廣金錢草和金錢草不同部位總黃酮含量研究

1.桂林醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院，廣西 桂林 541199；2.桂林醫(yī)學院，廣西 桂林 541199

廣金錢草為豆科植物廣金錢草Desmodiumstyracifolium(Osb.) Merr.的干燥地上部分，具有利濕退黃、利尿通淋的功效，用于黃疸尿赤、熱淋、石淋、小便澀痛等。金錢草為報春花科植物過路黃LysimachiachristinaeHance.的干燥全草，具有利濕退黃、利尿通淋、解毒消腫的功效，用于濕熱黃疸、石淋、熱淋、小便澀痛等[1]。由此可見，廣金錢草和金錢草臨床功效相似，而兩者都含有黃酮類成分[2-3]，本研究以蘆丁為對照品，采用紫外分光光度法對廣金錢草和金錢草不同部位的總黃酮含量進行測定，考察兩種藥材以及不同藥用部位總黃酮含量，可以對廣金錢草和金錢草進行更好的開發(fā)利用，為臨床應用提供參考依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 UV1100紫外分光光度儀(上海精密科學儀器有限公司)；梅特勒托利多EL204電子天平；KQ5200DB超聲儀(昆山市超聲儀器)。

1.2 材料 蘆丁對照品(批號：100416-201607，中國食品藥品檢定研究院)。金錢草采自廣西桂林，廣金錢草采自廣東廉江，均經(jīng)桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院蔡小琳主任中藥師鑒定為報春花科植物過路黃和豆科植物廣金錢草。95%乙醇，六水合氯化鋁，三水合乙酸鈉和醋酸等試劑均為分析純。

1.3 材料處理 將干燥廣金錢草和金錢草莖，葉分離備用。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液制備 精密稱取蘆丁對照品0.0109 g(蘆丁含量為97.5%)，用50%乙醇溶液溶解并定容至50 mL容量瓶中，搖勻，得對照品溶液(2.1255×10-4g/mL)。

2.2 供試品溶液制備 分別精密稱定金錢草和廣金錢草全草0.5 g，葉0.4 g，莖1.0 g置50 mL具塞錐形瓶中，加30 mL 50%乙醇溶液超聲提取30 min[5]，過濾，并將濾液用50%乙醇溶液定容至50 mL容量瓶中，即得供試品溶液。

2.3 線性關系考察 精密量取對照品溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL分別置于25 mL容量瓶中，分別加入0.1 moL/L三氯化鋁1.0 mL，pH醋酸-醋酸鈉緩沖液1.0 mL，加水稀釋至刻度，搖勻，在波長272 nm處測定吸收值[4]。以濃度X為橫坐標，以吸光值A為縱坐標，得到回歸方程Y=1167X+0.010，r2=0.999。表明蘆丁在4.251×10-6g/mL～3.4008×10-5g/mL范圍內(nèi)線性關系良好。

2.4 精密度實驗 取對照品溶液1.0 mL，重復測定5次，測得吸光度值，計算RSD=0.32%，結果表明本實驗方法精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性實驗 精密量取廣金錢草和金錢草供試品溶液(全草)1 mL，按2.3項加入顯色劑，于0、10、20、30、40、50、60、90 min分別測定吸光度值，RSD分別為1.13%和0.94%。表明供試品溶液90 min內(nèi)穩(wěn)定，穩(wěn)定性良好。見表1。

表1 穩(wěn)定性實驗

2.6 加樣回收率實驗 分別精密稱定已知含量廣金錢草和金錢草供試品溶液(全草)0.5 g，按2.2項下制得供試品溶液，分別加入蘆丁對照品溶液 0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、3.0 mL，經(jīng)過顯色反應后測定吸光值。結果見表2和表3。

表2 廣金錢草加樣回收率實驗

表3 金錢草加樣回收率實驗

2.7 金錢草和廣金錢草各部位總黃酮含量測定 分別取廣金錢草和廣金錢草莖，葉和全草，按2.2項下制得供試品溶液，經(jīng)過顯色反應，測得總黃酮含量。結果見表4。

表4 廣金錢草和金錢草不同部位總黃酮含量測定

3 結論

上述研究中發(fā)現(xiàn)，廣金錢草莖、葉和全草的含量分別為0.78%、3.84%和2.33%；金錢草莖、葉和全草的含量分別為0.24%、3.15%和1.61%。由此可見，總黃酮含量在金錢草和廣金錢草各部位含量為廣金錢草葉>金錢草葉>廣金錢草全草>金錢草全草>廣金錢草莖>金錢草莖。廣金錢草各部位的總黃酮含量分別大于金錢草各部位總黃酮含量，而廣金錢和金錢草葉的總黃酮含量最大，其次是全草，莖最小。

本研究使用乙醇做提取溶劑，毒性較小，對環(huán)境污染較其他試劑少，提取率較高；選用紫外分光光度法做為檢測方法操作簡便，檢測成本較低。研究中線性關系、精密度、穩(wěn)定性、加樣回收率均符合含量測定要求，采用的總黃酮含量檢測方法可靠可行。廣金錢草和金錢草中葉的總黃酮含量均最大，莖的含量最小，而廣金錢草葉比金錢草葉的總黃酮含量大。

《中國藥典》中以夏佛塔苷作為廣金錢草含量測定指標，以槲皮素和山奈素作為金錢草含量測定指標[1]。夏佛塔苷，槲皮素和山奈素均屬于黃酮類成分，而廣金錢草和金錢草藥理作用有相似之處[6]，故本研究測定廣金錢草和金錢草不同部位總黃酮含量，研究結果可以為其資源開發(fā)和臨床使用提供一定的研究依據(jù)。