張 楊 , 龐鈴津 , 李云鵬 , 于妮娜 , 李沐森,2 , 孫青松,2
(1.吉林農業科技學院動物科技學院 , 吉林 吉林 132101 ; 2.預防獸醫學吉林省重點實驗室 , 吉林 吉林 132101)
筆者于2018年6月接診吉林市某養豬場發生小規模母豬流產、死胎癥狀的病例,經過臨床觀察、病理剖檢及實驗室檢驗等檢測方法進行診斷,確診該豬群感染病為弓形蟲急性病例,并對其進行治療控制了病情,該病的診治過程介紹如下。
2018年5-6月,吉林市某養豬場200頭母豬有13頭妊娠母豬陸續出現流產、死胎等癥狀。根據養豬場負責人介紹,該豬群按照相關規定均已免疫接種傳染病疫苗,發病后使用多種抗生素及抗病毒中藥進行治療,效果均不理想。
該養豬場有母豬200頭,自5月份開始陸續發病,出現食欲減退、精神萎靡,呼吸困難,有漿液性鼻液,大力喘氣,犬坐狀張口呼吸,母豬體溫升高至41.5 ℃,呈稽留熱型,在耳部及四肢皮膚出現紫紅色出血點,接著出現流產、死胎等癥狀。對流產死亡胎兒進行尸體剖檢,發現胎兒的各個臟器有不同程度的水腫、出血和淤血點,腹腔內有水腫液積聚。
根據主要臨床特征及剖檢變化,首先懷疑可引起妊娠母豬出現流產、死胎等癥狀的重要豬傳染病,如豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬病及布魯菌病,首先收集死亡胎兒的組織樣本,進行病毒分離與培養,提取組織樣品的DNA,設計特異性引物,利用PCR方法進行擴增。結果顯示,3種病毒均無特異性條帶擴增出來,均為陰性。布魯菌病采取膠體金試紙條進行血清檢測,結果顯示為陰性。
設計弓形蟲的特異性引物(529 bp重復序列片段由華中農業大學獸醫寄生蟲學實驗室提供),進行PCR擴增,然后擴增產物進行1%瓊脂糖凝膠電泳,用凝膠成像系統觀察結果并采集圖像,利用DNA快速回收試劑盒回收PCR產物連接載體后,送生工生物工程(上海)股份有限公司進行測序。結果顯示,13個流產病例樣品中有10個檢測為陽性,可擴增出特異性529 bp條帶(圖1),測序結果表明,該條帶與GenBank發表的弓形蟲序列(AF146527)相似性為100%,因此判定該流產為弓形蟲病感染引起。

圖1 弓形蟲的PCR檢測結果
M: DL-2 000 DNA Marker ; 1~4: 組織樣本的PCR產物
5 治療
根據診斷結果,給豬群磺胺類藥物磺胺甲氧吡嗪(SMPZ)加甲氧芐胺嘧啶(TMP),二者3∶1比例混合,即前者按每千克體重30 mg,后者按每千克體重10 mg,口服,每天1次,連用5 d。同時補充營養物質,并對豬舍進行消毒。
經過綜合治療,3 d后該豬群體溫基本恢復正常,精神、飲欲、食欲好轉,7 d 后陰門不再有血性分泌物排出,10 d后該豬群流產、死胎等癥狀消失。弓形蟲感染得到了控制。
(參考文獻略)