初探病理切片技術(shù) 在病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用

董娟娟 馮志寅 吳怡嫻 李秀梅

摘 要 病理解剖學(xué)是研究疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律的科學(xué)，其實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容主要分為大體標(biāo)本和組織切片的病理改變學(xué)習(xí)。學(xué)生往往對(duì)組織切片的學(xué)習(xí)存在諸多問題。老師利用指導(dǎo)大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)的機(jī)會(huì)，組織學(xué)生學(xué)習(xí)并制作病理組織切片，不僅提高了學(xué)生學(xué)習(xí)的主觀能動(dòng)性及自主學(xué)習(xí)的能力，而且激發(fā)了部分同學(xué)對(duì)組織學(xué)與病理解剖學(xué)的學(xué)習(xí)興趣。為提高病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果提供了新思路新方法。

關(guān)鍵詞 病理切片技術(shù) 病理解剖學(xué) 實(shí)驗(yàn)教學(xué)中圖分類號(hào)：G642文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI：10.16400/j.cnki.kjdks.2019.04.015

Abstract Pathological anatomy is the science of studying the development of disease， the experimental teaching was mainly divided into the pathological changes of the main specimens and the biopsies. Students often have a lot of problems with the study of tissue section. The teachers instruct students to make pathological slices， not only improve the students' learning initiative and the ability of autonomous learning， and inspired the histological and pathological anatomy of students' interest in learning. New approaches were provided to improve the teaching effect of pathological anatomy.

Keywords pathological section technique; pathological anatomy; experimental teaching

病理解剖學(xué)對(duì)醫(yī)學(xué)生來說是一門非常重要的學(xué)科。它研究疾病的病因、發(fā)病機(jī)制、病理變化、結(jié)局和轉(zhuǎn)歸。[1]其內(nèi)容涉及基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)，是兩者之間的重要的“橋梁”學(xué)科，也是學(xué)習(xí)臨床醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)必修課程之一。對(duì)大多數(shù)學(xué)生來說，掌握這門既重要又復(fù)雜的課程存在一定的難度。

1 病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在的問題及原因

新疆醫(yī)科大學(xué)少數(shù)民族學(xué)生較多，絕大多數(shù)民族學(xué)生理論基礎(chǔ)較差，理解能力薄弱。病理解剖學(xué)的實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)內(nèi)容主要分為大體和組織切片的病理改變觀察兩部分。學(xué)生往往對(duì)組織切片標(biāo)本的學(xué)習(xí)存在很多問題，主要見于以下幾點(diǎn)：

第一，在病理切片學(xué)習(xí)時(shí)，難以理解實(shí)習(xí)指導(dǎo)上或老師對(duì)組織切片病理改變特征的描述。因此，獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告，在短時(shí)間內(nèi)繪出一個(gè)完整的疾病鏡下病理變化表現(xiàn)就存在很大困難。如，學(xué)生在繪制肝脂肪變性時(shí)，所繪內(nèi)容的比例、染色嚴(yán)重失調(diào)：單個(gè)肝細(xì)胞體積比中央靜脈大，肝細(xì)胞核質(zhì)紅藍(lán)涂色顛倒，肝索肝血竇結(jié)構(gòu)混亂，不知繪出的圖片表達(dá)的是什么內(nèi)容。說明學(xué)生在組織切片標(biāo)本和大體器官標(biāo)本之間聯(lián)系、轉(zhuǎn)換有障礙，甚至對(duì)老師理論及實(shí)驗(yàn)的授課內(nèi)容都沒有理解。那么幫助他們更好地認(rèn)識(shí)組織切片，理解組織切片和大體標(biāo)本之間的聯(lián)系，將有利于對(duì)這門學(xué)科的學(xué)習(xí)。

第二，對(duì)于組織學(xué)的學(xué)習(xí)內(nèi)容已經(jīng)淡忘，講授病理變化時(shí)，學(xué)生無法把正常人體組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)與病理變化的特征進(jìn)行有效的區(qū)別、對(duì)比。在醫(yī)學(xué)教育中，組織學(xué)是研究正常機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)的科學(xué)，病理解剖學(xué)是研究疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律的科學(xué)，兩者均是基礎(chǔ)形態(tài)學(xué);組織學(xué)是病理解剖學(xué)的基礎(chǔ)，學(xué)好組織學(xué)是深入學(xué)習(xí)病理解剖學(xué)的必要條件。[2]我校于第二學(xué)期開設(shè)組織學(xué)與胚胎學(xué)，第四學(xué)期開設(shè)病理解剖學(xué)，學(xué)生實(shí)習(xí)病理解剖學(xué)時(shí)，常無法分辨正常組織與病變組織，甚至不能在顯微鏡下辨認(rèn)一些具有特征結(jié)構(gòu)的器官，如：肺、腎，肝等，嚴(yán)重影響了實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果。實(shí)驗(yàn)帶教老師為了幫助學(xué)生理解，講授病理改變時(shí)往往先幫助學(xué)生回顧正常形態(tài)的內(nèi)容，再講授病理變化，大大降低了病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效率。學(xué)生繪圖作業(yè)常見錯(cuò)誤也是找不到病變部位，隨意描繪組織切片鏡下的視野，分不清病變與正常組織的形態(tài)學(xué)改變。說明學(xué)生不僅缺乏聯(lián)系組織切片和大體標(biāo)本的能力，還缺乏病變部位和周圍正常組織的區(qū)分能力。如果學(xué)生能在課前溫習(xí)組織學(xué)知識(shí)并且親自動(dòng)手取材，體驗(yàn)病理組織切片的制作過程，將有利于學(xué)生在組織切片上迅速找到病變的部位，理解病變的發(fā)生發(fā)展。

第三，病理組織切片的嗜酸性，嗜堿性改變理解混亂。病理解剖學(xué)教學(xué)切片一般為HE染色，我們用紅色代表伊紅染色的嗜酸性結(jié)構(gòu)，藍(lán)紫色代表蘇木素染色的嗜堿性結(jié)構(gòu)。學(xué)生在觀察組織切片時(shí)，易發(fā)生混淆，因此在繪圖作業(yè)時(shí)，也常見紅藍(lán)色亂用的現(xiàn)象。說明學(xué)生沒有理解組織細(xì)胞染色的意義，只是一味死記硬背哪些組織是呈現(xiàn)紅色的嗜酸性染色，哪些是呈現(xiàn)藍(lán)色的嗜堿性染色，增加了學(xué)習(xí)的負(fù)擔(dān)，卻沒有提高學(xué)習(xí)的效果。幫助學(xué)生理解HE染色技術(shù)，可以提高學(xué)生學(xué)習(xí)的自主性，加深他們對(duì)病理切片的認(rèn)知。因此，我們利用大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)的機(jī)會(huì)，額外對(duì)部分學(xué)生開展了病理切片技術(shù)的實(shí)習(xí)指導(dǎo)。

2 利用大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)病理切片技術(shù)

大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)，是“以問題為導(dǎo)向的學(xué)習(xí)”，改變了原來的被動(dòng)學(xué)習(xí)狀況，轉(zhuǎn)被動(dòng)為主動(dòng)，為學(xué)生創(chuàng)造了新的學(xué)習(xí)環(huán)境。[3]新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院每學(xué)期推出10～15項(xiàng)大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)大學(xué)生的實(shí)踐動(dòng)手能力、分析和解決問題能力。

形態(tài)中心承接新疆醫(yī)科大學(xué)病理解剖學(xué)、組織學(xué)與胚胎學(xué)、免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)免疫學(xué)、病原微生物學(xué)、人體寄生蟲學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)活動(dòng)，是大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的主要場(chǎng)所。形態(tài)學(xué)中心教師本著讓學(xué)生在每一次實(shí)驗(yàn)中最大限度的學(xué)習(xí)知識(shí)、提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物利用率的宗旨，在申報(bào)擬定的開放性試驗(yàn)中額外增加病理切片制作的環(huán)節(jié)。利用實(shí)驗(yàn)后處死的小鼠、大鼠或兔子的組織器官，從組織固定開始，經(jīng)過脫水、透明、包埋、切片、染色、封片等過程，指導(dǎo)學(xué)生自己動(dòng)手制作切片。在制作切片的過程中，指導(dǎo)老師結(jié)合實(shí)體組織幫助學(xué)生回顧組織學(xué)知識(shí)，充分認(rèn)識(shí)疾病的演變過程，掌握切片的制作工藝，為病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。最重要的是幫助接受能力差的學(xué)生理解教學(xué)常用的石蠟HE染色切片中，嗜堿性的藍(lán)紫色和嗜酸性的粉紅色在細(xì)胞層面的存在與關(guān)系、組織異常部位和正常部位的區(qū)分、組織切片和大體器官組織的聯(lián)系、轉(zhuǎn)換。加深了學(xué)生對(duì)病理解剖學(xué)知識(shí)的理解能力;也使學(xué)生認(rèn)識(shí)了組織學(xué)—病理學(xué)—臨床醫(yī)學(xué)之間的動(dòng)態(tài)演變過程;提升了學(xué)生綜合運(yùn)用知識(shí)的能力，為其今后走上臨床及相關(guān)工作打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

3 病理切片技術(shù)幫助學(xué)生理解病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)

利用大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)學(xué)生制作組織切片，學(xué)生普遍反映效果非常好。不僅提高了學(xué)生學(xué)習(xí)的主觀能動(dòng)性及自主學(xué)習(xí)的能力，而且激發(fā)了部分同學(xué)對(duì)組織學(xué)與病理解剖學(xué)的學(xué)習(xí)興趣。 病理解剖學(xué)是一門直觀性、實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科，直觀的教學(xué)方式在病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中十分重要，但對(duì)于少數(shù)民族同學(xué)來說，一味的講解展示并不能幫助他們更好的理解。病理解剖學(xué)內(nèi)容涉及廣泛、概念抽象、形態(tài)變化多樣，病變時(shí)組織原有的形態(tài)發(fā)生了程度不同的變化，導(dǎo)致學(xué)生無法辨別。同時(shí)由于部分學(xué)生語言接受能力、理解能力有限，對(duì)課程的聯(lián)系和內(nèi)容了解不到位，使學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中難免會(huì)遇到更多障礙。為解決這些問題，經(jīng)過多位多年實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)豐富老師的總結(jié)，認(rèn)為直觀教學(xué)方式結(jié)合學(xué)生動(dòng)手是一種比較有效的教學(xué)途徑。

通過指導(dǎo)學(xué)生制作HE染色的組織切片，使學(xué)生在有限的時(shí)間內(nèi)不僅接觸了大體標(biāo)本，還透徹的認(rèn)識(shí)了組織切片，正所謂“百聞不如一見”。首先，學(xué)生對(duì)組織切片的理解不再是“紅藍(lán)線條構(gòu)成的圖”，他們通過自己切割病變組織（取材）、固定、切片，染色等，真正意義的認(rèn)識(shí)到組織切片是大體標(biāo)本的一部分，和大體標(biāo)本密不可分。組織切片呈現(xiàn)的染色及形態(tài)改變和大體標(biāo)本的病理改變相輔相成。其次，學(xué)生能夠在切片上迅速的找到病變部位。因?yàn)榍衅牟∽儾课缓退麄內(nèi)〔牡拇篌w標(biāo)本病變部位是一致的。指導(dǎo)老師在學(xué)生處理大體標(biāo)本時(shí)就幫助他們區(qū)分病變區(qū)域及周圍的正常組織，當(dāng)他們面對(duì)同源的切片時(shí)，稍加引導(dǎo)，學(xué)生就可以迅速的把顯微鏡視野轉(zhuǎn)到病變的核心部位。在這個(gè)過程里，組織學(xué)知識(shí)也逐漸的被回顧，將利于病理解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果。再者，學(xué)生經(jīng)過組織切片的層層染色，理解了嗜酸性嗜堿性染色的原理，不需要再死記硬背，有效的避免了繪圖作業(yè)時(shí)，“紅藍(lán)”錯(cuò)用的現(xiàn)象。參與切片制作的少數(shù)民族學(xué)生普遍反映以前覺得病理解剖學(xué)是一門既難學(xué)又乏味的課程，但是理解之后發(fā)現(xiàn)這是一門感興趣的學(xué)科。

“興趣是最好的老師”——指導(dǎo)學(xué)生參與到病理組織切片的制作中來，對(duì)病理解剖學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)十分有益。然而，病理切片的制作對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品、實(shí)驗(yàn)設(shè)備、實(shí)驗(yàn)試劑以及實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求都頗高，很難普及到每個(gè)同學(xué)。本次嘗試也只是利用大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)的機(jī)會(huì)及平臺(tái)初見成效。希望在日后的教學(xué)工作中，有更多的資源讓教師和學(xué)生的共同參與、相互促進(jìn)，力求讓學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)掌握更多知識(shí)，將目前所學(xué)能夠運(yùn)用到實(shí)踐中去，同時(shí)提高學(xué)生發(fā)現(xiàn)問題、解決問題的能力。

[1] 李玉林.病理學(xué)（第7 版）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：11.

[2] 李林.組織胚胎學(xué)與病理學(xué)相結(jié)合教學(xué)改革的實(shí)踐.解剖學(xué)雜志，2009.32（5）：708-710.

[3] 鄧思敏，高勁松，熊宇龍，等.新時(shí)期大學(xué)生開放性實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革初探[J].資治文摘（管理版）2009（8）：74.