CRABP-Ⅰ在成人煙霧病血清中的表達(dá)及其與術(shù)后血流動(dòng)力學(xué)變化的關(guān)系

何 心，王建禎，李 鑫，趙水強(qiáng)，王 震，秦至臻

煙霧病(moyamoya disease，MMD)是一種慢性進(jìn)展性閉塞性腦血管疾病，特點(diǎn)為頸內(nèi)動(dòng)脈末端狹窄或閉塞同時(shí)伴有顱底異常血管網(wǎng)形成，以顱內(nèi)血管的炎性反應(yīng)、閉塞及再生為主要病理特征，病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不明確[1]。通過檢測(cè)煙霧病患者血清相關(guān)炎性反應(yīng)、血管再生蛋白表達(dá)水平，能夠?qū)υ摷膊〉陌l(fā)生及進(jìn)程預(yù)測(cè)起到一定的提示作用[2]。文獻(xiàn)[3]報(bào)道，煙霧病發(fā)病機(jī)制與類視黃醇信號(hào)傳導(dǎo)途徑介導(dǎo)的平滑肌增殖和遷移相關(guān)。Kim等[4]報(bào)道腦脊液中CRABP-Ⅰ的表達(dá)是小兒煙霧病發(fā)病的標(biāo)志物。目前關(guān)于成人煙霧病中血清標(biāo)志蛋白的相關(guān)研究較少，CRABP-Ⅰ在成人煙霧病的血清表達(dá)情況及意義還不清楚。本文檢測(cè)52例煙霧病患者手術(shù)前后血清CRABP-Ⅰ的表達(dá)水平，旨在探討CRABP-Ⅰ在煙霧病中的變化及與煙霧病術(shù)后血流動(dòng)力學(xué)變化的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選取我院2016-01至2017-12收治的煙霧病52例，男31例，女21例；年齡22～63歲，平均(39.21±14.87)歲。分期按照日本中樞神經(jīng)系統(tǒng)血管病研究委員會(huì)提出的煙霧病診斷及鈴木分期標(biāo)準(zhǔn)[5]，所有患者診斷均經(jīng)過全腦血管造影確診，所有患者均行顳肌貼敷、硬膜翻轉(zhuǎn)或顱內(nèi)外血管搭橋手術(shù)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)術(shù)前合并其他重要臟器疾病或功能不全；(2)患有其他部位的惡性腫瘤或術(shù)前影像學(xué)檢查提示有肺臟、肝臟及其他部位轉(zhuǎn)移征象；(3)呈現(xiàn)惡病質(zhì)狀態(tài)；(4)妊娠期及哺乳期婦女。52例中，腦出血15例，腦缺血37例；鈴木分期：1～2期22例，3～4期30例。同時(shí)選取在我院門診健康體檢者20例為對(duì)照組，男14例，女6例，兩組年齡、性別等資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 兩組入院后空腹采集靜脈血5～8 ml，將血液置于無菌試管內(nèi)，靜置10 min后以3000 r/min離心10 min，分離血清，將血清置于-80 ℃冰箱備檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中CRABP-Ⅰ濃度，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自英國(guó)艾碧康公司，檢測(cè)操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行。煙霧病組患者術(shù)后6個(gè)月來院復(fù)查，血清檢測(cè)步驟與前相同。

1.3 圖像分析 將煙霧病患者手術(shù)前及術(shù)后6個(gè)月的磁共振腦血流灌注圖像經(jīng)過處理后，得到局部腦血容量(regional cerebral blood volume，rCBV)、局部腦血流量(regionalcerebralbloodflow，rCBF)、局部平均通過時(shí)間(regional mean transit time，rMTT)、局部達(dá)峰時(shí)間(regional time to peak，rTTP)4組參數(shù)圖。選取與臨床癥狀相關(guān)的大腦中動(dòng)脈(MCA)供血區(qū)及同側(cè)小腦(PC)設(shè)置感興趣區(qū)(region of interest，ROI)。定義PWI參數(shù)：rTTP=TTPMCA-TTPC，rCBV=CBVMCA/CBVC，rCBF=CBFMCA/CBFC，rMTT=MTTMCA-MTTC。

2 結(jié) 果

2.1 手術(shù)前后CRABP-Ⅰ比較 煙霧病患者術(shù)前CRABP-Ⅰ的血清濃度為(35.38±6.05)mg/L、術(shù)后6個(gè)月為(28.38±4.46)mg/L，較對(duì)照組[(19.70±5.10)mg/L]顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，煙霧病術(shù)后6個(gè)月CRABP-Ⅰ的血清濃度較術(shù)前顯著降低(P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 不同分期CRABP-Ⅰ比較 鈴木分期1～2期患者術(shù)后CRABP-Ⅰ的血清濃度為(28.66±3.92) mg/L，較術(shù)前[(32.14±5.08)mg/L]顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.015)。鈴木分期3～4期患者術(shù)后CRABP-Ⅰ的血清濃度為(28.17±4.88)mg/L，較術(shù)前[(37.75±5.66) mg/L]顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。鈴木分期3～4期術(shù)前CRABP-Ⅰ的血清表達(dá)顯著高于鈴木分期1～2期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.75，P<0.01)。

2.3 手術(shù)前后血流動(dòng)力學(xué)比較 術(shù)后6個(gè)月患者磁共振腦血流呈現(xiàn)不同程度的改善，與手術(shù)前相比，術(shù)后6個(gè)月rTTP顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.421，P=0.001，表1)。

指標(biāo)術(shù)前術(shù)后tPrTTP2.77±1.002.19±0.783.4210.001rCBV1.95±0.842.10±0.830.8350.408rCBF1.65±0.551.75±0.411.0510.298tMTT42.43±19.3336.98±18.761.3630.179

2.4 手術(shù)前后CRABP-Ⅰ的表達(dá)與血流動(dòng)力學(xué)的相關(guān)性 手術(shù)前后CRABP-Ⅰ與患者rTTP值均呈正相關(guān)(P<0.01，圖1)。

圖1 手術(shù)前后CRABP-Ⅰ的表達(dá)與血流動(dòng)力學(xué)變化的相關(guān)性

3 討 論

煙霧病發(fā)病原因目前尚無明確的結(jié)論，由于血管增生是煙霧病的病理特征，很多研究發(fā)現(xiàn)與血管增生相關(guān)的因子在煙霧病患者中呈現(xiàn)出高表達(dá)狀態(tài)[2, 6]。最近 Jeon等[7]發(fā)現(xiàn)，CRABP-Ⅰ在腦脊液中的表達(dá)情況與煙霧病相關(guān)，而且通過抑制CRABP負(fù)調(diào)節(jié)因子，能夠刺激血管平滑肌細(xì)胞遷移，從而促進(jìn)血管再生。Fiorella等[8]報(bào)道了CRABP-Ⅰ的表達(dá)與血管平滑肌的增殖和遷移密切相關(guān)，文獻(xiàn)[4]也發(fā)現(xiàn)成人煙霧病患者中存在CRABP-Ⅰ的高表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)，煙霧病患者術(shù)前及術(shù)后6個(gè)月CRABP-Ⅰ血清濃度均較對(duì)照組顯著升高，術(shù)后6個(gè)月較術(shù)前CRABP-Ⅰ濃度顯著降低，提示CRABP-Ⅰ的血清表達(dá)情況可能與煙霧病治療干預(yù)密切相關(guān)。

煙霧病的血管閉塞和增生是慢性的病理過程，日本學(xué)者根據(jù)其血管受損的進(jìn)展程度可以將煙霧病的病程分成6個(gè)階段及鈴木分期[5]。研究表明，煙霧病不同分期患者的臨床及影像學(xué)表現(xiàn)均存在差異[9-11]。在本研究中，所有患者鈴木分期集中在1～4期，處于煙霧病的發(fā)展和進(jìn)展階段，患者臨床癥狀也最顯著，符合煙霧病患者就診規(guī)律。本研究發(fā)現(xiàn)，鈴木分期3～4期患者術(shù)前CRABP-Ⅰ的血清表達(dá)顯著高于鈴木分期1～2期，說明CRABP-Ⅰ的血清表達(dá)水平與煙霧病的進(jìn)展程度密切相關(guān)。CRABP-Ⅰ是對(duì)血管生成發(fā)揮調(diào)控作用的因子，本研究結(jié)果提示，CRABP-Ⅰ可能參與煙霧病的發(fā)生發(fā)展過程，與患者腦損傷的程度密切相關(guān)。

手術(shù)是煙霧病最主要的治療方法，分為直接血管重建術(shù)和間接血管重建術(shù)[5, 12-14]。在本組患者中，采用血管重建術(shù)的方法不盡相同。研究表明，直接血管重建術(shù)后腦灌注狀況可在術(shù)后短期改變，而間接血管重建術(shù)后腦灌注改變時(shí)間需要3～4個(gè)月[10]。本研究中患者術(shù)后復(fù)查時(shí)間為6個(gè)月，從理論上講所有患者腦血流狀況在術(shù)后半年的時(shí)間內(nèi)應(yīng)該會(huì)發(fā)生一定程度的變化。目前，越來越多的學(xué)者開始利用磁共振灌注成像技術(shù)評(píng)估煙霧病患者的血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)。有研究發(fā)現(xiàn)，在PWI參數(shù)中，MTT與CBF分別會(huì)高估和低估實(shí)際的血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)，選擇TTP及CBV用于評(píng)價(jià)術(shù)后療效可能更加合理[9]。本研究選取了TTP、CBV、CBF及MTT作為PWI參數(shù)，發(fā)現(xiàn)與其他參數(shù)相比，TTP在術(shù)后出現(xiàn)顯著的縮短，而其他參數(shù)手術(shù)前后無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這與Dai等[15]結(jié)論類似。Lee等[10]的研究也發(fā)現(xiàn)，TTP的差值較術(shù)前明顯的縮短，而CBV比值變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Choi等[9]的研究結(jié)果表明，小兒煙霧病患者術(shù)后6個(gè)月TTP及CBV均出現(xiàn)了不同程度的下降。本研究和既往的研究均表明，術(shù)后TTP的下降是顱內(nèi)循環(huán)灌注改善較為明顯的指標(biāo)。本研究還發(fā)現(xiàn)，手術(shù)前后CRABP-Ⅰ的血清表達(dá)情況與rTTP值均呈顯著正相關(guān)，這表明手術(shù)前后CRABP-Ⅰ的血清表達(dá)情況與患者腦血流的灌注改善密切相關(guān)，可作為評(píng)估手術(shù)前后腦灌注改善的參考指標(biāo)。但其在煙霧病發(fā)病中的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。