黃傘多糖對競技運動員抵抗能力的作用機理

袁 峰

（中國農業大學（北京）體育與藝術教學部，北京 100193）

運動抵抗能力相關研究已經表明，長期從事高強度訓練的競技運動會形成顯著的運動型抵抗抑制現象，造成運動員抵抗能力明顯低下，對不同感染性疾病的抵抗能力顯著降低。不但會對運動能力與比賽成績產生影響，還會影響運動壽命與身體健康[1,2］。所以對競技運動員抵抗能力作用機理進行研究，為特別關鍵且亟需解決的重要課題[3］。

造成競技運動員運動性免疫抑制的原因較為復雜，涉及神經系統、內分泌系統以及免疫系統，還和免疫增強類信息物以及免疫抑制類信息物的平衡相關[4］。當前常用的調整競技運動員抵抗能力的方法，主要有補充免疫細胞營養物質、攝入抗氧化劑及微量元素等[5,6］。然而這些方法的效果通常不理想。黃傘屬于食用菌，主要生長在楊樹、柳樹和樺樹上。藥用價值很高，能夠抑菌抗癌、降血脂、調節抵抗力以及抗氧化。

本研究將黃傘作為實驗材料，通過多糖提取工藝對黃傘多糖進行提取，研究提取的黃傘多糖對競技運動員抵抗能力的作用機理，旨在提高競技運動員抵抗能力。

1 研究對象和方法

1.1 研究對象

選擇專業男子籃球運動員20人，其中一級運動員8人，二級運動員12人。所有研究對象都沒有代謝和免疫系統疾病史，在進行實驗前1個月無患病，同時志愿參與實驗。將研究對象任意劃分成實驗組與對照組，每組10人，詳細情況用表1進行描述。

表1 研究對象詳細情況Tab.1 Details of the research subjects

1.2 黃傘多糖提取

提取黃傘多糖時，將子實體粉作為基礎材料，粗多糖提取過程如下。對子實體干粉進行稱量，添加25倍體積蒸餾水，搖勻后，進行冷凝回流處理，提取1 h；經離心處理獲取上清液，對其進行旋轉蒸發，將其濃縮到原體積的20%；在常溫下冷卻，在攪拌的同時添加3倍體積的乙醇，進行密封，醇析15 h；離心將上清液濾除，獲取沉淀物，經洗滌、沉淀、干燥處理，得到粗多糖。

得到粗多糖后，對其進行提純，詳細過程如下。通過Sevage法將黃傘粗多糖中的蛋白進行濾除，對子實體粗多糖進行稱量，配置為16 mg·mL-1的多糖溶液；取一定量溶液置于分液漏斗，添加相同體積的Sevage試劑[7］，搖勻后靜置，離心濾除沉淀物，得到上層多糖溶液；在高溫環境下干燥到恒重，獲取純化多糖，制成黃傘多糖膠囊。

1.3 研究方法

1.3.1 服用黃傘多糖膠囊方法

實驗選擇雙盲法，實驗組運動員在實驗期間每天早晚服用黃傘多糖膠囊，每次2粒，共服用35 d。對照組運動員除不服用黃傘多糖膠囊外，其余與實驗組運動員相同。實驗組與對照組運動員都進行心率每分鐘180次～190次強度的運動訓練，飲食正常。

1.3.2 取樣時間和指標測試

實驗組和對照組運動員在訓練前與訓練結束后第2天清晨在安靜狀態下取肘靜脈血5 mL，經肝素抗凝后待檢測。

血清免疫球蛋白IgA、IgG以及IgM通過免疫比濁法，采用半自動生化分析儀進行測試[8,9］。

T淋巴細胞亞型CD4＋、CD8＋百分比計數和CD4＋/CD8＋值通過Annexin V染色法，利用流式細胞儀進行測試[10］。

NK細胞活性檢測通過免疫組化染色法，利用流式細胞儀測試。IL-2通過放射免疫分析法進行測試[11,12］。

1.4 統計學處理

全部實驗數據均通過SPSS 12.0軟件進行處理分析，通過均值±標準差的形式進行描述，組間通過t檢驗比較，P＜0.05代表差異存在統計學意義[13］。

2 實驗結果

2.1 黃傘多糖對免疫球蛋白的作用機理

IgA、IgG和IgM代表3種不同的免疫球蛋白，依次為粘膜免疫中的主要分泌抗體、免疫反應抗體以及初次免疫抗體，3種免疫球蛋白和運動員抵抗能力有密切關系，訓練前后實驗組與對照組3種免疫球蛋白變化情況用表2進行描述。

表2 訓練前后2組競技運動員免疫球蛋白變化情況Table 2 Changes of immunoglobulin in athletes of two groups before and after Training

分析表1可以看出，競技運動員訓練后，實驗組與對照組IgA、IgG以及IgM變化顯著，和訓練前相比，實驗組IgA、IgG以及IgM明顯增加，對照組IgA、IgG以及IgM明顯降低，差異均有統計學意義（P＜0.05），實驗組IgA、IgG以及IgM非常顯著性高于對照組 （P＜0.01）。

2.2 黃傘多糖對T淋巴細胞亞群的作用機理

訓練前后實驗組與對照組T淋巴細胞亞群變化情況用表3進行描述。

分析表3可知，對照組運動員訓練后CD4＋百分比計數和CD4＋/CD8＋值有所降低，CD8＋百分比有所升高，但差異無統計學意義（P＞0.05），實驗組運動員訓練后CD4＋百分和CD4＋/CD8＋值相比顯著升高，差異有統計學意義（P＜0.05），CD8＋百分比在一定程度上有所降低，但差異無統計學意義（P＞0.05）。訓練后實驗組運動員CD4＋百分和CD4＋/CD8＋值顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），CD8＋百分比顯著低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。

表3 訓練前后2組競技運動員T淋巴細胞亞群變化情況Table 3 Changes of T lymphocyte subsets in two groups of athletes before and after training

2.3 黃傘多糖對NK細胞活性和IL-2水平的作用機理

訓練前后實驗組與對照組NK細胞活性和IL-2水平變化情況用表4進行描述。

分析表4可知，實驗組與對照組NK水平訓練后較訓練前均有顯著變化，差異有統計學意義（P＜0.05），訓練后實驗組較實驗前有顯著變化，差異有統計學意義（P＜0.05）。而IL-2水平在實驗過程中一直無顯著變化，差異無統計學意義（P＞0.05）。

表4 訓練前后2組競技運動員NK細胞活性和IL-2水平變化情況Table 4 Changes of NK cell activity and IL-2 level in two groups of athletes before and after training

3 討論

競技運動員在高強度訓練工程中，會出現細胞免疫抑制，導致機體對病原微生物易感性提高，容易感染疾病。黃傘多糖是一種可提高機體抵杭能力的物質，本研究探索黃傘多糖對競技運動員抵抗能力的作用機理。

免疫球蛋白為人體重要的免疫因素，其升高或下降和競技運動員身體疲勞、疾病以及營養狀態均存在關系，所以在實際應用中，通常通過IgA、IgG以及IgM含量變化對競技運動員免疫機能狀態進行評價，從而得到經濟運動員抵抗能力的評價結果。

經35 d實驗，實驗組與對照組IgA、IgG以及IgM均出現顯著改變，差異有統計學意義（P＜0.05），其中實驗組運動員IgA、IgG以及IgM顯著升高，對照組運動員IgA、IgG以及IgM顯著降低。因為黃傘多糖中含有的多糖成分可有助于刺激吞噬細胞與胸腺細胞等的活化，在存在外界細菌與病毒入侵的情況下，可增強運動員體抵抗能力。有研究表明，黃傘多糖可促進淋巴細胞增殖，為機體提供營養，增強抵抗能力，同時可提高機體抗氧化能力，延緩器官衰老。

本研究結果說明，在35 d大強度訓練過程中，服用黃傘多糖膠囊可促進IgA、IgG以及IgM的合成，幫助增強競技運動員的抵抗能力，以達到防治免疫抑制，降低干擾疾病風險的目的。

經大量研究表明，T淋巴細胞及其亞群與運動員抵抗能力有重要關系，如高強度訓練后期CD4＋/CD8＋值顯著降低，代表運動員免疫功能出現紊亂。

T淋巴細胞是一種非常關鍵的免疫活性細胞，按照表面標志CD分子的差異可將其劃分成CD4＋T細胞與CD8＋T細胞2種亞群，依據功能差異可將其劃分成輔助性T細胞、抑制性T細胞以及細胞毒性T細胞。T淋巴細胞為免疫應答中細胞免疫的重要執行者，是體現機體抵抗能力的關鍵指標。CD4＋/CD8＋值升高代表免疫應答的正調節占優勢，若其值低于1，則認為機體抵抗能力很差。有研究表明，經長期高強度訓練，運動員抵抗力會下降，表現為CD8＋T細胞過度激活以及CD4＋T細胞過度抑制。

本研究表明，對照組訓練后CD4＋百分比和CD4＋/CD8＋值顯著降低，CD4＋/CD8＋值趨近于 1，說明高強度訓練令運動員抵抗能力降低。實驗組訓練后CD4＋百分比較訓練前增加，說明實驗組運動員訓練后抵抗能力提高，訓練后CD4＋百分比和CD4＋/CD8＋值顯著升高，說明實驗組運動員抵抗能力較對照組顯著提高，這主要是因為黃傘多糖對競技運動員抵抗能力有積極作用。

NK細胞為免疫系統的重要效應細胞，可有效調節免疫功能，改善機體抵抗力。大部分研究人員認為，短期高強度運動能夠令NK細胞活性提升，但長期高強度運動會令NK細胞活性降低。本研究表明，實驗組與對照組運動員訓練后NK細胞活性都顯著降低（P＜0.05），但實驗組顯著高于對照組（P＜0.05），說明黃傘多糖能夠提高NK細胞活性。IL-2由輔助性淋巴細胞分泌的重要細胞因子，在大部分免疫反應中起到了調節的作用，能夠增強免疫應答反應，提升NK細胞活性。本研究表明，訓練前后IL-2水平無顯著差異（P＞0.05），訓練后對照組與實驗組IL-2水平也無顯著差異。

綜上可知，35 d高強度訓練能令競技運動員抵抗能力降低，黃傘多糖可有效提高競技運動員抵抗能力，調節免疫力，其作用機理為提高CD4＋百分和CD4＋/CD8＋值、T淋巴細胞亞群水平以及NK細胞活性。