長沙市氣傳真菌的分布特點及其與兒童特應性皮炎發病的關系

何謝玲，劉 娜，湯建萍，祝興元，唐金玲，韋 祝，常 靜

特應性皮炎（atopic dermatitis，AD）是兒童最常見的皮膚病之一，病因及發病機制復雜，而環境因素在發病中起著重要的作用。真菌在自然界分布廣泛，其孢子和菌絲能在空氣中播散。一方面真菌經過各種途徑進入或接觸人體后引起機體的各種過敏性反應；另一方面真菌還能引起機體的感染。通過調查研究長沙市氣傳真菌的主要種類、數量和分布規律，能為與氣傳真菌相關的兒童AD的臨床診斷、預防、治療提供重要依據。

1 資料與方法

1.1 材料與試劑

傘蓬式孢子取樣器，載玻片，蓋玻片，凡士林，乳酸棉蘭，光學顯微鏡，圖文采集系統，計算機。

1.2 方法

1.2.1 孢子收集 2014年11月—2015年10月，將傘蓬式孢子取樣器置于醫院4樓樓頂平臺上[1]，四面無遮擋。每24 h更換涂滿凡士林的載玻片。將換下的載玻片用乳酸棉蘭染色后蓋以22 mm×22 mm的蓋玻片，充分著色后于顯微鏡下觀察蓋玻片區域，根據喬秉善主編的《中國氣傳真菌彩色圖譜》對觀察到的孢子進行分類，并記錄各類孢子的數量。

1.2.2 氣象記錄 記錄2014年11月—2015年10月的氣溫、濕度、可吸入顆粒物（inhalable particulate matter，PM10）等氣象資料。

1.2.3 病例選擇與統計 統計2014年11月—2015年10月我院診斷為AD的長沙地區患兒，并統計每個月的發病人數。

2 結果

2.1 長沙市氣傳真菌的種類及每月分布

2014年11月—2015年10月長沙市全年曝片365張，共收集到真菌孢子36 425個，真菌種類69種，氣傳真菌孢子分布見表1。

2.2 長沙市氣象資料

從湖南省氣象局獲取調查期間長沙的月平均氣溫、濕度、可吸入顆粒物（PM10），并統計長沙市氣傳真菌孢子數與各氣象參數每月分布情況（圖1）。

2.3 全年長沙市兒童AD發病及分布情況

2014年11月—2015年10月我院診斷為AD的長沙地區的患兒共1 039例，診斷符合Williams標準[2,3]，其中773例為新發患兒，266例為復發患兒。所有AD患兒共進行了1 014人次真菌特異性IgE檢測，110次檢測結果為陽性。每月分布情況見圖2。

表1 2014年11月—2015年10月長沙市氣傳真菌的月分布情況

注：1411代表2014年11月，以此類推

2.4 數據分析

長沙市氣傳真菌飄散高峰為每年的10～12月及2～5月，1月份飄散最少，6月、7月份次之。本地區的優勢菌種類由多到少依次為枝孢屬、黑粉目、鏈隔孢、粘菌綱、小戴頓屬和小球腔菌屬。用SPSS20統計軟件分析全年每月收集到的真菌孢子數分別與溫度、濕度、PM10及兒童AD例數之間的相關性（表2）。收集的孢子數與溫度無相關性，而與大氣濕度，PM10以及AD患兒例數呈正相關，且均有統計學意義；而每月AD患兒例數與溫度、濕度和PM10均無相關性。分析孢子總數及各優勢菌與兒童AD例數、真菌IgE陽性患兒例數及陽性率之間的相關性見表3。AD患兒例數與優勢菌中的小戴頓屬相關，與其他5類優勢菌均無相關性。真菌IgE檢測結果陽性的患兒例數與小戴頓屬、小球腔菌及孢子總數均相關，且有統計學意義。而真菌IgE的陽性率與各優勢菌及孢子總數均無相關性。

表2 每月真菌孢子數與溫度、濕度、PM10及AD患兒例數之間的相關性分析

表3 孢子總數及各優勢菌與兒童AD發病數、真菌IgE陽性患兒例數及陽性率之間的相關性

注：1411代表2014年11月，以此類推

3 討論

長沙地屬亞熱帶季風氣候，全年溫暖濕潤，最低月平均溫度為1月7℃，且降水充沛，濕度較大，全年月平均相對濕度均＞50%。本次研究共收集氣傳真菌孢子67類，共計36 425個，全年可見真菌孢子飄散，除3月、6月和7月份收集孢子數較少，其他月份的孢子數均＞2 000，且10月、3月、11月份最高，孢子數＞4 000，種類和數量均遠高于太原、臺州等地區[4,5]，且優勢菌種類也不盡相同，一方面可能與長沙的氣候與之不同且適合真菌生長有關，另一方面可能與曝片高度有關[6]。

長沙地區全年的優勢菌為枝孢屬、黑粉目、鏈隔孢、粘菌綱、小戴頓屬和小球腔菌屬，該6類菌的總占有率為83.48%，其中枝孢屬為絕對優勢菌，年總占有率達42.17%。 數據分析顯示真菌IgE檢測結果陽性的患兒例數與小戴頓屬、小球腔菌及孢子總數均相關，提示空氣中真菌孢子的數量與真菌有關的AD患兒的發病有相關性，且小戴頓屬、小球腔菌或能促進AD的發病。而分析顯示孢子數量最多的枝孢屬孢子數量與AD患兒例數及真菌IgE檢測結果陽性的患兒例數均不相關，可能是由于長沙地區全年枝孢屬的數量均占優勢，數量最低月份均＞300個，而在此基礎上枝孢屬孢子數量的變化對AD患兒的發病影響不大。數據分析顯示真菌IgE的陽性率與各優勢菌及孢子總數均無相關性。AD的病因和發病機制復雜，涉及遺傳、環境和免疫等多方面因素[7]。一方面，環境和食物等其他和AD發病有關的因素[7]接觸的多少會影響與真菌相關的AD發病數在總AD發病數中的比例，另一方面，IgE的產生受多因素調控[10,11]，故而AD患兒自身的免疫狀態也會影響血清IgE的檢測結果。

此次研究顯示氣傳真菌孢子數與溫度不相關，這可能是由于長沙全年每月最低平均溫度不低于7℃，氣候溫暖，故而在長沙地區溫度對真菌的生長影響不大。此次研究收集到的數據分析表明氣傳真菌孢子數與大氣濕度呈正相關，這與Khotimah和Dahlan[12]的研究結果一致。同時孢子數也與PM10呈正相關。Khotimah 和Dahlan[12]證實總懸浮顆粒物濃度與真菌數呈正相關，筆者的分析結果與之一致。此外，本文數據顯示真菌孢子數與PM10的相關性強于濕度，這可能是由于孢子直接參與了生物氣溶膠的構成[13]。

真菌在大氣中廣泛分布，能作為變應原引起機體的變態反應。筆者之前的研究顯示兒童特異性IgE檢測真菌的陽性率為2.04%，次于塵螨、屋塵、動物皮毛屑、樹木花粉，在Ⅰ型過敏反應環境致敏原中居第5位[14]。Carlsten 等[15]的研究表明變應原在兒童AD的發生發展及預后轉歸中起重要作用。更有研究報道AD患者病情的嚴重程度與某些真菌的定植有關[16]，且皮膚的狀況與定植的種類相關。本次研究發現氣傳真菌孢子數與AD患兒例數呈正相關，提示氣傳真菌能促進AD的發生，而AD患兒患病數與溫度、濕度及PM10均無相關性。

關于氣傳真菌有多地的調研，但長沙氣候獨特，且國內尚少見氣傳真菌與兒童AD相關性的研究，此研究獲得了長沙地區全年氣傳真菌數量和種類的分布規律，能為與真菌有關的多種疾病的臨床診斷、治療及及時規避以預防提供理論依據。