同母異父雙胞胎親子鑒定1例

楊澤登，蘭玲梅，謝平麗，肖俊新，孟凡明，劉艷芳，孫淑樂，扎拉嘎白乙拉

（1.中南大學基礎醫學院法醫學系，湖南 長沙 410013；2.中南大學湘雅司法鑒定中心，湖南 長沙 410013）

1 案 例

1.1 簡要案情

某年7月，本鑒定中心受當事人孔某文的委托，受理了孔某文及其雙胞胎孩子孔某萌（女）和孔某祥（男）有無血緣關系的案件。采集孔某文、孔某萌和孔某祥的血樣進行STR基因座分型檢測。

1.2 檢驗方法

1.2.1 DNA提取

使用常規的Chelex-100法提取DNA[1]。

1.2.2 常染色體STR基因座檢測

采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統20A［基點認知技術（北京）有限公司］對上述3個血樣提取的DNA進行19個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座的分型檢測。采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統22NC［基點認知技術（北京）有限公司］進行20個常染色體非CODIS STR基因座、1個常染色體CODIS STR基因座（D3S1358）和Amelogenin性別基因座的分型檢測。擴增體系均為10μL，擴增程序按相關試劑盒說明書進行，擴增反應在9700型PCR儀（美國AB公司）上進行。擴增產物應用3130xl基因分析儀（美國AB公司）電泳檢測之后，應用GeneMapper?IDv3.2軟件進行數據分析。

1.2.3 X-STR基因座檢測

采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統17X［基點認知技術（北京）有限公司］檢測孔某文和孔某萌X染色體上17個X-STR基因座的分型。依據試劑盒說明書進行擴增、電泳和結果分析。

1.2.4 同胞關系指數的計算

采用ITO法[2-4]計算孔某萌和孔某祥間的全同胞指數（full sibling index，FSI）、半同胞指數（half sibling index，HSI）以及全同胞指數與半同胞指數的比值（FSI∶HSI）。

1.3 檢測結果

1.3.1 Goldeneye?DNA身份鑒定系統20A的檢測結果

經Goldeneye?DNA身份鑒定系統20A檢測，19個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座的分型結果見表1。從表1可知：19個常染色體STR基因座中，孔某文和孔某萌在11個基因座（D19S433、D18S51、D6S1043、D3S1358、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、Penta E、D2S1338、FGA）的分型結果不符合孟德爾遺傳定律，經計算，累積父權指數（combined paternity index，CPI）＜10-30，不支持孔某文作為孔某萌的生物學父親；對于孔某文和孔某祥，19個常染色體STR基因座的分型結果均符合孟德爾遺傳定律，且CPI＞10000（CPI=7581647.86），支持孔某文作為孔某祥的生物學父親。

1.3.2 Goldeneye?DNA身份鑒定系統22NC的檢測結果

三人的血樣采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統22NC檢測后，21個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座的分型結果見表2。從表2可知：孔某文和孔某萌的檢測結果中，除了與Goldeneye?DNA身份鑒定系統20A檢測的相同基因座D3S1358的基因分型不符合孟德爾遺傳定律外，還有9個常染色體STR基因座（D15S659、D14S608、D3S1744、D2S441、D18S535、D10S1435、D11S2368、D19S253、D10S1248）的分型結果不符合孟德爾遺傳定律，經計算，該22NC系統的CPI為1.028 9×10-25，不支持孔某文作為孔某萌的生物學父親；對于孔某文和孔某祥，該檢測系統的基因分型結果表明，所有基因座的分型結果均符合孟德爾遺傳定律（CPI=419 736.75），明確支持孔某文作為孔某祥的生物學父親。

表1 三人血樣經Goldeneye?DNA身份鑒定系統20A檢測的結果

表2 三人血樣經Goldeneye?DNA身份鑒定系統22NC檢測的結果

1.3.3 Goldeneye?DNA身份鑒定系統17X的檢測結果

經Goldeneye?DNA身份鑒定系統17X檢測孔某文和孔某萌在X染色體上的基因分型，結果見表3。孔某文和孔某萌在8個STR基因座（DXS6795、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS6807、DXS6803、DXS10134、DXS10159）上未檢見相同的等位基因。

表3 孔某文和孔某萌的血樣經Goldeneye?DNA身份鑒定系統17X檢測的結果

1.3.4 同胞指數計算結果

采用ITO法對Goldeneye?DNA身份鑒定系統20A和Goldeneye?DNA身份鑒定系統22NC共39個常染色體STR基因座的FSI、HSI和FSI∶HSI值進行計算，結果見表4。其中，HSI值明顯大于19，FSI∶HSI值明顯小于1，傾向于支持孔某萌和孔某祥為半同胞關系。

表4 ITO法計算孔某萌和孔某祥間同胞關系的結果

2 討 論

本研究采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統20A對被檢父親（孔某文）與異卵雙胞胎姐弟（孔某萌和孔某祥）進行親子鑒定，發現孔某文和孔某萌在11個常染色體STR基因座的分型結果不符合孟德爾遺傳定律，而孔某文與孔某祥在所有基因座的分型結果均符合孟德爾遺傳定律。因母親樣本缺失，所以本研究又采取了Goldeneye?DNA身份鑒定系統22NC進行了補充檢驗。最終兩次檢測結果均不支持孔某文作為孔某萌的生物學父親，支持孔某文作為孔某祥的生物學父親。由于父女之間X染色體上的STR基因座以單倍型的形式遺傳，檢測X-STR基因座在父女遺傳關系的鑒定中可以提供有效的認定或排除信息，具有獨特的優勢，故本研究采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統17X檢測孔某文和孔某萌的17個X-STR基因座，結果表明，孔某文和孔某萌的X-STR基因座分型結果不符合X染色體遺傳定律。

此外，在全同胞-半同胞的鑒定中，FSI與HSI的比值是較合適的定量指標[5]。依據陸惠玲等[3]以常染色體STR基因座為基礎建立的同胞關系判定規則，即以 FSI∶HSI≥1 與 FSI∶HSI＜1 分別作為全同胞和半同胞的判定標準，以HSI≥19與HSI≤1分別作為半同胞和無關個體的判定標準。本例通過ITO法計算孔某萌和孔某祥的同胞關系指數，結果表明，HSI值明顯大于19，FSI∶HSI值明顯小于1，傾向于支持孔某萌和孔某祥為半同胞關系。結合常染色體和X-STR基因座的檢測結果及案情，支持孔某萌和孔某祥為同母異父雙胞胎親緣關系。

雙胞胎可以分為兩類，即同卵雙生子和異卵雙生子。同卵雙生子是由一個相同的受精卵分裂而來，雙生子的基因組DNA完全一致；異卵雙生子是由兩個卵子幾乎同時發生受精作用產生，雙生子的基因組DNA并不完全一致。雙胞胎的發生率很低，為1%～3%[6]，而異卵雙生子的發生概率更低。據WENK等[7]報道，在13 000例雙胞胎親子鑒定案件中，只有1例案件的鑒定結果是同母異父雙胞胎；據JAMES[8]報道，在美國，每400對雙胞胎中只有一對雙胞胎的母親發生異父同期復孕。本案例中異卵雙生同母異父的情況非常罕見，近年來國內只有個別相關案例的報道[9-10]。同母異父雙胞胎情況的發生，是由于育齡女性在排卵日一次排出兩個或者連續排出兩個成熟的卵子，且在24 h內該育齡女性與兩名男子發生性關系，導致兩個卵子分別與兩名男性的精子發生了受精作用，故而出現異卵雙生的情況。本案例中，孩子生母承認在排卵期間曾與另一名男子發生過性關系。這種案件很罕見，故在進行親子鑒定時應當謹慎，如果被檢父親與女兒之間不符合孟德爾遺傳定律，建議加做X染色體遺傳標記，如果被檢父親與兒子之間不符合孟德爾遺傳定律，則建議加做Y染色體遺傳標記。