乳腺癌組織中雌激素受體、孕激素受體、P-糖蛋白、谷胱甘肽-s-轉移酶-π及DNA拓撲異構酶Ⅱ的表達及臨床意義

顏霞 采麗 唐海旭

[摘要]目的 探討乳腺癌組織中雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、P-糖蛋白（P-gP）、谷胱甘肽-s-轉移酶-π（GST-π）及DNA拓撲異構酶Ⅱ（Topo Ⅱ）的表達水平。方法 選取淮安市婦幼保健院2010年9月～2014年1月手術切除后經病理診斷為乳腺癌的91例標本，采用免疫組化方法檢測ER、PR、P-gP、GST-π、Topo Ⅱ在91例乳腺癌組織中的表達強度。結果 ER、PR、GST-π、Tope Ⅱ的表達強度與組織學分級顯著相關，Topo Ⅱ的表達強度與淋巴結轉移顯著相關，P-gP的表達強度與腫瘤大小差異顯著相關。ER和PR表達成正相關（r=0.637，P=0.000）。結論 ER、PR、GST-π、P-gP、Topo Ⅱ的檢測對選擇化療方案和評估預后有重要意義。

[關鍵詞]乳腺癌;P-糖蛋白;谷胱甘肽-s-轉移酶-π;DNA拓撲異構酶Ⅱ

[中圖分類號] R737.9? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2019）3（c）-0070-03

[Abstract] Objective To explore the expression of estrogen receptor （ER）， progesterone recetor （PR）， P-glycoprotein （P-gp）， glutathione-s-transferases π （GST-π） and P-glycoprotein Ⅱ （Topo Ⅱ） in breast cancer. Methods A total of 91 cases of specimens of breast cancer diagnosed by pathology after surgical excision in Huai′an Maternal and Child Health Hospital from September 2010 to January 2014 were selected. The expression of ER， PR， GST-π， P-gP， Topo Ⅱ in 91 patients from breast cancer tissues were detected by immunohistochemistry technique. Results The expression of ER， PR， GST-π， Topo Ⅱ were significantly associated with histological grades， there existed correlation between Topo Ⅱ and lympnode metastasis， P-gP expression was significantly associated with tumor size. The expression of ER was positively correlated with the expression of PR （r=0.637， P=0.000）. Conclusion The detection of the expression of ER， PR， GST-π， P-gP， Topo Ⅱ have important meaning for assessing the prognosis of patients with breast cancer and chemtherapy options.

[Key words] Brest carcinoma; P-glycoprotein; Glutathione-s-transferases-π; Topoisomerase Ⅱ

乳腺癌已成為世界范圍內影響女性健康的腫瘤之一。全世界每年將近有120萬新發乳腺癌病例，且將近50萬乳腺癌患者死亡[1]。乳腺癌的治療雖然取得了重大的進展，但其預后仍然不理想。一些資料顯示，乳腺癌的發生與雌激素分泌紊亂、大量接觸放射線、絕經遲、未婚、未育、晚育、遺傳因素等相關，但其病因尚未完全明了。研究顯示，乳腺癌組織中的雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）與激素治療、化療以及乳腺癌患者的預后存在著密切關系，目前已成為乳腺癌的常規檢測手段。P-糖蛋白（P-gP）、谷胱甘肽-s-轉移酶-π（GST-π）及DNA拓撲異構酶Ⅱ（Topo Ⅱ）等多重耐藥基因與患者的化療以及預后也密切相關。本研究采用免疫組化方法檢測乳腺癌組織中的ER、PR、P-gP、GST-π及Topo Ⅱ的表達并探討其相互間關系，為乳腺癌患者術后化療提供方案。

1資料與方法

1.1一般資料

收集淮安市婦幼保健院2010年9月～2014年1月手術切除后經病理診斷為乳腺癌的91例標本，其中導管內癌15例，浸潤性導管癌68例，其他類型8例;患者年齡為28～75歲，平均（41.2±10.1）歲;年齡>50歲39例，年齡≤50歲52例;腫瘤直徑≤2 cm 52例，2.1～5.0 cm 33例，>5.0 cm 6例;組織學1級9例，組織學2級46例，組織學3級36例。納入標準：有完整的臨床病理資料，所有病例術前未做過放、化療等其他治療。排除標準：病理資料不完整。本研究經淮安市婦幼保健院醫學倫理委員會批準，所有患者均知情同意。

1.2方法

1.2.1免疫組化? 常規石蠟切片，恒溫箱烘烤，脫蠟水化，水化按說明書進行操作。ER、PR、GST-π、P-gP、Topo Ⅱ抗體均購自福州邁新生物技術開發公司。

1.2.2判定標準? ER、PR、Topo Ⅱ陽性物質位于細胞核;GST-π陽性細胞為細胞漿染色;P-gP陽性物質位于胞膜及胞漿中。根據陽性細胞在隨機選取的500個腫瘤細胞中所占的比例進行判定，其中<10%為（-），≥10%且<25%為（+），≥25%而<50%為（++），≥50%為（+++）。GST-π、P-gP、TopoⅡ（++）以上[包括（++）級]作為陽性標準，ER、PR（+）以上[包括（+）]為陽性標準。

1.3組織學分級

按照《乳腺腫瘤WHO組織學分類、分級標準》（2012年版）對全部切片進行組織學分級[2]，主要按腺管形成、核的多形性、核分裂數三項指標進行評分。腺管形成：>75%為1分;10%～75%為2分;<10%為3分。核的多形性：核小、規則、形態一致為1分;核的形狀、大小有中等度的變化為2分;核的形狀、大小有明顯變化為3分。核分裂數：計數20個高倍視野（×400），然后算出每10個高倍視野的核分裂像數。0～5個/10 HPF為1分;6～10個/10 HPF為2分;>11個/10 HPF為3分。以上3項相加，總分3～5分為1級，低度惡性;6～7分為2級，中度惡性;8～9分為3級，高度惡性。

1.4統計學方法

采用SPSS 18.0統計學軟件分析數據，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗;計數資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗，采用Spearman進行相關分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1 ER、PR、GST-π、P-gP、TopoⅡ與乳腺癌病理指標的關系

ER、PR、GST-π、Topo Ⅱ的表達強度與組織學分級顯著相關（P<0.05）;Topo Ⅱ的表達強度與淋巴結轉移差異有統計學意義（P<0.05）;P-gP的表達強度與腫瘤大小顯著相關（P<0.05）（表1）。

2.2 ER、PR、GST-π、P-gP、Topo Ⅱ的相互關系

Spearman相關性分析顯示，ER和PR表達成正相關（r=0.637，P=0.000）（表2）。

3討論

乳腺癌是發生于乳腺導管和腺泡上皮細胞的惡性腫瘤，發病率呈上升趨勢，且有年輕化趨勢。研究顯示，乳腺癌的發生發展、臨床治療以及預后與ER、PR、GST-π、P-gP、Topo Ⅱ等多種生物標志物密切相關。

ER和PR能有效調節乳腺細胞的分化，當細胞發生癌變時，ER和PR會發生部分或完全的缺失[3]。ER和（或）PR的缺失或保留對乳腺癌治療方案的選擇有指導意義[4-5]，ER和PR已成為臨床上檢測乳腺癌以及制訂化療方案的常規檢測手段。本研究結果顯示，ER和PR的表達強度與腫瘤的大小和年齡以及淋巴結的轉移均無顯著相關，而與組織學分級顯著有關，提示乳腺癌細胞的分化越差，對激素的依賴性越低，可幫助選擇治療方案。進一步Spearman相關分析顯示，ER和PR成正相關，與杜璟等[6-7]的報道一致。

GST-π主要與烷化劑和蒽環類藥物的耐藥有關。本實驗中，GST-π蛋白的表達強度與組織學分級顯著相關，而與年齡、腫瘤大小以及淋巴結轉移差異無顯著性。GST-π與ER、PR的表達無相關性，這與李占文等[8]報道的文獻一致，但也有文獻報道與此不一致[9-10]，尚待進一步探討。

Topo Ⅱ已經成為很多化療藥物的靶點，細胞Topo Ⅱ水平影響Topo Ⅱ抑制劑的抗腫瘤活性。本研究結果顯示Topo Ⅱ的表達強度與組織學分級和淋巴結轉移差異有顯著性，提示在腫瘤的耐藥和轉移中Topo Ⅱ發揮了重要作用。

P-gP能排除細胞內高脂溶性和疏水性化療藥物，使細胞內藥物濃度始終維持于低水平，細胞由此獲得耐藥性[11]。P-gP表達水平與耐藥程度成正相關[12-13]。本研究結果顯示，P-gP的表達與GST、Topo Ⅱ無相關性，與鄧再興等[14]報道的文獻一致。但也有文獻與本研究結果不一致[15]。

綜上所述，ER、PR、GST-π、P-gP、Topo Ⅱ與乳腺癌的發生、發展、臨床治療以及預后密切相關。聯合檢測乳腺癌組織中ER、PR、GST-π、P-gP、Topo Ⅱ的表達強度，并結合患者的臨床資料，有助于制訂乳腺癌的治療方案和判斷預后。

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（收稿日期：2018-11-12? 本文編輯：祁海文）