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不同等級渾源黃芪中黃芪多糖含量對比研究

2019-06-04 09:18:36
山西衛生健康職業學院學報 2019年2期
關鍵詞:實驗

(山西衛生健康職業學院,山西 晉中 030619)

渾源黃芪產于中國北岳恒山,生態環境獨特,造就上佳品質,素有“天下黃芪之宗”的美譽。主要含有皂苷類、黃酮類、多糖類、微量元素硒以及氨基酸類等。藥理實驗表明黃芪中的黃芪多糖可以調節機體的免疫功能,具有抗氧化、保肝、促進血管內皮增生、抑制腫瘤、防治腦損傷、抗病毒等作用[1],黃芪多糖能改善1型糖尿病小鼠血糖水平,改善外周組織對胰島素的抵抗[2]。

圍繞《云南省農業發展“十二五”規劃綱要》的總體要求,抓住中國至東盟自由貿易區建設帶來的機遇,充分發揮資源優勢,以“穩面積、調結構、提質量、保增收”為發展目標。以省內、國內、國際市場市場為導向,以經濟效益為中心,以主導產業、產品為重點,優化組合各種生產要素,實行區域化布局、專業化生產、規模化建設、系列化加工、社會化服務、企業化管理的新型發展方式。

本文采用水回流提取、比色法測定的方法,對不同等級渾源黃芪進行黃芪多糖的含量進行對比研究,旨在為渾源黃芪的合理種植采集、開發利用提供科學依據,合理利用有限的藥材資源和地質資源,提高黃芪基地的經濟效益和社會效益。

據統計,此次健康體檢惠及1200余名職工,讓職工切實感受到了企業的關懷和關愛,切實維護了職工的權益。□

1 實驗材料及儀器

1.1 材料

不同等級渾源黃芪(由山西省渾源縣黃芪基地提供),基源鑒定鑒定為蒙古黃芪Ast ragal us membranaceus Bge.var.mongholicus (Bge.) Hsiao;D-無水葡萄糖標準品由中國生物制品檢定所提供(批號110833-200503);實驗用水均為蒸餾水;其他試劑均為分析純。

1.2 儀器

前期通過試驗篩選,確定提取方法為水回流提取,進一步采用L9(33)因素水平表設計正交試驗優選提取工藝。3因素選擇對黃芪多糖提取率影響顯著的溶劑用量、提取時間、提取次數,溶劑用量3水平為10倍、15倍、20倍,提取時間3因素為1 h、1.5 h、2 h,提取次數3水平為1次、2次、3次。以葡萄糖為對照品,采用苯酚-硫酸比色法進行含量測定,最終確定最佳提取工藝為20倍量水,提取3次,每次提取1h 。

2 方法與結果

2.1 方法

756MC型紫外分光光度儀(上海分析儀器總廠); FA1104型萬分之一電子分析天平(上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠); 202 V1型電熱恒溫干燥箱(上海試驗儀器廠有限公司)。

傳統治療通常采用外固定支架或跨關節外固定架作為一期治療,二期在軟組織條件允許后改行切開復位內固定[6]。外固定支架作為初始固定,可以方便對傷口進行處理[7,8],并初步維持骨折復位,為軟組織的修復提供穩定的平臺。但這種方案治療周期較長,初期外固定支架對患者日常活動影響較大,術后限制功能活動的時間較長,釘道感染、松動、血管神經損傷、肌肉損傷及關節軟骨損傷、持續疼痛、瘢痕及再骨折的發生率較高[9]。復位丟失發生率高,二期內固定復位困難。許多患者有其他的多種合并癥及內科問題,短期無法改行內固定,導致二期內固定延遲,外固定支架存留時間及關節固定時間延長,從而影響關節功能恢復[10]。

標準曲線繪制濃度在0.01~0.15 mg/mL范圍內呈良好的線性關系。

該方法精密度試驗RSD為0.73%,加樣回收法回收率為96%,RSD為0.74%,穩定性實驗RSD為1.08%。結果均符合實驗要求。

回歸方程為:y=14.622x+0.076 R2=0.999

2.2 4個等級黃芪多糖含量測定

4個等級黃芪為一級、二級、三級和四級。分別按照優選的提取條件進行提取。提取液濃縮干燥得浸膏。浸膏蒸餾水溶解轉移定容,精密定量醇沉,抽濾后濾取物于105℃烘干6h至恒重,得粗多糖。粗多糖用蒸餾水溶解定容過濾,取續濾液定容得供試品溶液。取已制備好的4個等級的供試品溶液2.0mL,按標準曲線項下的方法,分別加入新鮮制備的5.5%苯酚溶液1.0 mL,搖勻,迅速加入5.0 mL濃硫酸,振搖5 min,置沸水浴上加熱15 min,然后置冷水浴中冷卻15 min,隨行空白,在491nm波長處測定吸光度[4],計算。1~3號為一級,4~6號為二級, 7~9號為三級,10~12號為四級,數據顯示一、二、三、四級黃芪粗多糖含量隨等級變化趨勢未表現出明顯規律,而多糖含量卻隨等級降低而升高。見表1。

表1 各等級黃芪中多糖含量測定

3 討論

目前黃芪的等級劃分主要依據藥材根頭部和中部直徑及藥材長度,一般認為黃色、細皮、質堅粉足、粗壯順直、斷面色淺黃色者佳,而本實驗結果顯示,在黃芪4級樣品含量測定中,作為黃芪中重要的一類有效成分黃芪多糖,其含量高低不完全支持現有等級劃分,多糖含量是否與生長期限與部位有關(主根或側根)有待于進一步考察。粗多糖含量卻沒有表現出同樣的規律,分析可能是粗多糖分離時未去蛋白所致。 基于此,如果產業化提取黃芪多糖,原材料的選擇可以考慮選擇毛條,毛條價低,既可以降低廠家成本,還可以充分利用有限的藥材資源。

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