物是過氧化氫，那么就會對以Trinders反應時顏色的改變產生影響。像GLU對CREA反應結果的干擾（氧化酶法）、CHOL對CREA反應結果的干擾（酶法）、UA對CHOL測定結果的影響[1]。

2.試劑之間的直接污染。上一個檢測試劑中含有下一項檢測所需要的試劑，直接影響到下一項的檢測結果。比如，試劑淀粉酶中含有濃度較高的鈣離子、CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）、ALP（IFCC法）、AMY（EPS法）、TP、GLU（氧化酶法）、ACP試劑里面含有濃度較高的鉀離子、TG等試劑里面含有一些鎂離子等等，以上這些試劑的交叉污染分別會對鈣離子、鉀離子（紫外酶法）、鎂離子的最后檢測結果造成影響。

3.上一個檢測的試劑中含有一些對下一個反應檢測的底物有作用的試劑，造成下一個反應的測定結果不準確。比如，UA、TC等均含有磷酸鹽緩沖液，會對于其后P的測定產生影響、鐵能與鎂測定試劑的絡合劑結合，就會影響鐵與鐵絡合劑的結合。

4.反應條件如pH等影響下一項的反應條件，因此改變反應進行的速率。比如，直接膽紅素（釩酸鹽氧化法）試劑里面含有表面活性劑的酒石酸鹽緩沖液，就會影響ALT的活性，干擾最終測定結果[2]。

我們的全自動生化分析儀在使用不久后，發現用酶法檢測肌酐時的結果不穩定，有時候連著好幾個樣本肌酐值都高于正常參考值很多，單獨重新測定時，結果又恢復正常，經過檢查，我們排除了攪拌棒、比色杯、加樣針等幾個方面的原因，我們懷疑可能是因為檢測順序出現錯誤：先測定了葡萄糖，緊接著測了肌酐，所以，我們做了一個實驗。

隨機抽取病人標本9份做三次檢測，第一次和日常測定順序相同，第二次單獨測定肌酐，第三次在葡萄糖和肌酐的檢測中插入AST和ALT檢測，然后測定這9份標本。三次檢測肌酐。結果三次測試數據為：第一次測試=112.7μmol/L，第二次測試=73.1μmol/L，第三次測試=72.9μmol/L。顯而易見，第一次與第二次檢測結果差距較大，第二次和第三次檢測結果差距細微。這就說明試劑葡萄糖對于肌酐檢測結果有很大影響，后來我們又查找了一些資料，并向請教了專家，找到了原因。

（二）樣品交叉污染

1.比色杯的交叉污染。生化分析儀的比色杯一般都是反復使用的，每個比色杯使用完畢后，進行清洗，然后繼續使用于下一個項目的檢測。如果比色杯清洗不徹底或者粘附力增強時，就可能吸附一些上一個項目中的試劑，那么這些殘留的試劑就會對下一個項目的檢測產生一定的影響。

2.攪拌棒的交叉污染。在樣本與試劑混合以后，往往會用攪拌棒加以攪拌，使混合均勻。如果攪拌棒清洗不徹底或者粘附力強，那么殘留在攪拌棒上面的試劑或者樣品就會對下一個項目的檢測產生影響。

3.試劑吸針、樣品吸針的交叉污染。現在大部分全自動生化分析儀都是采用了雙試劑檢測樣本，試劑中R1與R2的吸取和吐出，，一般情況下只配一套試劑針。如果試劑針清洗不徹底，或者粘附力增強時，殘留在上面的試劑就有可能會對下一個項目的檢測造成干擾。除此之外，另一個不容忽視的問題是許多全自動生化分析儀長期頻繁使用，使得試劑針和加樣針磨損嚴重，或者吸頭沒有及時更換，使試劑針或者取樣針密封層逐漸變大，發生泄漏問題，造成樣本間或試劑間相互污染。

總之，試劑的種類繁多，試劑中的化學成分也非常復雜，各個廠家提供的試劑說明書不能完全說明試劑的組合成分，所以往往很難判斷試劑之間交叉污染的原因。因此，檢驗人員在進行檢測時，要合理安排項目的測試順序，對于精確安排好的項目測試順序，也不能隨意更改[3]。所需要的試劑，要科學性、合理性的組合放置，相同酸堿度的放在一起，反應原理相同的放在一起。沖洗時使洗液壓力與壓縮空氣的壓力適中，把試劑吸針、樣品吸針以及攪拌棒沖洗干凈并吹干。對試劑針進行特別沖洗，比如沖洗次數增加，必要的時候可以加入堿性清洗液或酸性清洗液進行沖洗這樣可以有效減弱交叉感染。

二、全自動生化分析儀交叉污染的判別

第一，把某一種試劑當做樣本，進行整套項目的綜合測定，仔細觀察每一項的測定結果從而進一步確定發生試劑交叉污染造成直接或間接影響的項目。或者把一份樣本一分為二，其中一份加入生理鹽水或者其他合適的稀釋液，另外一份加入等量的其他試劑，同時檢測，仔細觀察檢測結果的變化，從而進一步確定發生試劑交叉污染時造成直接或間接影響的項目。第二，交叉污染初步測試，假設有啊，a，b，c三個項目，，標本是混合血清，按照下面的測試順序：a，a，a，a，a，b，a，c，a，b，b，b，b，b，c，b，c，c，c，c，c，測試的結果分別為：a1，a2，a3，a4，a5，ba-b，ab-a，ca-c，ac-a，b1，b2，b3，b4，b5，cb-c，bc-b，c1，c2，c3，c4，c5（bc-b表示c項目對a項目發生污染時a的測試值，其他類同），把a2到a5、b2到b5、c2到c5的四次檢測平均值分別當做a、b、c三個項目沒有發生交叉污染時的測定值，如果（ab-a/a*100%）< 95%或者>105%，那么強烈支持b對a有交叉污染。如果，以上初步試驗證明b對a有污染，就可以進行下面實驗進行確認，檢測順序為b，a，a，a，觀察結果b，a1，a2，a3，如果（a1/a3*100）< 95%或者>105%，說明b對a有交叉污染。從a1到a3的檢測結果，可以進行確認b受到交叉污染的程度是不是逐漸減輕。

綜上所述，為了確保檢測結果的準確性，避免發生交叉污染，首先儀器應該運轉正常，對儀器定期維護、保養，檢驗人員能夠熟練操作儀器而且了解各種反應，做好實驗室的質評工作和質控工作，實驗室的環境質量對檢測結果也會有一定影響，還要做好各種試劑之間的交叉污染的評估和調查工作，這樣就可以設置實驗檢測程序，試劑科學合理的組合，攪拌棒、比色杯、試劑針清洗徹底，是使全自動生化分析儀避免交叉污染最有效的辦法，使其提供的數據更具準確性和可靠性。

參考文獻

郭旭.初探全自動生化分析儀交叉污染的原因及解決對策[J].醫療裝備， 2015， 24（5）：83-83.

趙筆輝.應用日立7180全自動生化分析儀的檢測時序處理交叉污染[J].檢驗醫學， 2016， 31（2）：140-143.

楊蘭， 馬凌珍.全自動生化分析儀試劑交叉污染的檢測方法[J].中國醫療器械信息， 2017， 23（6）：27-28.