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三種小果蕁麻提取物體外抑菌作用研究

2019-05-14 02:51:24劉麗霞劉丹
醫藥前沿 2019年10期
關鍵詞:實驗

劉麗霞 劉丹

(1 昆明市食品藥品檢驗研究所 云南 昆明 650034)

(2 云南省第二人民醫院藥劑科 云南 昆明 650051)

小果蕁麻(Urtica atrichocaulis(Hand.-Mazz.)C.J.Chen)為蕁麻科蕁麻屬、多年生野生草本植物,有木質化的根狀莖,分布于貴州西南部、四川和云南海拔300-2600米山腳路旁、山谷或溝邊[1]。蕁麻全草富含多種維生素、鞣質。莖皮主要含蟻酸、丁酸及有刺激作用的酸性物質[2]。莖皮纖維可供紡織用;全草可入藥,具有祛風除濕、解痙、活血和止咳之功效,主要用于小兒高熱驚風,痙攣抽搐,角弓反張,跌打損傷,扭傷,閃挫傷,金傷,風熱濕痹,關節疼痛,四肢拘攣,腰膝疼,手足麻木,骨痛;外用疹出不暢,痘疹不透[3]。不同的提取溶媒得到的提取液有效成分存在差異,抑菌作用也隨之改變。目前國內外主要針對同屬的異株蕁麻、麻葉蕁麻等的研究,尚無關于小果蕁麻的研究,對其抑菌特性也未見報道。

1.材料與方法

1.1 實驗材料

供試菌種為表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、淺黃假單胞菌(Pseudomonas luteola)、腸膜明串珠菌乳脂亞種(Leuconostoc mesenteroides ssPcremoris)、緩慢芽孢桿菌(Bacillus lentus)、中間葡萄球菌(Staphylococcus intermedius)、無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、福氏志賀氏菌(Shigella fushigella)、大腸埃希氏菌(Escherichia coli)、乙型副傷寒沙門氏菌(Salmonella Paratyphi B)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、奇異變形桿菌(Proteus mirabilis)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、藤黃微球菌 (Micrococcus luteus)、溶血性葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)、小牛葡萄球菌(Staphylococcusvitulinus),菌株均來自中國醫學菌種保藏中心或實驗室環境中分離后經鑒定的菌株。

小果蕁麻[Urtica atrichocaulis(Hand.-Mazz.)C.J.Chen]于9月在盤龍區阿子營山坡旁采收地上部分,經過鑒定。

1.2 試劑

乙酸乙酯、無水乙醇,均為分析純。

1.3 儀器

游標卡尺、MLS-3781L-PC壓力蒸汽滅菌器、PYXDHS·500-BS-Ⅱ隔水式恒溫培養箱、生物安全柜、電子天平。

1.4 培養基

胰酪胨大豆瓊脂培養基(TSA)

2.實驗方法

2.1 供試液制備

稱取3份干燥小果蕁麻全草,每份10g,分別置于圓底燒瓶中,分別加入10倍量的純化水、70%乙醇、乙酸乙酯,浸泡2h,加熱回流提取30min,趁熱過濾,濾液濃縮至10ml,作為供試品溶液;同法制備空白溶液。

2.2 菌液制備

取實驗菌株接種至營養瓊脂斜面上,置于37℃恒溫培養箱中培養24h,取斜面上菌落至無菌生理鹽水中,制成0.5麥氏單位的菌懸液,備用。

2.3 抑菌實驗

取適量菌懸液,用無菌棉簽均勻涂布于無菌TSA平板上,取6mm直徑的無菌濾紙于帶菌平板上,每個平板放5張,4張加入15μl的供試液,1張加入空白對照溶液,置于37℃恒溫培養箱中培養24h,測量并記錄抑菌圈直徑,計算平均值。

3.結果

空白對照均無抑菌作用,不同溶媒提取的小果蕁麻提取液的抑菌作用及抑菌圈均有所差異,結果見表1、表2。

表1 小果蕁麻提取物的抑菌作用

表2 不同小果蕁麻提取液抑菌圈直徑

4.結論

從表1可以看出小果蕁麻的醇提取液及水提取液對大多數革蘭氏陽性、陰性菌均有抑制作用,與醇提取液相比,水提取液對金黃色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、大腸埃希氏菌、乙型副傷寒沙門菌無抑菌作用;乙酸乙酯提取液對革蘭氏陽性、陰性菌均無抑制。從表2可知,小果蕁麻醇提取液比水提取液抑菌效力強。本次實驗證明小果蕁麻有明顯的抑菌作用,為臨床應用提供了科學依據,但小果蕁麻提取液抑菌作用機制有待進一步研究。

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