玫瑰果籽油的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析

宗寧宇，張志國，王 彬

(1.齊魯工業(yè)大學(xué)(山東省科學(xué)院) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，濟(jì)南 250400； 2.山東華玫生物科技有限公司，濟(jì)南 250400)

玫瑰果，是玫瑰花凋謝后由花托發(fā)育而成的漿果類物質(zhì)，紅色，球形，直徑20 mm左右，玫瑰果中含有果籽，稻米大小[1-2]。玫瑰果主要分布在保加利亞、俄羅斯、土耳其、法國、摩洛哥等國家；在我國，主要分布于山東、甘肅、新疆、北京、山西、遼寧、陜西等地，其中以甘肅苦水玫瑰和山東平陰縣玫瑰最為有名[3]。玫瑰果中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，果肉中含有黃酮、VC、VB、VE、VK、礦物質(zhì)、糖類、蛋白質(zhì)、果酸和脂肪酸等，尤其是VC的含量遠(yuǎn)高于其他水果，是具有“VC之王”的獼猴桃的5倍左右[4-5]。玫瑰果具有抗氧化、降血糖、降血脂、消炎等多種生物活性。在土耳其，玫瑰果被作為日常水果食用；而在我國，《中藥大辭典》中記載：玫瑰果具有健脾消食，活血調(diào)經(jīng)，斂肺止咳等作用[6-7]。研究表明玫瑰果籽油中含有大量不飽和脂肪酸，同時(shí)亞油酸和亞麻酸等人體必需脂肪酸含量豐富[8]。缺乏必需脂肪酸往往會引起生長遲緩、生殖障礙、皮膚損傷、視力下降等多種疾病[9-10]。因此，玫瑰果籽油具有良好的開發(fā)前景。目前，國內(nèi)外對玫瑰果籽油的研究主要集中在提高玫瑰果籽油的提取率和一些常見脂肪酸含量的分析上。本文通過采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對玫瑰果籽油的成分進(jìn)行分析，進(jìn)而為玫瑰果籽油的開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 原料與試劑

玫瑰果采自山東平陰玫瑰研究所，將成熟的玫瑰果的果肉和果籽分離，果籽105℃烘干后，備用。

石油醚(沸程60～90℃)、甲醇、正己烷，色譜純；鹽酸、無水硫酸鈉，分析純；超純水。

1.1.2 儀器與設(shè)備

電熱恒溫干燥箱；RE-6000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；循環(huán)水式真空泵；粉碎機(jī)；恒溫水浴鍋；索氏提取器；7890bGC-5977bMS，美國Agilent公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 玫瑰果籽油的提取

將烘干后的玫瑰果籽用粉碎機(jī)粉碎后過100目篩，稱取15.00 g玫瑰果籽粉，置于索氏提取器中，用300 mL石油醚在80℃條件下回流提取4 h，冷卻后，將提取液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上旋蒸回收石油醚，得到金黃透亮的玫瑰果籽油。

1.2.2 樣品的甲酯化

稱取0.5 g玫瑰果籽油于錐形瓶中，加入5 mL 1 mol/L HCl-甲醇溶液，于70℃水浴加熱40 min，冷卻后，向錐形瓶中加入5 mL超純水，然后將錐形瓶中的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，并加入5 mL正己烷，劇烈搖動(dòng)分液漏斗，靜置分層，放出下層溶液并用5 mL正己烷反復(fù)萃取3次，合并萃取液于分液漏斗中。將超純水倒入分液漏斗內(nèi)對含有脂肪酸酯的正己烷萃取液進(jìn)行多次洗滌，直至廢水層的pH為7左右。得到的酯層溶液用無水硫酸鈉干燥過夜，過濾，將濾液用適量正己烷溶液稀釋，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾后，放入2～4℃冰箱中，待測[11]。

1.2.3 GC-MS分析條件

GC條件：Agilent 7890b氣相色譜儀；進(jìn)樣量10 μL；色譜柱為HP-5MS毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度240℃；程序升溫為起始溫度50℃，以5℃/min升至250℃，保持40 min；分流比10∶1。

MS條件：Agilent 5977b質(zhì)譜檢測器，傳輸線溫度250℃，離子源溫度230℃，電子電離模式，溶劑延遲時(shí)間3 min；全掃描模式(SCAN)，分子離子碎片掃描范圍為(m/z)50～550。

2 結(jié)果與分析

采用索氏提取法提取玫瑰果籽油，測得玫瑰果籽油的得率為11.61%，通過GC-MS對玫瑰果籽油成分進(jìn)行分析，其總離子流圖見圖1。經(jīng)NIST.14標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖檢索并采用峰面積歸一化法最終確定玫瑰果籽油成分組成及相對含量見表1。

圖1 玫瑰果籽油總離子流圖

表1 玫瑰果籽油成分組成及相對含量

由表1可以看出，玫瑰果籽油中一共鑒定出了18種成分，其中包括15種脂肪酸，2種甾醇類物質(zhì)和γ-生育酚。脂肪酸占總組分含量的71.27%；15種脂肪酸中飽和脂肪酸為十二烷酸(0.09%)、十四烷酸(0.09%)、15-甲基十六烷酸(0.19%)、棕櫚酸(6.74%)、硬脂酸(3.11%)、二十二烷酸(0.74%)、二十六烷酸(1.80%)、二十八烷酸(1.90%)、花生酸(1.16%)，占總組分含量的15.82%；不飽和脂肪酸為棕櫚油酸(0.13%)、油酸(0.15%)、亞油酸(27.19%)、亞麻酸(26.52%)、2-羥基-9,12,15-十八碳三烯酸(0.81%)、順式-13-二十碳烯酸(0.65%)，占總組分含量的55.45%。其中人體必需脂肪酸亞油酸和亞麻酸含量比較高，占總組分含量的53.71%。亞油酸具有降低血液膽固醇、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化、擴(kuò)張血管的作用，同時(shí)可以降低高血壓、高血脂、心絞痛、老年性肥胖癥的發(fā)生概率[12-13]。亞麻酸在人體生長發(fā)育中也具有重要作用，包括降血脂、降膽固醇、降壓、抗癌、改善心腦血管疾病、提高腦神經(jīng)功能、預(yù)防過敏性疾病等[14-15]。檢測到玫瑰果籽油中甾醇類物質(zhì)占總組分含量的27.29%，其中包括菜油甾醇(6.68%)和γ-谷甾醇(20.61%)。甾醇是食物中重要的活性因子，也是所有真核生物細(xì)胞膜的重要組成部分，參與重要的生命活動(dòng)，植物甾醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)與動(dòng)物甾醇的結(jié)構(gòu)略有不同，具有抑制腫瘤、調(diào)節(jié)人體甾體激素、抗衰老、抗氧化等作用[16-17]。玫瑰果籽油中植物甾醇的含量比較高，尤其是γ-谷甾醇含量高達(dá)20.61%。此外，玫瑰果籽油中還檢測到γ-生育酚，含量為1.44%，γ-生育酚是生育酚的一種同分異構(gòu)體。生育酚是一種良好的抗氧化劑，尤其是能夠通過清除脂質(zhì)過氧化物所產(chǎn)生的自由基進(jìn)而穩(wěn)定生物膜的脂雙層，使細(xì)胞免受過氧化物的傷害[18]，同時(shí)生育酚是維持肌肉、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和血管系統(tǒng)的正常代謝，以及許多生理功能所必需的物質(zhì)[19]。

3 結(jié) 論

采用索氏提取法對玫瑰果籽油進(jìn)行提取，得到的玫瑰果籽油得率為11.61%。利用GC-MS對玫瑰果籽油進(jìn)行成分分析，共鑒定出18種成分：15種脂肪酸，2種甾醇類物質(zhì)和γ-生育酚。其中脂肪酸占所測總組分含量的71.27%，甾醇類物質(zhì)占所測總組分含量的27.29%，γ-生育酚占所測總組分含量的1.44%。玫瑰果籽油所含主要的脂肪酸為不飽和脂肪酸，特別是其所含的亞油酸和亞麻酸，占總組分含量的53.71%。另外甾醇類物質(zhì)為菜油甾醇和γ-谷甾醇，含量分別為6.68%和20.61%。