中國藥典2015版第一增補本人參、西洋參有機氯農(nóng)藥殘留量的測定

高 宇，潘曉鵬，于立亮，盧艷玲，孫嘉悅，杜躍中*

（吉林人參研究院·吉林通化·134001）

1 材料與儀器

1.1 實驗材料

人參、西洋參干品

1.2 化學(xué)試劑

丙酮 （分析純）—天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；

二氯甲烷 （分析純）—天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；氯化鈉（分析純）—國藥集團化學(xué)試劑有限公司；無水硫酸鈉 （分析純）—國藥集團化學(xué)試劑有限公司；

正己烷（分析純）—國藥集團化學(xué)試劑有限公司；硫酸（優(yōu)級純）—哈爾濱試劑工廠；超純水—實驗室超純水機制備。

1.3 儀器

電子分析天平—BP211D

氣相色譜儀—安捷倫7890B

調(diào)速多用振蕩器—HY-4

離心機—TDZ5-WS

臺式低速離心機—TDZ5

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀—RE-52AA

超純水機—Dura 24FV。

2 實驗步驟

2.1 繪制工作曲線

使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，甲體-六六六、乙體-六六六、丙體六六六、丁體-六六六、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT、五氯硝基苯、六氯苯、七氯、環(huán)氧七氯、艾氏劑、順式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹配制成16種有機氯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，溶劑為正己烷，配制成濃度分別為 1、2、5、10、20、50、100 ng/mL 的 標(biāo)準(zhǔn)混 合 溶液。在安捷倫7890B氣相色譜儀上編輯色譜條件，進樣口溫度230℃，檢測器溫度300℃，不分流進樣。程序升溫：初始溫度60℃，保持0.3分鐘，以每分鐘60℃升至170℃，再以每分鐘10℃升至220℃，保持10分鐘，再以每分鐘1℃升至240℃，每分鐘15℃升至280℃，保持5分鐘。分別吸取16種單一標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，進行色譜分析，對應(yīng)的出峰時間確定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。編輯序列，分別吸取不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1μL，進行上機分析，繪制工作曲線。

用單一標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)確定各組分的出峰時間，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的出峰情況如圖1所示。

圖1 混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)出峰情況

使用 1、2、5、10、20、50、100 ng/mL 7 個梯度不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行色譜分析，通過濃度和峰面積繪制16種有機氯各組分的工作曲線，如表1所示。

表1 繪制16種有機氯的工作曲線

2.2 樣品處理

取供試品，粉碎成細(xì)粉（過二號篩）稱取 5.000g，置具塞三角瓶中，加水30mL，振搖10分鐘，精密加丙酮50mL，稱定重量，超聲處理 （功率300W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補足減失的重量，再加氯化鈉約8g，精密加二氯甲烷25mL，稱定重量，超聲處理（功率300W，頻率40kHz）15分鐘，再稱定重量，用二氯甲烷補足減失的重量，振搖使氯化鈉充分溶解，靜置，轉(zhuǎn)移至離心管中，離心（每分鐘3000轉(zhuǎn)）3分鐘，使完全分層，將有機相轉(zhuǎn)移至有適量無水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，放置30分鐘。精密量取15mL，至40℃水浴中減壓濃縮至約1mL，加正己烷約5mL，減壓濃縮至近干，用正己烷溶解并轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)移至離心管中，緩緩加入硫酸溶液（9→10）1mL，振搖 1分鐘，離心（每分鐘3000轉(zhuǎn)）10分鐘，分取上清液，加水1mL，振搖，取上清液，待氣相色譜儀檢測。

分別稱取取人參、西洋參樣品，按照上述處理方法制成供試液。分別精密吸取供試品溶液1μL，注入色譜儀，分別連續(xù)進樣3次，取3次平均值，按外標(biāo)法計算得到最終結(jié)果。

3 結(jié)果

3.1 人參樣品中有機氯類農(nóng)藥殘留量

制得人參樣品供試液，安捷倫氣相色譜儀7890B連續(xù)進樣3次，色譜圖如圖2、圖3、圖4所示。均值，計算得到人參中甲體-六六六、乙體-六六六、丙體六六六、 丁體-六六六、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT、五氯硝基苯、六氯苯、七氯、環(huán)氧七氯、艾氏劑、順式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹的含量。總六六六（甲體-六六六、乙體-六六六、丙體六六六、丁體-六六六之和）為0.046mg/kg；總滴滴涕（PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT 之和）為 0.023mg/kg；五氯硝基苯為0.0070mg/kg；六氯苯為0.0080mg/kg；七氯（七氯、環(huán)氧七氯之和）為0.029mg/kg；艾氏劑為0.0060mg/kg；氯丹（順式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹之和）未檢出。

圖2 人參樣品第一針色譜圖

圖3 人參樣品第二針色譜圖

圖4 人參樣品第三針色譜圖

3.2 西洋參樣品中有機氯類農(nóng)藥殘留量

制得西洋參樣品供試液，安捷倫氣相色譜儀7890B連續(xù)進樣3次，色譜圖如圖5、圖6、圖7所示。

圖5 西洋參樣品第一針色譜圖

圖6 西洋參樣品第二針色譜圖

圖7 西洋參樣品第三針色譜圖

在氣相色譜儀上讀出各組分濃度，三次測量取平均值，計算得到西洋參中甲體-六六六、乙體-六六六、丙體六六六、丁體-六六六、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT、五氯硝基苯、六氯苯、七氯、環(huán)氧七氯、艾氏劑、順式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹的含量。總六六六（甲體-六六六、乙體-六六六、丙體六六六、丁體-六六六之和）為0.053mg/kg；總滴滴涕（PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT 之和） 為 0.068mg/kg；五氯硝基苯為0.039mg/kg；六氯苯為0.013mg/kg；七氯（七氯、環(huán)氧七氯之和）為 0.032mg/kg；艾氏劑為0.010mg/kg；氯丹（順式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹之和）未檢出。

4 結(jié)論

藥典規(guī)定樣品中含總六六六 （甲體-六六六、乙體-六六六、丙體六六六、丁體-六六六之和）不得過0.2mg/kg；總滴滴涕（PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT之和）不得過0.2mg/kg；五氯硝基苯不得過0.1mg/kg；六氯苯不得過0.1mg/kg；七氯（七氯、環(huán)氧七氯之和）不得過0.05mg/kg；艾氏劑不得過0.05mg/kg；氯丹（順式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹之和）不得過0.1mg/kg。本次實驗檢測的人參、西洋參樣品均符合藥典規(guī)定，實驗結(jié)果真實、可靠，本實驗室有開展該項目的能力。